王晓杰
- 作品数：16 被引量：36H指数：4
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- 条斑紫菜TPS基因TPP结构域的缺失突变
- 2017年
- 条斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因(PyTPS)具有TPS及TPP双结构域,以该基因的原核表达载体pET22b-PyTPS为材料,利用双酶切片段替换法对该基因TPP结构域磷酸酶基序的编码框Box1与Box2进行了缺失突变。第一,用715bp缺失Box1的KpnI-EcoRI人工合成片段替换pET22b-PyTPS中相应的片段,获得了缺失Box1的突变基因PyTPS-Box1。第二,用661bp缺失Box2的EcoRI-HindII片段进行替换,获得了缺失Box2的突变基因PyTPS-Box2。第三,在缺失Box1后,再通过替换缺失Box2,获得了同时缺失Box1与Box2的突变基因PyTPS-Box1-Box2。本研究既获得了三种突变基因,又获得了其原核表达载体,为研究PyTPS基因的编码活性提供了材料,奠定了基础。
- 王晓杰栾淑莉李怡君牛倩雅郭宝太
- 关键词：条斑紫菜缺失突变
- PVS-CP基因转化马铃薯的研究
- 本研究以鲁引1号、夏波蒂、早大白、大西洋4个品种的微型薯为材料，建立了离体再生体系和转基因技术体系，并用PVS-CP基因转化马铃薯4个品种，获得了转基因植株。
用脱毒微型薯获得的试管苗在2MS液体培养基上经20...
- 王晓杰
- 关键词：马铃薯农杆菌转基因植株基因转化
- 文献传递
- 一种花生高油体的离体定向筛选方法
- 本发明涉及一种花生高油体的离体定向筛选方法，可以解决花生缺乏高油种质资源、常规育种难以培育高产高油花生品种的问题。本发明采用离体定向筛选高油体，筛选过程于培养基中进行，大量不具有抗性的培养材料被淘汰，可节省大量的资源和成...
- 禹山林王晶珊隋炯明乔利仙杨庆利姜德锋赵明霞衣艳君张芳汤松王晓杰
- 文献传递
- 一种用于花生高油体的离体定向筛选的培养基及筛选方法
- 本发明公开了一种用于花生高油体的离体定向筛选的培养基及筛选方法，属于花生育种技术领域。本发明用于花生高油体的离体定向筛选的培养基包括体胚萌发及筛选培养基、成苗及筛选培养基和恢复培养基；所述体胚萌发及筛选培养基以MS培养基...
- 禹山林王晶珊隋炯明乔利仙杨庆利姜德锋赵明霞衣艳君张芳汤松王晓杰
- 文献传递
- 平阳霉素对花生体细胞胚胎发生的影响被引量：11
- 2011年
- 本文对花生离体培养高频率体细胞胚(体胚)诱导方法,及平阳霉素(PYM)对体胚发生的抑制作用进行了研究,旨在为以PYM作为化学诱变剂进行花生离体诱变提供有效方法。以花生品种花育20号和花育22号成熟种子的胚小叶为外植体,在添加不同浓度2,4-D(0,5,10,15,20mg/L)的MSB5(MS无机盐+B5有机成分)培养基上诱导体胚培养。结果表明:当24,-D浓度为10mg/L时,体胚诱导率高,极显著高于其他处理(除花育20号添加10mg/L与5mg/L无极显著差异),花育20号和花育22号体胚诱导率分别高达80.1%和92.9%。将形成体胚的外植体转接到添加4mg/L BAP的体胚萌发培养基上,成苗率达85%以上。以此培养方法为基础,在诱导培养基中添加不同浓度的PYM(0,1,2,3,4,5mg/L),进行体胚的诱导。结果显示:PYM对体胚发生有显著的抑制作用,随着平阳霉素浓度的增大,体胚诱导率显著下降,外植体褐化率急剧上升。2个供试品种的PYM抑制浓度不同,综合褐化率和体胚形成率,确定花育20号和花育22号适宜的PYM离体诱变浓度分别为3～4mg/L和4～5mg/L,诱变培养时间为30d。
