梁辰
- 作品数：21 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划科技基础性工作专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法的性能验证被引量：5
- 2019年
- 目的建立抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法并评价其性能。方法以链酶亲和素通用型磁珠为固相,通过生物素-链酶亲和素系统捕获免疫复合物,采用间接法原理建立抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法。对该方法的线性范围、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,确定该方法的正常参考值,并进行系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)临床样本检测。结果该方法抗体浓度为50~3000IU/ml时线性良好,最低检测限为1.878~2.535IU/ml(<10IU/ml),3次实验回收率均为95%~100%,准确性好;试剂检测精密度高,批内变异<5%且总变异<10%;干扰实验结果表明样本中含有1200mg/dl、150mg/dl、30mg/dl、30ng/ml、150IU/ml的三酰甘油、血红蛋白、胆红素、生物素、类风湿因子时不影响检测结果。通过检测185例正常人血清,确定正常参考值为100IU/ml,特异性达99%;检测54例SLE患者样本,其阳性率为42.6%,与ELISA参比试剂阳性率(46.3%)相似。结论此吖啶酯化学发光方法检测抗-dsDNA抗体的灵敏度高、精密性好,性能稳定,线性范围可达3000IU/ml,其检测SLE疾病的敏感性与ELISA相当,特异性为99%。检测过程仪器自动化操作,简便、快速、无污染,适用于临床。
- 廉倩倩陈秀发沙利烽梁辰冯杰薛辉颜光涛
- 关键词：抗DSDNA抗体系统性红斑狼疮化学发光
- 高灵敏电化学发光法检测人血清抗甲状腺过氧化物酶抗体被引量：2
- 2021年
- 目的通过竞争电化学发光免疫分析的原理,建成一种检测抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,Anti-TPO)的电化学发光分析方法。方法钌(Ru)标记的Anti-TPO竞争的去结合生物素化的甲状腺过氧化物酶(thyroid peroxidase antibody,TPO),进而和链霉亲和素(streptavidin,SA)包被的磁珠结合,将未结合的钌标记的复合物洗去,含钌并结合SA的复合物吸附到电极上,通过施加电压发光,随后测定RLU(relative light units)。结果本研究建立的Anti-TPO的分析灵敏度(lower limit of detection,LLD,95%置信区间)为5 IU/mL,线性范围为10~600 IU/mL,正确度为0.900~1.100,批间CV<10.0%,批内CV<5.0%。与Roche公司生产的Anti-TPO线性相关系数r=0.9868(n=198),热处理后,试剂性能指标符合要求。结论该方法各项性能指标均能达到临床检测要求,可以推广应用。
- 冯杰梁辰邓子辉薛辉席杰张勇亮高艳红颜光涛
- 关键词：抗甲状腺过氧化物酶抗体三联吡啶钌电化学发光法
- 5-羟基吲哚乙酸均相酶免疫法的建立
- 2020年
- 目的采用均相酶免疫法检测5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的浓度。方法样本中游离的5-HIAA与葡萄糖六磷酸脱氢酶-5-羟基吲哚乙酸偶联物竞争性结合抗体位点,游离出来的5-羟基吲哚乙酸酶标偶联物催化NAD+转化为NADH,样本中的5-HIAA浓度与NADH的生成量成正比,通过340 nm吸光值的变化即可计算出5-HIAA的含量。结果据本研究建立的方法,健康人5-HIAA参考范围为0~8.0 mg/L,线性范围为2.0~98.0 mg/L,准确度相对偏倚<5%,批内变异<5%,批间变异<5%,携带污染率和试剂上机21d稳定性等符合判断标准。结论该5-HIAA均相酶免疫法检测的试剂盒性能满足临床检测要求,可以推广使用。
- 魏雪梅冯杰梁辰邓子辉薛辉陆丽华何秀丽虞留明高艳红颜光涛
