刘迎春
- 作品数：39 被引量：126H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学更多>>
- 呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定被引量：1
- 2014年
- 将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。
- 石金磊陈永军刘迎春蒋蔚张花景李欣彤乔元彪王权
- 关键词：单克隆抗体
- 弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用
- 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,本实验利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截断型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,...
- 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权
- 关键词：单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护
- 乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪的排泄量研究被引量：6
- 2011年
- 本研究旨在建立鸡粪便中乙酰甲喹代谢物M1、M2的高效液相色谱检测方法,测定乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪的排泄量。对15只7周龄健康科宝-500白羽鸡内服乙酰甲喹30mg.kg-1体质量后,于不同时间间隔收集其所有粪便,称重,取其中2g用体积比1︰1的二氯甲烷/乙腈混合液提取,吹干,残渣用30%甲醇/水溶液复溶,HPLC法检测。结果表明,代谢物M1、M2检测限与定量限分别为0.01、0.05μg.mL-1,代谢物M1、M2添加浓度在0.05、1.0、50μg.mL-1时,平均回收率范围分别为69.5%～72.4%、73.5%～80.6%。粪便中代谢物M1、M2占给药乙酰甲喹总量的比例分别为3.20%、4.58%。代谢物M1排出高峰期在给药后4～8h,占代谢物M1累积排泄总量的38.09%;代谢物M2排出高峰期在12～24h,占代谢物M2累积排出总量的42.29%。结果提示,该检测方法满足测定乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪中排泄量的要求。
- 刘迎春丁焕中刘义明杨帆王立琦曾振灵
- 关键词：鸡粪乙酰甲喹代谢物排泄
- 呋喃它酮代谢物人工抗原及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证。然后采用混合酸酐法将CPAMOZ与载体蛋白偶联,采用紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证。用偶联成功的人工全抗原(CPAMOZ-BSA)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价为1∶8×104,对NPAMOZ的半数抑制量为26.55μg/L,间接竞争ELISA鉴定小鼠血清多克隆抗体,与NPAMOZ、CPAMOZ的交叉反应率分别为100%、44.8%,与AMOZ、对醛基苯甲酸、对硝基苯甲醛以及同类其他三种药物呋喃妥因、呋喃西林、呋喃唑酮等原药及其代谢物以及代谢物衍生物的交叉反应均小于0.01%。结果表明,制备的AMOZ多克隆抗体效价高、特异性强,灵敏度高,为进一步制备AMOZ单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。
- 刘迎春蒋蔚陈永军高艺林石金磊王权
- 关键词：人工抗原化学合成
- 三聚氰胺在鸡体内的药动学研究
- 40日龄岭南三黄肉鸡30只,随机分为2组,分别进行了静注和口服三聚氰胺(20 mg/kg)的药动学研究。用反相高效液相色谱法测定鸡血浆中三聚氰胺的浓度,WinNonlin计算机程序软件处理静注和口服的血浆药物浓度-时间数...
- 于冬玲刘迎春丁焕中
- 关键词：三聚氰胺高效液相色谱药物动力学鸡体血浆药物浓度
- 磺胺氯吡嗪钠中药复方对小鼠体内抗弓形虫疗效的观察被引量：7
- 2013年
- 为探索治疗动物弓形虫病的有效药物组方,本研究以磺胺嘧啶钠作为对照首先通过药物体外试验观察磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩抑制弓形虫增殖的效果,然后分别用磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩以及3种药物的复方制剂,对人工感染弓形虫RH株的KM小鼠进行体内治疗试验。体外试验表明磺胺氯吡嗪钠、磺胺嘧啶钠、黄芩和甘草对弓形虫速殖子均有一定的抑制效果,磺胺氯吡嗪钠抑制效果最好。小鼠体内试验表明单独使用磺胺嘧啶钠、甘草和黄芩均可不同程度地延长小鼠存活时间,但均不能避免小鼠死亡,而单独使用磺胺氯吡嗪钠可使小鼠的存活率达到40%,在同等剂量下,磺胺氯吡嗪钠与黄芩和甘草配伍后,疗效得到明显提高,可显著延长小鼠存活时间,并使小鼠存活率高达50%。本研究的结果提示磺胺氯吡嗪钠具有显著体内抗弓形虫的作用,与甘草和黄芩配伍后的中西药复方制剂,能在保持疗效的基础上显著减少磺胺氯吡嗪钠的用量,因此磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩复方制剂是未来治疗动物弓形虫病的优良方案之一。
