张海风
- 作品数：40 被引量：101H指数：6
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 正常人肝10种细胞色素P450及微粒体蛋白含量、活性研究
- 细胞色素P450(Cytochrome P450，CYP)是肝脏的主要药物代谢酶，参与临床70％～80%常用药物的代谢，主要包括CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP...
- 张海风
- 关键词：药物代谢酶
- 文献传递
- SNP对体外培养的海马神经元bcl-2和bax基因表达的影响被引量：9
- 2002年
- 目的 :探讨NO供体硝普钠 (SodiumNitroprusside,SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与Bcl- 2、Bax表达变化的关系。方法 :终浓度分别为 0、2 5、5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μmol/L的SNP处理海马神经元 2 4h ,或用终浓度为 5 0 μmol/L的SNP分别处理海马神经元 0、6、12、18、2 4h ,用RT -PCR检测Bcl- 2、baxmRNA表达变化 ,Westernblot检测Bcl- 2、Bax蛋白表达的变化。结果 :随着SNP剂量的增加 ,bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白表达逐渐减少 ,而baxmRNA、Bax蛋白表达逐渐增加 ;随着时间的处长 ,bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白表达逐渐减少 ,而baxmRNA、Bax蛋白表达去逐渐增加。结论 :SNP可时间、剂量依赖性地降低bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白的表达 ,时间、剂量依赖性地增加baxmRNA、Bax蛋白的表达。SNP诱导海马神经元凋亡的机制 ,可能是与降低Bcl- 2 /Bax的比值有关。
- 张海风刘勇军祝其锋张海涛
- 关键词：SNP老年性痴呆体外培养海马神经元BAX基因表达
- 人源细胞色素P450 2E1与细胞色素P450氧化还原酶的共表达被引量：2
- 2014年
- 目的利用大肠埃希菌(E.coli)表达系统异源表达细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1),并与细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)实现共表达,使其具有代谢活性,为药物代谢的研究提供单一性的酶源。方法以人肝组织RNA为模板,RT-PCR扩增CYP2E1基因,插入pCW空载体,构建重组表达质粒pCW-2E1,转化E.coli DH5α,IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定;利用双启动子原理构建CYP2E1与POR共表达的重组质粒pCW-2E1-POR,采用对氨基苯酚法检测CYP2E1重组酶的代谢活性,并对不同培养时间(18、28、38 h)的代谢活性进行比较。结果质粒pCW-2E1经PCR鉴定,证明构建正确;表达的重组人CYP2E1蛋白相对分子质量约56 000,主要以可溶性形式表达。质粒pCW-2E1-POR经PCR及酶切鉴定,证明构建正确;导入质粒pCW-2E1-POR的重组菌提取的蛋白样品具有明显的代谢活性,培养18、28、38 h后,代谢活性均值分别为(0.195±0.004)、(0.189±0.003)和(0.192±0.004)nmol/(min·mg),差异无统计学意义(P>0.05),但与导入质粒pCW-2E1的重组菌提取的蛋白样品的代谢活性相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了具有代谢活性的CYP2E1重组酶,且3个培养时间段之间的代谢活性无明显差异。
- 徐彬彬张海风刘秀赵勤王俊平单杰
- 关键词：细胞色素P450原核细胞基因表达
- 不同层面人肝CYP2C8代谢活性的个体差异及比较
- 目的:探讨人肝CYP2C8对其特异底物紫杉醇在微粒体水平、肝脏水平及总CYP水平代谢的个体差异,比较3种CYP2C8活性表示方法的差异,探索CYP体外活性最合理的表示方法。方法:采用差速离心法制备人肝微粒体(HLM),B...
- 张海风徐彬彬刘婷婷齐冰郜娜齐海灵
- caspase与阿尔茨海默病被引量：4
- 2001年
- 张海风祝其锋
- 关键词：阿尔茨海默病神经系统退行性疾病神经细胞凋亡
- 盐酸多西环素对重组质粒pBI-EGFP-hHO-1表达的调控
- 2011年
- 目的构建Tet-off调控的血色素氧化酶-1(HO-1)真核表达载体pBI-EGFP-hHO-1,并确定盐酸多西环素对其表达的调控剂量。方法利用分子生物学技术,将hHO-1基因与质粒pBI-EGFP连接构成重组质粒。NheI和MluI双酶切鉴定后采用RT-PCR技术及免疫细胞化学的方法检测其在人肝癌细胞SMMC-7721中的表达情况。利用RT-PCR技术检测Tet-off和pBI-EGFP-hHO-1双转染后不同浓度盐酸多西环素对hHO-1基因mRNA表达量的影响,确定该四环素调控系统的盐酸多西环素诱导量。结果用NheI和MluI双酶切证明hHO-1成功克隆入应答质粒pBI-EGFP;RT-PCR、免疫细胞化学检测结果表明重组质粒在SMMC-7721细胞中表达;经RT-PCR检测显示当盐酸多西环素浓度≥2 000 ng/ml时,HO-1基因mRNA表达降低,与未转染组接近。结论成功构建了由Tet-off调控的真核表达载体pBI-EGFP-hHO-1,并确定盐酸多西环素对其调控剂量为2 000 ng/ml。
- 杨婧张海风王媛赵勤张新胜单杰
- 关键词：盐酸多西环素
- 单个和多个位点CYP基因多态性对人肝代谢活性的影响
- 目的 细胞色素P450酶(CYP)单位点基因多态性(SSGP)，尤其是多位点基因多态性(MSGP)对其代谢活性的影响尚无定论.方法 收集正常肝脏105例，选用特异性底物测定人肝微粒体CYP1A2、CYP2A6、CYP2B...
- 郜娜田鑫方艳周军张海风乔海灵
- 关键词：细胞色素P450酶代谢基因多态性人肝微粒体
- 硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3 mRNA表达变化;Western印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化。结果SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度。随着SNP剂量的增加,NF-κB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/LSNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值。结论SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关。
- 张海风臧明玺单杰安玉会李道明
- 关键词：体外培养海马神经元NF-ΚBP65CASPASE-3
- 人肝10种CYP亚型含量、活性测定及其影响因素研究
- 目的 传统上,细胞色素P450酶(Cytochrome P450,CYP)亚型的体外活性是基于微粒体蛋白水平表示(pmol/min/mg微粒体).由于微粒体蛋白中CYP亚型的含量相差较大,该方法存在明显缺陷.CYP亚型的...
- 张海风王欢欢郜娜田鑫周军方艳高洁张养军钱小红乔海灵
- 关键词：药物代谢CYP酶含量酶动力学
- 阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元NF-κB、par-4基因表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用50μmol/L的SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest33258荧光染色检测凋亡,Westernblot及RT-PCR检测NF-κBP65、par-4基因表达。结果不同剂量SF(10～160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;降低NF-κBP65、par-4mRNA及蛋白的表达。结论SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与降低促凋亡基因NF-κBP65、par-4表达有关。
- 张海风李月百安玉会邢路伟王俊萍单杰
- 关键词：阿魏酸钠海马神经元凋亡NF-KBP65PAR-4
