吴晓丹
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省医学领军人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 巨噬细胞介导的间质干细胞可通过活化STAT3,ERK和NF-κB促进胃癌进程
- 杨婷婷王梅黄锋蔡洁张洁吴晓丹史惠许文荣
- 关键词：间质干细胞巨噬细胞EMT胃癌
- 人脐带间质干细胞来源exosomes分离鉴定及其对细胞生长的影响
- 沈俐纪润璧周颖吴晓丹高硕史云燕钱晖来伟许文荣
- 人脐带间充质干细胞来源外体提取方法的比较被引量：1
- 2014年
- 目的比较蔗糖密度梯度离心法和差速离心法提取的脐带间充质干细胞来源外体（hucMSC-Ex）在高丰度蛋白质含量和纯度上的差异。方法分别用蔗糖密度梯度离心法和差速离心法提取hucMSC-Ex,透射电镜下观察两法提取的外体的形态结构,SDS-PAGE分析二者的蛋白质组分,western blot检测二者的表面标志蛋白CD9和CD81,免疫荧光法检测二者内化至靶细胞EA.hy926的数量。结果两种方法提取的hucMSC-Ex均为直径约30~100 nm的圆形或椭圆形膜性囊泡结构;在相同蛋白质总量下,差速离心法提取的hucMSC-Ex高丰度蛋白质含量明显低于蔗糖密度梯度离心法,但其表面标志蛋白CD9和CD81的表达量却明显高于蔗糖密度梯度离心法;在相同蛋白质浓度下,差速离心法提取的hucMSC-Ex被靶细胞EA.hy926细胞内化的数量更多。结论两种方法均能成功提取hucMSC-Ex,差速离心法提取的hucMSC-Ex纯度更高,而高丰度蛋白质含量明显降低。
- 吴晓丹张斌朱艳华孙瑶湘史惠朱伟钱晖许文荣
- 关键词：脐带间充质干细胞
- hHGF腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达
- 2010年
- 目的:构建人重组肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)基因腺病毒载体(Ad-HGF),转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs),为转基因治疗提供实验基础。方法:设计含有SalⅠ及XbaⅠ酶切位点的引物,PCR扩增hHGF,将扩增产物克隆到带有绿色荧光蛋白(green fluorescenceprotein,GFP)标记的pAdTrack-CMV穿梭质粒上。重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组,筛选获得含有hHGF的重组腺病毒质粒,PCR、酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化,脂质体转染293A细胞,经3轮扩增,制备高效表达的AdGFP/HGF,并转染hucMSCs。结果:重组腺病毒质粒经PCR和SalⅠ,XbaⅠ酶切鉴定,证实含有HGF基因,测序结果和设计片段的序列一致。荧光显微镜下发现293A细胞发光率几乎为100%,感染的hucMSCs亦可表达绿色荧光蛋白。结论:成功构建了hHGF腺病毒表达载体,并获得高滴度的病毒,能高效感染hucMSCs,为后续研究奠定了基础。
- 陈圆李汉华赵亚娟吴晓丹王梅许晓蒙谢颖许文荣
- 关键词：肝细胞生长因子人脐带间质干细胞腺病毒载体
