柳青
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：西南大学药学院现代生物医药研究所更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金博士科研启动基金更多>>
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- 转录组分析外源添加癸酸对玫瑰孢链霉菌细胞生理的影响
- 达托霉素是一种重要的对抗多重耐药细菌的抗生素.达托霉素的生物合成依赖在培养过程中添加其合成前体癸酸,然而高浓度的癸酸对达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌有毒性,这限制了达托霉素的产量.
- 柳青廖国建
- 玫瑰孢链霉菌SWU2010遗传转化体系的建立和优化
- 2013年
- 玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)是近几年备受关注的抗生素—达托霉素(Daptomycin)的产生菌,具有重要的研究价值和应用前景.目的:为了对Streptomyces roseosporus中的功能基因进行研究,构建达托霉素高产菌株,需要建立一种稳定、高效的遗传转化体系.方法:以pSET152和pKC1139为载体,探索优化了S.roseosporus SWU2010与大肠杆菌进行接合转移的条件,以此为基础将体外构建的ploxP质粒和带有cre重组酶基因的质粒pALcre先后转入S.roseosporus SWU2010中.结果:AS-1培养基是接合转移的最佳培养基;孢子的预萌发条件为50℃热激10 min,转化效率达10-6～10-5.另外,抗生素覆盖时间16～18 h效果最好.利用已建立的接合转移体系,成功将两侧带有loxP位点的安普霉素抗性基因成功敲除.实验结果为进一步研究达托霉素的生物合成基因和对达托霉素进行组合生物合成改造奠定了基础.
- 马廷梅柳青王磊胡昌华廖国建
- 关键词：CRELOXP
