何勇
- 作品数：16 被引量：11H指数：2
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- 口腔中幽门螺杆菌PCR检测方法
- 本发明公开了口腔中幽门螺杆菌PCR检测方法，本发明提供了口腔中Hp的PCR检测方法的构建方法；本发明以幽门螺杆菌铁蛋白基因为检测靶基因建立了口腔中Hp的PCR检测方法，该方法具有敏感性高、特异性强等优点；本发明通过建立口...
- 朱艳平岳锋何勇李鹏孙国鹏张艳芳邢瑞林徐文慧
- 文献传递
- 一种重组质粒、重组质粒制备方法、重组杆粒及其应用
- 一种重组质粒、重组质粒制备方法、重组杆粒及其应用，所述重组质粒基因组整合了IBDV VP2成熟蛋白的基因序列、GP67蜂毒信号肽基因、His标签蛋白基因序列和终止密码子，且保持了IBDV的开放阅读框编码基因和GP67蜂毒...
- 王选年朱艳平申一兰何勇岳锋刘佳李鹏孙国鹏张艳芳
- 文献传递
- 抗USP2a蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗USP2a单克隆抗体和应用
- 本发明公开了一种抗USP2a蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗USP2a单克隆抗体和应用。本发明公开的一株杂交瘤细胞株，命名为杂交瘤细胞株3D9，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C201618...
- 张万方李鹏潘鹏涛孙寅玮何勇任鹏举王孟慧黄向瑜樊松乐徐磊
- IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法
- IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法，ELISA试剂盒包括，1）包被IBDV抗原的酶标板；2）1:3000稀释的HRP标记的羊抗鸡Ig Y；其中，所述包被IBDV抗原的酶标板，通过IBDV抗原浓...
- 王选年朱艳平申一兰岳锋何勇刘佳李鹏孙国鹏张艳芳
- 文献传递
- PCV2 Cap蛋白刺激PBMCs中IL-21和IL-17A基因转录水平的变化
- 2021年
- 为了研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白能否模拟PCV2在体外刺激外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),使猪白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)和IL-17A基因转录水平发生变化,试验根据IL-21和IL-17A的基因序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR检测IL-21和IL-17A基因的转录水平。为进一步分析IL-21和IL-17A转录调节的机制,研究还通过实时荧光定量PCR检测了PD-L1的转录水平。结果表明:PCV2 Cap蛋白和PCV2在体外均能刺激PBMCs,导致IL-21、IL-17A和PD-L1基因的转录水平升高,其中PCV2 Cap蛋白导致的IL-21基因转录水平升高更多,几乎是PCV2刺激时表达量的2倍,IL-17A基因的转录水平基本和PCV2刺激时保持一致;PCV2 Cap蛋白能模拟PCV2刺激PD-L1基因转录水平发生变化,但是与PCV2感染时转录水平变化趋势并不完全一致,PCV2刺激时PD-L1的转录水平更高,预示着PD-L1基因与IL-21和IL-17A基因的转录可能存在一定的调节关系。
- 朱艳平刘佳刘佳何勇岳锋郭东光李文明郭东光
- 关键词：CAP蛋白IL-21转录水平
- 大肠杆菌偏嗜性可溶性猪PD-1重组蛋白的制备及应用
- 本发明涉及一种大肠杆菌偏嗜性可溶性猪PD‑1重组蛋白的制备及应用，其中可溶性猪PD‑1重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，利用基因克隆技术得到经过密码子偏嗜性修饰的猪PD‑1基因的可溶性重组蛋白，该可溶性猪...
- 王选年朱艳平刘佳何勇岳锋孙国鹏郭东光李鹏李文明刘金宵
- 文献传递
- 一种氨苄青霉素残留的检测方法及应用
- 本发明公开了一种氨苄青霉素残留的检测方法，其利用氨苄青霉素与核酸适配体的特异性结合能使其脱离纳米金粒子表面的特性，并利用杂交链式解链(HCR)将信号放大，通过纳米金溶液吸收光谱的变化建立了一种氨苄青霉素残留的高灵敏检测方...
