目的建立LC-MS/MS方法,研究TM-2在大鼠、比格犬和人肝微粒体中的酶促反应动力学。方法建立测定大鼠、比格犬及人肝微粒体中温孵样品TM-2的LC-MS/MS方法,应用Graph Pad Prism 5.0软件分析数据,计算酶促反应动力学常数Vmax和Km,并计算体外酶对药物的清除率(CLint)。结果 TM-2在大鼠、比格犬和人肝微粒体中的最大反应(代谢)速率Vmax分别为16.3、354.6和154.8 nmol·min^(-1)·mg(protein)^(-1);米氏常数Km分别为25.7、313.8和89.4μmol·L^(-1);内在清除速率CLint分别为0.63、1.13和1.73 m L·min^(-1)·mg(protein)^(-1)。结论比格犬、人肝微粒体中催化TM-2的代谢酶活性显著大于大鼠中催化TM-2的代谢酶活性,而TM-2与大鼠肝代谢酶的亲和力较高。本实验从酶学的角度阐明了TM-2在不同种源间的代谢差异,为进一步研究该药的代谢性相互作用奠定基础。
目的建立阿仑膦酸钠在人体内尿药浓度的高效液相色谱-荧光检测法,并应用于药动学研究。方法采用Shisheido Capcell Pak C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,洗脱方式:梯度洗脱,流动相A:25mmol·L-1柠檬酸-25mmol.L-1焦磷酸钠;流动相B:水;流动相C:乙腈-甲醇(1∶1),流速为1.0mL.min-1,柱温40℃;内标物:帕米膦酸钠;荧光检测:激发波长为260nm;发射波长为310nm。28名健康受试者服用阿仑膦酸钠片70mg后,测定阿仑膦酸钠的尿药浓度,并计算药动学参数。结果在25～5000μg·L-1内,阿仑膦酸钠与内标峰面积的比值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9987)。日内及日间精密度(RSD)和准确度(RE)均符合要求。阿仑膦酸钠片在体内的累积排泄量Aet为(253830±267241)ng,最大排泄速率Umax为(58508±55394)ng.h-1。结论本试验提供了阿仑膦酸钠体内尿药浓度的HPLC测定方法及药动学参数,为临床应用提供了依据。
