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马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控被引量：5: 2016年; 为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子电压门控通道1(HVCN1)基因mRNA的3'-UTR相应位点并发生特异性相互作用。实时荧光定量PCR分析进一步证实,miR-M12-5p能够在体内下调HVCN1基因的表达水平。上述结果表明,miR-M12-5p可以靶向调控宿主基因HVCN1的表达。; 李会珍滕蔓党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平; 关键词：马立克氏病病毒靶基因

马立克病病毒超强毒株GX0101感染宿主部分病毒基因表达水平及致病阶段分析被引量：3: 2016年; 旨在探讨马立克病病毒（MDV）超强毒株GX0101对宿主的感染过程及致病阶段,即＂Cornell模型＂,为进一步使用该毒株研究MDV的致病或致瘤机制奠定基础。用GX0101接种1日龄SPF鸡,建立了感染宿主的动物模型;然后用RT-qPCR分析10个具有代表性的MDV蛋白编码基因在感染不同时间点的动态基因转录水平。结果显示,GX0101感染发病鸡的临床症状及剖检病变与典型的马立克病一致;MDV编码的结构蛋白基因gB、gE和UL6、非结构蛋白基因UL42和UL52、立早期基因ICP4、水平传播相关基因UL13以及磷酸化蛋白基因pp38具有相似的转录水平和趋势,均在GX0101感染后7d上升至第一个峰值,10d降至低谷,14d又逐渐升高并在21d达到第二个峰值,30~60d逐渐下降并处于较低的转录水平;MDV编码的原癌基因meq和毒力相关基因RLORF6在GX0101感染7d即持续升高,并在14~60d的试验周期内较长时间处于高转录水平。结合作者此前研究及本文结果分析,GX0101感染宿主的＂Cornell模型＂：早期增殖性-限制性感染期为1~7d,潜伏感染期约为10d前后,晚期溶细胞性感染及免疫抑制期发生于14~21d,而T细胞转化及淋巴瘤形成阶段可能在14d前后就已经开始。; 马圣明滕蔓余祖华党露李会珍丁轲邓瑞广罗俊; 关键词：马立克病病毒超强毒株实时荧光定量PCR

河南土鸡群马立克病病毒流行毒株的分离鉴定及分子进化分析被引量：5: 2018年; 本研究旨在分离鉴定河南鸡群马立克病病毒（Marek’s disease virus，MDv）流行毒株，了解当前MDV分子进化特征并为鸡马立克病（MD）的有效防控提供参考。根据MDV基因组设计了meq、gE、gI、gB、pp38以及132～bp重复序列基因的特异性引物，应用PCR扩增和DNA测序分析对河南焦作土鸡群8份MD疑似病例进行了确诊，并通过鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传培养和间接免疫荧光试验（IFA）分离鉴定了3个流行毒株，分别命名为HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103。结果显示，3个MDV分离株均为血清1型（MDV1）毒株，未发生禽网状内皮增生症病毒（REV）共感染，并且132-bp重复序列基因均为双拷贝。meq、gE和gI基因核苷酸序列比对分析发现，临床病例样本及3个MDV新分离株的meq基因与国内外温和毒或疫苗毒株的meq基因核苷酸序列同源性仅为64．7％～78．8％，但与MDV强毒株的同源性高达98．9％～100．0％；gE和gJ基因的核苷酸序列同源性均较高，分别为99．1％～99．9％和99．3％～100．0％。系统发生树分析结果表明，HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103与绝大多数此前分离的河南毒株及国内MDV强毒株同处于一个大的进化分支。研究结果表明，3个分离株HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103很可能是当前河南土鸡群中流行的致病性MDV—1毒株，其确切的致病型及导致免疫失败的原因仍有待进一步深入研究。; 马圣明滕蔓李会珍党露党露郅玉宝郅玉宝邓瑞广; 关键词：马立克病病毒病毒分离 MEQ 进化分析

马立克病病毒单克隆抗体的制备被引量：4: 2018年; 以纯化的经鸡胚成纤维细胞（CEF）培养的马立克病病毒（MDV）超强毒株GX0101病毒粒子作为免疫原，制备特异性识别MDV的单克隆抗体。GX0101感染CEF后第96小时收集细胞并反复冻融3次，离心取上清，选用100ku的切向流超滤离心管浓缩，浓缩液通过Sepharose 4 Fast Flow（4FF）凝胶作为层析介质分离纯化MDV病毒粒子，聚合酶链反应（PCR）和实时荧光定量PCR分析不同收集峰MDv病毒含量，并经过透射电子显微镜观察到直径约100nm的MDV病毒粒子。进一步用100ku的切向流超滤离心管浓缩,制备峰尖病毒浓缩液，以此免疫雌性BALB／c小鼠制备单克隆抗体。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）和Western—blot筛选,最终获得107个阳性克隆。由其中1株强阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株1082制备的单克隆抗体腹水1PMA效价为1：2．56×10^6。本研究结果为后续MDV单克隆抗体的筛选、鉴定及诊断试剂研发奠定了重要基础。; 宋利娜滕蔓郑鹿平李会珍李会珍薛正飞郅玉宝郅玉宝罗俊; 关键词：马立克病马立克病病毒单克隆抗体 IPMA

借助LSPR‑SELEX方法筛选的特异结合链霉亲和素的核酸适配体序列及其应用: 本发明属于食品免疫检测领域，主要涉及局域表面等离子体共振技术筛选到一条特异结合SA的核酸适配体及其应用。所述的核酸适配体序列如SEQ ID NO.3所示。本发明借助LSPR‑SELEX技术，经过两轮对靶标物的核酸适配体筛...; 邓瑞广王方雨郝俊芳邢广旭余秋颖胡骁飞腊贵晓郅玉宝王晶李会珍赵东史西保陈鑫鑫; 文献传递

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李会珍

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