冯利伟
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：河北师范大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省科技支撑计划项目河北省高等学校科学技术研究青年基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- D-氨基酸氧化酶结构的研究进展被引量：2
- 2013年
- D-氨基酸氧化酶氧化D-氨基酸生成相应的α-酮酸和氨,还原型黄素被氧化生成过氧化氢。D-氨基酸氧化酶在精神分裂症的病理、生理学研究和D-氨基酸检测等方面都发挥着关键的作用。主要就结构已解析的几个D-氨基酸氧化酶的序列同源性、结构组成、活性中心、抑制剂以及与辅酶FAD结合能力等方面进行介绍。
- 赵冉冉冯利伟张金秀徐书景鞠建松
- 关键词：D-氨基酸氧化酶活性位点抑制剂FAD
- 原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶及突变体的酶学特性研究
- [目的]研究原核生物来源D-氨基酸氧化酶的酶学特性.[方法]通过PCR从原玻璃蝇节杆菌中克隆获得D-氨基酸氧化酶基因,构建原核表达载体,并以该表达载体为模板,采用QuickChange Site-Directed Mut...
- 冯利伟李辉欣徐书景鞠建松赵宝华
- 一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法
- 本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列比对结果，通过定点突变技术将原玻璃蝇节杆菌(<I>Arthrobacter</I><I>protophormiae</I>,DSM15035)中D-...
- 鞠建松徐书景赵宝华李辉欣冯利伟
- 文献传递
- 原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶及突变体的酶学特性被引量：3
- 2014年
- 【目的】研究原玻璃蝇节杆菌(DSM 20168)中D-氨基酸氧化酶的酶学特性。【方法】通过PCR从原玻璃蝇节杆菌(DSM 15035,20168)中克隆获得D-氨基酸氧化酶基因apdaao-1和apdaao-2,构建原核表达载体,以表达质粒pET-ApDAAO-2为模板,采用QuickChange Site-Directed Mutagenesis技术构建定点突变体,经过原核表达及纯化获得重组型和突变体酶蛋白,分析其酶学特性。【结果】通过原核表达及纯化成功获得了2个重组蛋白和4个突变体酶蛋白,SDS-PAGE检测显示其分子量均约为36 kDa;酶学特性分析表明,ApDAAO-2和突变体蛋白的最适反应温度为30℃;ApDAAO-2和T286A的最适反应pH范围为7.0-11.0,其它突变体为8.0-11.0;ApDAAO-2和突变体都具有较广泛的底物特异性,除T256K的最适底物为D-Phe外,其余均为D-Met;动力学参数测定结果显示,以二级表观常数kcat/Km表示,对于底物D-Met或D-Phe,ApDAAO-2和4个突变体的kcat/Km值均比ApDAAO-1和pKDAAO高数倍以上。【结论】ApDAAO-2及突变体具有比ApDAAO-1和pKDAAO更广泛的底物特异性和较高的催化效率,有一定的商业应用价值。
- 冯利伟郭姣洁李辉欣徐书景鞠建松赵宝华
- 关键词：D-氨基酸氧化酶定点突变
- 一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法
- 本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列比对结果，通过定点突变技术将原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacter protophormiae)中D-氨基酸氧化酶的115、119及286三个位点...
- 鞠建松徐书景赵宝华李辉欣冯利伟
- 文献传递