- 蒋蔚陈永军张花景刘迎春荆振宇薛俊欣王权
- 关键词：弓形虫病磺胺氯吡嗪钠黄芩小鼠
- 弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用被引量：3
- 2013年
- 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截短型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,而且具有一定的小鼠体内保护作用。共筛选出4株(6H1、6G12、7B4和7A12)特异性好的单抗分泌株,经亚型测定,4株单抗重链均为IgG1,轻链均为κ链。抗体经纯化后测定效价为1∶8 000～1∶25 600;Western blot结果显示4株单抗能够同时识别重组表达及天然弓形虫SAG1抗原。筛选得到的2株抗SAG1单抗(6H1和7B4)可用于间接免疫荧光检测SAG1蛋白在虫体中的表达定位和分布。小鼠被动免疫保护试验表明,6H1和7B4两株单抗分别或联合使用可稍微延长被弓形虫感染的小鼠的存活时间。本试验研制的弓形虫SAG1单克隆抗体对将来研究弓形虫蛋白定位、弓形虫感染的诊断及防治具有一定的应用价值。
- 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权
- 关键词：弓形虫SAG1单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护
- 乙酰甲喹分子印迹聚合物的制备及其应用被引量：1
- 2008年
- 采用分子印迹技术,以α-甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,合成出以乙酰甲喹为模板的分子印迹聚合物,利用合成的聚合物为填料制备固相萃取小柱,同时用不同的淋洗液与洗脱液对小柱吸附性进行评价。结果表明,利用10%的乙腈为淋洗液,100%的乙腈为洗脱液,可以解决"样品泄露"问题,为后续工作提供一定的研究基础。
- 刘迎春贺利民曾振灵
- 关键词：乙酰甲喹分子印迹聚合物固相萃取
- 副溶血弧菌TDH蛋白高效表达、免疫原性分析及初步应用被引量：3
- 2015年
- 副溶血弧菌是引起细菌性食物中毒的主要食源性致病菌,耐热直接溶血毒素(theromostable direct hemolysin,TDH)是其公认的主要致病因子。本研究根据已发表基因序列(Gen Bank登录号:M10069)设计引物,以副溶血弧菌SHJLA株基因组DNA为模板,扩增编码TDH蛋白的基因,克隆至表达质粒p ET28a(+)中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为576 bp。重组原核表达质粒p ET28a-tdh转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导可表达分子量约为27 k Da的融合蛋白,主要以包涵体形式表达。对包涵体进行复性,Western blot分析表明经过复性后的重组蛋白能够被感染副溶血弧菌SHJLA株的小鼠血清识别。重组蛋白免疫家兔,ELISA检测多抗血清效价在1:256 000以上。将该多抗初步应用于斑点-ELISA(DotELISA)方法的建立,TDH阳性的致病性副溶血弧菌检测到阳性斑点,而TDH阴性的副溶血弧菌及其他细菌未检测到特异性斑点。本研究可为深入研究TDH的蛋白功能,建立致病性副溶血弧菌免疫学快速诊断方法以及保护性疫苗的研制提供研究基础。
- 李欣彤陈永军刘迎春白雪瑞王少辉韩先干刘永杰王权蒋蔚
- 关键词：副溶血弧菌蛋白表达
- 7种药物体内外抗弓形虫效果分析被引量：14
- 2011年
- 为了初步了解甘草酸、苦参碱、黄芩苷、硝唑尼特、巴龙霉素、磺胺嘧啶钠和磺胺氯吡嗪钠7种药物抗弓形虫的效果,进行体外、体内抗弓形虫试验。采用MTT法首先测定试验药物对培养巨噬细胞(Ana-1)的安全浓度,然后用弓形虫RH株的速殖子感染培养的上述细胞,加入药物继续培养48 h后观察药物体外抑制虫体在细胞内的增殖,以相对弓形虫抑制率为指标判断体外抗弓形虫效果。用弓形虫RH株速殖子按5×105/只腹腔接种昆明种小鼠,接种后4 h,药物治疗组通过饮水中给药,观察比较给药后感染弓形虫小鼠的精神状态,并记录各组小鼠死亡的时间和数目,每组随机抽选2只小鼠镜检腹腔虫体数量。体外试验结果表明,甘草酸、黄芩苷、磺胺嘧啶钠和磺胺氯吡嗪钠4种药物可显著抑制细胞内弓形虫增殖;体内试验表明,磺胺氯吡嗪钠治疗效果最佳,磺胺嘧啶钠次之,黄芩、苷草再次之,其余药物抗弓形虫作用不明显。
- 龚国华侯加法蒋蔚刘迎春陈永军荆振宇王权
- 关键词：药物抗弓形虫作用体外试验