- 赵明霞隋炯明王晓杰乔利仙郭宝太王晶珊
- 关键词：平阳霉素诱变体细胞胚2,4-D
- 花生组培苗嫁接技术的研究被引量：14
- 2010年
- 为解决花生组培再生苗及转基因苗驯化移栽成活率低的难题,本试验以花生实生苗作为砧木,对花生嫁接技术进行了研究。试验结果表明:超净台内无菌嫁接效果较好,以再生苗或实生苗为接穗进行无菌嫁接,其成活率均达90%以上,明显高于室内嫁接成活率(71%～72%);无菌嫁接时12～15d苗龄的砧木效果最好;将无菌嫁接苗在培养基中培养3～5d后进行驯化移栽为最佳时期;不同花生基因型嫁接苗成活率在87%～95%;嫁接苗移栽田间后,其成活率高达94%,且100%结果。
- 郝世俊隋炯明乔利仙王晓杰王晶珊
- 关键词：花生实生苗再生苗嫁接
- 马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因酿酒酵母表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 以重组质粒pBAD-LRCP-126为模板,经PCR扩增获得了PLRV缺失突变CP基因的特异性条带。目的片段与pYES2.1/V5-His/-TOPO的连接产物转化大肠杆菌TOP10F′获得了氨苄青霉素抗性菌落,酶切与DNA测序结果确认了酵母表达载体的正确性,该表达载体命名为pYES-LRCP-126。在30℃,酿酒酵母工程菌株INVSc1(pYES-LRCP-126)经2%半乳糖诱导培养16h,SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条23kDa的诱导表达的蛋白条带,其大小与预期的重组CP大小相符,表明PLRV缺失突变基因在酵母菌中实现了表达。
- 左玉玲王晓杰樊连梅王晶珊郭宝太
- 关键词：马铃薯卷叶病毒CP基因缺失突变酿酒酵母
- 马铃薯卷叶病毒CP基因的RT-PCR扩增被引量：8
- 2007年
- 根据马铃薯卷叶病毒CP基因的序列设计合成了两对特异性DNA引物,用RNA提取试剂RNAplant从感病的马铃薯叶片中提取总RNA,在3′引物引导下以总RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后进行PCR,分别扩增出了长627 bp和336 bp的特异性PCR产物,其大小与预期的CP基因及其部分序列一致,实现了马铃薯卷叶病毒CP基因及其片段的简便、有效的RT-PCR扩增。
- 何心凤郭宝太李广存杨煜王晓杰毕玉平
- 关键词：马铃薯卷叶病毒CP基因RT-PCR
- 影响复合针介导的大豆子叶节遗传转化的主要因素的研究
- 2009年
- 以萌动1d的半片大豆种子为试验材料,用复合针针刺2次,农杆菌LBA4404/pCAMBIA1201侵染,共培养3d,GUS染色检测瞬时表达效率。结果表明:不同基因型和乙酰丁香酮(As)浓度对转化效率有显著影响,As浓度为100或200μmol/L时,转化效率显著提高,其中以合丰25的转化效率最高,平均为8.6个蓝色斑点;农杆菌的侵染时间以30 min为宜;农杆菌的侵染浓度以OD600为0.6时最佳,平均为9.8个蓝色斑点。
- 曹银生谢宏峰王晓杰薛仁镐
- 关键词：复合针大豆子叶节农杆菌
- 资产全生命周期管理视角下的高校政府采购管理研究
- 2023年
- 从高校资产管理的角度出发,基于资产全生命周期管理的视角,通过梳理高校政府采购中存在的问题,探讨将政府采购纳入资产全生命周期管理体系,通过加强对预算、采购、验收、使用的管理,在新时期、新矛盾、新理念和新定位下,充分发挥政府采购政策功能,提升高校政府采购管理水平。
- 王晓杰
- 关键词：高校政府采购资产全生命周期管理
