武二丽
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程经济管理更多>>
- 检测生鲜猪肉中大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌的双重PCR方法建立与应用
- 引言几年来,食源性致病菌是食源性疾病的首要因素。其多数爆发案例是通过致病性细菌污染食品而引起的。其中,大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)是两种重要的致病菌。猪肉作为我国消费量最...
- 张秀方武二丽刘肖张伟强胡慧邵刘云王亚宾陈丽颖
- 共培养沙门菌对粪肠球菌N41株生长特性及毒力基因的影响被引量：1
- 2017年
- 为探讨共培养条件下沙门菌对粪肠球菌N41分离株生长特性及其不同生长时期26种毒力基因转录的影响,将N41菌株、沙门菌菌株单独/混合培养后,分别进行菌落计数并绘制生长曲线,观察其生长状况及影响,同时提取其对数中期、对数后期、稳定前期和稳定期的总RNA,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法分析N41菌株26种毒力基因的转录情况。结果显示,共培养后沙门菌和N41生长均受到影响,其中,在N41菌体浓度降低约3.9倍,而沙门菌菌体浓度降低约110倍。在N41菌株26种毒力基因中,沙门菌促进了ebpA、ebpC、rnjB、ace、ebpR、psr等12种毒力基因在4个不同生长时期的转录,但同时也降低了毒力基因SlyA和sprE在4个生长期中转录水平;另外,除了CylL-S、CylL-L、efaA和AS在4个生长时期变化不明显外,其余的大部分毒力基因都在对数后期转录水平有明显上升,但在其他生长时期则表现不同。这说明,两菌共培养后,N41菌株明显抑制了沙门菌的生长,同时沙门菌也整体促进了N41菌株毒力基因的转录。本试验为研究细菌间相互作用机制以及肠球菌的致病机制奠定基础。
- 武二丽和春昊金钺刘玲玲胡慧曹晗王亚宾陈丽颖
- 关键词：沙门菌毒力基因荧光定量PCR
- 双重PCR检测生鲜猪肉中大肠杆菌O157∶H7和沙门菌方法的建立与应用被引量：2
- 2015年
- 目的建立生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的双重PCR检测方法,并初步调查生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的污染情况。方法以大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因和沙门菌inv A基因为靶基因设计引物。通过对单个基因PCR和多重基因PCR扩增进行特异性、敏感性试验以及优化反应体系,建立快速检测大肠杆菌和沙门菌的双重PCR法。在郑州市不同地区的综合性超市、冷鲜肉专卖店和农贸市场随机抽检144份生鲜猪肉样品,分别进行了PCR检测和常规微生物学检验。结果建立的双重PCR方法特异性好,抗干扰能力强,灵敏度可达到10 pg/μl。在144份样品中检测出大肠杆菌的样品数为10份,检出率为6.94%;检出沙门菌的样品数为13份,检出率为9.03%;大肠杆菌和沙门菌同时检出的有2份,占总样品的1.39%。结论初步建立了同步、简便、快速、灵敏地检测生鲜猪肉中大肠杆菌、沙门菌的双重PCR方法;生鲜猪肉中存在致病菌的污染问题,将威胁到食品安全和人体健康,不容忽视。
- 张秀方武二丽刘肖张伟强胡慧邵刘云王亚宾陈丽颖
- 关键词：沙门菌双重PCR食源性致病菌食品安全
- 检测猪源粪肠球菌抗体的间接ELISA方法建立
- 根据GenBank已发表粪肠球菌Ace基因(Genbank NO.AF260879)的核苷酸序列设计l对引物,通过PCR扩增ace基因保守序列A片段部分序列,将其克隆到pET-32a(+)裁体中,构建了原核表达载j-pE...
- 陈丽颖张祥刘肖张秀方武二丽张伟强胡慧王亚宾
- 关键词：粪肠球菌原核表达ELISA
- 共培养对猪源粪肠球菌N41株部分生物学特性的影响
- 2018年
- 为探讨粪肠球菌在体外共培养条件下其生物膜形成、黏附能力和抗吞噬作用等生物学特性的变化,本研究以猪源粪肠球菌N41菌株为受试菌株,将其分别与大肠杆菌O157∶H7、沙门氏菌肠炎亚种ATCC 14028以及金黄色葡萄球菌ATCC 25923等参考菌株共培养,通过结晶紫染色法测定其生物被膜生成量,通过菌落计数对猪肠上皮细胞黏附情况和小鼠腹腔巨噬细胞的抗吞噬能力进行定量。结果显示,大肠杆菌O157∶H7对粪肠球菌N41菌株生物膜生成量、黏附作用和抗吞噬作用的变化均不明显(p>0.05);沙门氏菌ATCC 14028对粪肠球菌N41菌株的黏附作用明显增强(0.010.05);而金黄色葡萄球菌ATCC 25923则对粪肠球菌N41菌株的生物膜量增加和黏附作用明显增强(p<0.01),抗吞噬作用也所有增强(0.01
- 和春昊武二丽李滨洲赵娣金钺王亚宾王亚宾
- 关键词：粪肠球菌共培养生物膜
- 毒力因子ace基因敲除突变株的构建及对细菌黏附与生物被膜形成的影响
- 引言 肠球菌是一种能引发家畜家禽等多种动物的致病的革兰氏阳性的兼性厌氧类球菌.近几年,临床有关肠球菌的报道较多,由于临床药物的滥用,粪肠球菌耐药菌株也越来越多,这对养猪业的发展带来巨大损失.肠球菌菌体内部的毒力因子是引发...
- 武二丽李英英张秀芳刘肖王亚宾绍刘云陈丽颖