- 张万方何勇马瑞张同雨王蕊康瑞丽朱子任郭晋汝张晨雨
- 文献传递
- IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法
- IBDV抗体的ELISA试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法，ELISA试剂盒包括，1）包被IBDV抗原的酶标板；2）1:3000稀释的HRP标记的羊抗鸡Ig Y；其中，所述包被IBDV抗原的酶标板，通过IBDV抗原浓...
- 王选年朱艳平申一兰岳锋何勇刘佳李鹏孙国鹏张艳芳
- 猪圆环病毒2型对外周血单核细胞中PD-1,PD-L1和IL-21转录水平的影响
- 2021年
- 用猪圆环病毒2型(PCV2)体外感染外周血单核细胞,建立荧光定量PCR方法检测PCV2的病毒载量;同时,在PCV2感染后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72h收集细胞,抽提RNA进行反转录,检测PD-1、PD-L1和IL-21的转录水平变化,分析评价PCV2感染对PD-1、PD-L1和IL-21的转录水平变化的影响。结果显示,PD-1在感染外周血单核细胞后72 h显著升高,达到峰值;PD-L1在感染后转录水平都显著升高,48 h达到峰值;IL-21在感染后48 h转录水平最低。结果表明,PCV2不仅能够在体外感染外周血单核细胞,而且随着病毒载量的增加,导致PD-1、PD-L1和IL-21的转录水平显著升高。以上结果表明,PCV2感染导致PD-1、PD-L1和IL-21的转录水平升高,通过激活PD-1/PD-L1通路,从而抑制IL-21的转录水平;相反,IL-21刺激PD-1、PD-L1的转录水平升高。研究结果为探索PCV2的致病机制和控制PCV2的感染提供了理论基础。
- 朱艳平何勇刘佳朗梦圆岳锋岳锋郭东光李鹏马广飞王选年
- 关键词：猪圆环病毒2型PD-1PD-L1白细胞介素21转录水平
- 泛素蛋白融合系统高效表达幽门螺杆菌可溶性铁蛋白及多抗制备
- 2024年
- 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)铁蛋白是储存铁和维持细胞铁平衡的一种蛋白质,在不同生物中均有发现,但铁蛋白氨基酸序列同源性低,这为利用铁蛋白建立Hp分子生物学和免疫学检测方法提供了理论依据。为获得泛素蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)融合系统高效表达的可溶性Hp铁蛋白,根据GenBank中Hp铁蛋白基因序列,设计合成引物,PCR扩增Hp铁蛋白基因片段,构建重组克隆菌株,菌液PCR、双酶切和序列测定筛选阳性克隆。双酶切后回收目的基因,构建pET-28a-SUMO-Ferritin重组表达质粒,转化至DH5α。通过菌液PCR、双酶切和序列测定,获得阳性重组表达菌株pET-28a-SUMO-Ferritin/BL21,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重组蛋白。然后,利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得高纯度目的蛋白。最后,利用获得的高纯度重组蛋白免疫小鼠制备多抗。结果显示实验扩增出了501 bp的Hp铁蛋白基因。IPTG诱导重组原核表达菌株,SDS-PAGE检测显示在34 kDa处有一条与理论值相符的条带;Western blotting鉴定SUMO融合重组蛋白,结果显示它能与His抗体特异性结合。37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导过夜,SUMO融合重组蛋白呈可溶性表达。将去除SUMO标签后的重组蛋白纯化,透析,获得高纯度重组蛋白,免疫小鼠后抗体水平为1∶25600。研究结果表明,利用SUMO融合系统可高效表达可溶性Hp铁蛋白,免疫小鼠制备多抗,为进一步获得Hp铁蛋白的单抗,建立Hp免疫学检测方法奠定基础。
- 朱艳平何勇张心杰姚倩文代佳怡岳锋吴玉苹王选年
- 关键词：幽门螺杆菌铁蛋白泛素蛋白多抗抗体效价