- 关键词：5-HIAA类癌综合征
- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用被引量：2
- 2020年
- 目的建立一种双抗体夹心法定量检测人尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)的化学发光免疫分析方法。方法以磁颗粒-链酶亲和素-生物素为固相分离系统,生物素标记1株鼠单抗-NGAL,吖啶酯标记另1株鼠单抗-NGAL,建立NGAL定量免疫分析方法。结果此分析方法功能灵敏度高于3ng/mL;批内不精密度不超过5%,批间不精密度不超过8%;线性范围为10~1500ng/mL;参考区间上限为130ng/mL;尿液样本中可能存在的干扰物如丙酮、白蛋白、胆红素等对结果的干扰不超过5%;尿液样本2~8℃常规储存1~3周检测水平变化幅度小于20%;与Abbott的NGAL免疫试剂相比,斜率达0.9611,相关系数0.9938。结论该NGAL化学发光定量检测方法,性能优良,适合临床推广使用。
- 周齐洋廉倩倩梁辰冯杰颜光涛
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白急性肾损伤肌酐
- 一种高灵敏度的脂蛋白相关磷脂酶A2活性检测方法被引量：5
- 2020年
- 目的酶法测定脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)活性。方法脂蛋白相关磷脂酶A2水解底物1-豆寇酰基-2-(4-对硝基苯酚丁二酸酐)磷脂酰胆碱Sn-2位置,生成一种有颜色的产物4-对硝基苯酚,该产物在405 nm处有吸收峰,根据其吸光度的变化速率计算Lp-PLA2的活性。结果据本研究建立的方法,健康人参考范围0~670 U/L,线性范围为42.0~1658.0U/L,准确度相对偏差≤10%,批内变异<5%,批间变异<10%,携带污染率和试剂上机21d稳定性等符合判断标准。与德国Desai公司Lp-PLA2试剂检测结果进行线性回归分析,决定系数R2=0.991(n=20),一致性较好。结论该Lp-PLA2酶法活性测定的试剂盒性能满足临床检测要求,可以推广使用。
- 冯杰梁辰薛辉陆丽华何秀丽虞留明高艳红颜光涛
- 关键词：脂蛋白相关磷脂酶A2连续监测法
- 人血清IL-6电化学发光检测方法的建立被引量：4
- 2019年
- 目的通过双抗体夹心一步法的原理,建立一种检测人血清白细胞介素6(IL-6)的电化学发光免疫分析方法。方法将标本、生物素化的IL-6单克隆抗体和三联吡啶钌标记的IL-6单克隆抗体反应以形成抗原抗体夹心复合物,然后与链霉亲和素包被的磁微粒结合,形成的复合物通过磁场清洗,从而将未结合的物质除去。然后加入三丙胺激发缓冲液,从而检测相对光子强度(relative light units,RLU)。结果本研究建立的方法,最低检测限为1.5pg/mL,线性范围为1.5~5000 pg/mL,准确度为0.900~1.100,批内变异小于8%,批间变异小于10%。与罗氏公司IL-6检测试剂盒相关系数为r=0.9996(n=75),经过37℃7 d热处理后的试剂,各项性能指标均达标,检测结果差异不大(线性相关系数r=0.9972,准确度高值0.951,准确度低值0.947,批内精密度(CV)高值2.81%,低值1.63%)。结论该方法灵敏度高、线性范围广、准确度高、稳定性好,各种指标都能达到临床检测要求,可以推广使用。
- 席杰梁辰薛辉冯杰潘雯陈建红曾映周明颜光涛
- 关键词：IL-6生物素三联吡啶钌电化学发光法
- 高灵敏电化学发光法特异性测定人血清抗甲状腺球蛋白抗体被引量：1
- 2021年
- 目的通过竞争法一步法原理,建立一种检测人血清抗甲状腺球蛋白抗体(anti-TgAb)的电化学发光免疫分析(ELICA)方法。方法将样本、三联吡啶钌标记抗体和生物素标记甲状腺结合球蛋白(thyroglobulin,Tg)抗原三者共同孵育形成抗体-抗原复合体,再加入链霉亲和素包被的磁微粒与该复合物共同孵育形成钌标记抗体-生物素抗原-链霉亲和素磁颗粒复合物,通过磁场固定洗涤去除游离物质;然后加入三丙胺得到相对光子强度(relative light units,RLU)。检测该方法的灵敏度、线性范围、精密度、准确度及稳定性,并与罗氏公司的anti-TgAb检测试剂盒进行对比。结果anti-TgAb的最低检测限为5 IU/mL,线性范围为10~1000 IU/mL,准确度为0.900~1.100,批内变异和批间变异均小于5%。与罗氏公司anti-TgAb检测试剂盒的相关系数r=0.996(n=50),稳定性测试(37℃,8d)中,各项性能指标变异程度均符合标准[线性相关系数r=0.9998,准确度低值0.94,准确度高值0.93,批内精密度(CV)高值3.77%,低值4.34%]。结论该方法各项性能指标(灵敏度、精密度、准确度、稳定性等)均能达到临床检测要求,可供临床检测使用。
