孙永强
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：辽宁省大学生创新创业训练计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大约克猪SLA-1原核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2016年
- 为构建大约克猪 SLA-1胞外区的原核表达载体及表达目的蛋白,试验设计1对引物,经 PCR 扩增获得大约克猪 SLA-1胞外区基因（命名为 SLA-1-DYKe）,将此片段克隆至 pMD 19-T Simple Vector,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,经 Nde Ⅰ和 Xho Ⅰ双酶切筛选阳性克隆菌并测序,将目的基因插入到原核表达载体 pET-28a （＋）中,转化至宿主菌 BL21（DE3）进行诱导表达,用 SDS-PAGE 检测目的蛋白的表达情况,大量诱导提取包涵体并检测。结果显示,PCR 成功扩增 SLA-1-DYKe 的胞外区,得到大小为837 bp 的目的基因,目的基因成功克隆至pMD 19-T Simple Vector,并获得序列正确的重组质粒。以得到的重组质粒成功构建了 SLA-1-DYKe/pET-28a （＋）表达载体,目的蛋白大小约为34 ku。本研究成功构建了大约克猪 SLA-1原核表达载体,获得了表达蛋白,为今后研究大约克猪 SLA-1的空间结构和基因功能奠定了基础。
- 张秀娟杨杰孙永强高凤山
- 关键词：大约克猪基因原核表达载体
