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全局转录工程法构建产S-腺苷蛋氨酸重组酿酒酵母的研究被引量：5: 2012年; 利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶II中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体。并用醋酸锂转化的方法转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2846中,研究了SPT15和TAF25的定向进化对酿酒酵母产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)的影响。经过筛选分别获得了重组酿酒酵母菌株spt15-81和taf25-36。对其发酵性状分别进行了初步研究,在28℃、200 r/min条件下,250 mL摇瓶(50 mL O-medium)发酵48 h时,SAM的产量分别比对照菌株提高了2.0倍和1.8倍。由此表明。; 曹喜涛陈凯李扬窦洁王慧周长林奚涛; 关键词：酿酒酵母易错PCR S-腺苷甲硫氨酸

发酵液中莽草酸分离纯化的工艺研究被引量：2: 2013年; 为了有效提取基因工程菌DHPYAAS-T7发酵液中的莽草酸,文章采用了离子交换色谱法对发酵液中莽草酸进行分离纯化。包括发酵液的预处理、离子交换树脂的选择、动态吸附、洗脱、脱色、脱盐以及纯度检测等过程。研究结果表明,所选的4种树脂中,717型强碱性阴离子交换树脂的吸附容量最大,发酵液的浓缩上样浓度为6.46 g/L。当调节发酵液pH值为6.0时,莽草酸成完全解离状态,能被树脂完全吸附。以1.0 mol/L的NH4Cl溶液洗脱,莽草酸回收率为91.7%。以HZ-816大孔吸附树脂进行脱色,莽草酸回收率为98.8%。以732型强酸性阳离子交换树脂进行脱盐,回收率为98.3%。将得到的莽草酸溶液进行结晶,HPLC检测纯度,晶体纯度达到98.6%。该工艺能有效的从发酵液中分离纯化高纯度的莽草酸,为莽草酸生产工业化奠定了基础。; 王慧袁超陈凯窦洁方宏清周长林; 关键词：莽草酸发酵液离子交换纯化

一种酚酸类化合物及其制备方法与药物用途: 本发明属于制药技术领域。本发明公开了一种酚酸类化合物-迷迭香酸乙酯的制备方法与药物用途。迷迭香酸乙酯是以风轮菜(Clinopodium.chinense(Benth.)O.Kuntze)全草为原料，经粉碎、醇提取、减压回...; 吴斐华梁敬钰王立英何柏球王珊珊陈凯曾彪; 文献传递

酿酒酵母单倍体菌株分离筛选及其产腺苷甲硫氨酸的初步研究被引量：1: 2015年; 获得产腺苷甲硫氨酸的二倍体酿酒酵母CGMCC 2842遗传育种单倍体亲本。采用不同产孢培养基考察了酿酒酵母的产孢率,并对酿酒酵母CGMCC 2842进行了生孢培养分离子囊孢子得到单倍体菌株,确定单倍体配型,测定不同单倍体菌株腺苷甲硫氨酸含量。从分离的七株单倍体菌株(6株a型和1株α型)中筛选出一株产腺苷甲硫氨酸较高的a配型的单倍体菌株,经250 m L摇瓶发酵48 h后产腺苷甲硫氨酸1.10 g/L。筛选得到了一株产腺苷甲硫氨酸较高a型的单倍体菌株,为菌株的进一步遗传育种改良和腺苷甲硫氨酸微生物发酵法规模化生产奠定了基础。; 曹喜涛陈凯李扬窦洁王慧周长林奚涛; 关键词：酿酒酵母单倍体产孢腺苷甲硫氨酸

利用重组大肠杆菌合成莽草酸的研究进展被引量：3: 2012年; 莽草酸是芳香族氨基酸合成途径中的一种重要中间代谢产物。近年来,莽草酸作为临床上对抗禽流感的惟一有效药物达菲的合成前体而备受关注。通过改造大肠杆菌代谢通路使之能大量积累莽草酸是研究的热点之一。文章综述了莽草酸在重组大肠杆菌中生物合成的途径,并分析了莽草酸合成过程中的关键基因的改造及其对莽草酸积累的影响,最后还讨论了减少莽草酸产生菌培养过程中副产物产成的若干措施。; 陈凯滕再进周长林; 关键词：莽草酸重组大肠杆菌基因改造副产物

重组大肠杆菌合成莽草酸代谢调控的研究: 莽草酸(shikimic acid)是芳香族氨基酸合成途径中一种重要中间代谢产物。近年来,莽草酸作为临床上对抗禽流感的唯一有效药物达菲的合成前体而备受关注。大肠杆菌芳香族氨基酸生物合成途径分为中心代谢途径(Central...; 陈凯袁超陈海龙周长林; 文献传递

一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法，其目的是解决目前酿酒酵母表达载体多以营养缺陷为筛选标记，难以在工业酵母菌株进行基因工程改造过程中使用这一难题。其构建方法步骤如下：克...; 周长林曹喜涛陈凯窦洁王慧李扬奚涛; 文献传递

我国省级药品带量采购政策比较分析被引量：3: 2022年; 目的:为完善地方药品带量采购工作提供参考和建议。方法:检索收集2018年11月15日至2021年12月26日我国各省(自治区、直辖市)出台的药品带量采购相关政策,采用文献分析法和统计分析法进行比较研究。结果:截至2021年12月26日,共有15个省(自治区、直辖市)独立开展了23次省级药品带量采购,在采购品种、采购数量、评标规则等方面进行了积极探索。结论:各省(自治区、直辖市)应科学设置采购品种遴选标准;合理确定及分配约定采购量;积极完善评标规则相关细节;加快推进全流程信息化建设。; 马枋婷常峰路云陈凯薛天祺

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陈凯