- 张靖梁辰邓子辉冯杰薛辉程妮杨宁高艳红颜光涛
- 关键词：抗甲状腺球蛋白抗体三联吡啶钌电化学发光法
- 瘦素降低全反式维甲酸诱导的SH-SY5Y细胞tau蛋白过度磷酸化被引量：3
- 2013年
- 目的探讨瘦素(leptin)与阿尔茨海默病发生发展过程的联系。方法全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导人神经纤维母细胞瘤细胞系SH-SY5Y产生过度磷酸化tau蛋白,模型成功后给予外源性leptin处理,检测磷酸化tau蛋白表达水平。结果模型诱导成功后,PCR检测leptin长型受体ObRb表达上升(P<0.01);给予leptin后,Western Blot显示磷酸化tau蛋白表达显著降低(P<0.01),细胞形态也随之改变。结论 leptin能够在体外降低阿尔茨海默病相关的过度磷酸化tau蛋白。
- 梁辰邓子辉张金英郝秀华薛辉颜光涛
- 关键词：瘦素瘦素受体TAU蛋白
- N末端脑利钠肽前体电化学发光检测方法的建立
- 2019年
- 目的建立一种定量检测人血清中N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)的基于三联吡啶钌的电化学发光免疫分析方法。方法以双抗体夹心法为原理,以生物素和三联吡啶钌标记NT-proBNP的单克隆抗体,以链霉亲和素包被磁微粒,建立一种以磁颗粒-链霉亲和素-生物素系统实现固相和液相分离的电化学发光免疫分析方法(eCLIA)。结果本研究建立的分析方法,其最低检测限可达2.39 pg/mL,线性范围为5~35000 pg/mL,批内变异小于8%,批间变异小于8%,与罗氏公司NT-proBNP检测试剂盒相关系数r=0.9957,可报告范围为5~137844 pg/mL。试剂盒整体置于37℃7 d,各性能指标不变,试剂稳定性良好。试剂抗干扰性能良好。结论该方法具有灵敏度高、线性范围广、稳定性好、受环境影响小、检测结果准确等特点,各项指标均达到临床检测要求,适合临床推广使用。
- 魏雪梅梁辰薛辉冯杰邓文斌周桂生曾映周明颜光涛
- 关键词：N末端脑利钠肽前体三联吡啶钌电化学发光法
- 人IGF-Ⅱ RIA的建立及初步应用
- 2012年
- 目的:建立高特异性和高灵敏度的人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)放射免疫分析方法,用于测定人血清以及培养液中IGF-Ⅱ水平。方法:用人工合成的IGF-Ⅱ多肽连接甲状腺球蛋白,多次免疫兔子获取高效价、高特异的人IGF-Ⅱ抗体。用氯氨T法制备125I标记的IGF-Ⅱ,经交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-25)纯化。抗原抗体反应采用平衡一步法,4℃温浴24h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原。用该法测定正常献血员150例和肝癌患者180例,并比较了肝癌患者介入治疗前后IGF-Ⅱ水平的变化。结果:该法测定范围为(0.1～24.3)ng/ml,最低检出值<0.1ng/ml,批内和批间误差<6.3%和10.0%。正常献血员血清IGF-Ⅱ水平(1.266±0.298)ng/ml明显低于肝癌各组患者(P<0.05);肝癌患者进行介入治疗3d后IGF-Ⅱ水平(4.263±1.411)ng/ml明显低于治疗前(4.916±1.24)ng/ml(P<0.05);介入治疗后3d与治疗后1个月(4.796±1.647)ng/ml水平相比无明显差异。结论:该法稳定、简便、特异、灵敏,适于检出人血清中的IGF-Ⅱ水平。
- 薛辉郝秀华梁辰邓子辉颜光涛
- 关键词：人胰岛素样生长因子放射免疫分析肝癌
