恽冬泽
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
- 供职机构：齐齐哈尔大学生命科学与农林学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- MDR1基因shRNA真核表达质粒的构建
- 2014年
- 为了构建靶向MDR1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达重组质粒,试验针对MDR1基因序列选取3个干涉靶点,设计合成3条编码shRNA的DNA模板,分别定向克隆到真核表达质粒pSilencer 3.1-H1中构建重组质粒,再进行菌落PCR扩增和测序鉴定。结果表明:菌落PCR扩增得到与预期大小相同的阳性带,经DNA测序证实插入片段完全符合设计要求,序列无突变。说明成功构建了3个靶向MDR1基因的真核表达重组质粒pSilencer 3.1-H1 shRNA。
- 李旭艳邵淑丽恽冬泽
- 关键词：MDR1基因真核表达重组质粒
- 紫杉醇诱导沉默MDR1基因的HT9细胞凋亡
- 2020年
- 为探讨MDR1基因沉默对紫杉醇诱导HT9急性早幼粒白血病耐药细胞凋亡的影响。本研究将已构建的干涉MDR1基因表达载体转染HT9细胞,通过流式细胞术、MTT法分析HT9细胞对药物的外排能力和对紫杉醇的敏感性,电镜、荧光显微镜、流式细胞术检测紫杉醇诱导细胞凋亡的形态学、细胞周期进程变化。结果显示,干涉MDR1基因后,HT9细胞内Rh123荧光强度增加,细胞外排能力减弱,细胞对紫杉醇的敏感性增强,促进紫杉醇诱导耐药细胞呈现细胞凋亡表型,促使细胞周期阻滞在S和G2/M期。说明MDR1基因沉默能增强紫杉醇诱导HT9细胞凋亡,为逆转白血病耐药、提高白血病化疗效果提供参考依据。
- 李旭艳李旭艳邵淑丽张伟伟张珍珠恽冬泽
- 关键词：紫杉醇细胞凋亡RNAI
- 沉默MDR1基因增强SGC7901/ADM细胞对姜黄素的敏感性被引量：2
- 2017年
- 本研究利用短发夹RNA(sh RNA)沉默SGC7901/ADM细胞MDR1基因表达,增强人胃癌SGC7901/ADM细胞对姜黄素的敏感性。根据MDR1基因序列设计3对编码sh RNA的DNA模板,克隆到p Silencer 3.1-H1 neo(p3.1)上构建3种sh RNA表达载体,转染SGC7901/ADM细胞,q RT-PCR和Western blotting检测MDR1基因沉默效果,用荧光显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活力。结果显示,3种sh RNA表达载体转染细胞后均能不同程度沉默MDR1基因的表达,增强了细胞对姜黄素的敏感性。
- 孙新迪邵淑丽恽冬泽李旭艳张伟伟付博李妍
- 关键词：SHRNA姜黄素
- 沉默MDR1基因可增强三尖杉酯碱诱导的SGC7901/ADM细胞凋亡
- 2018年
- 为探讨沉默MDR1基因对三尖杉酯碱诱导SGC7901/ADM细胞凋亡的影响,将本实验室构建的靶向MDR1基因的RNAi干扰载体pSilencer 2.1-3,转染胃癌SGC7901/ADM细胞,经三尖杉酯碱处理后,通过MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡现象。研究发现,pSilencer 2.1-3稳定转染SGC7901/ADM细胞后,三尖杉酯碱对细胞的IC_950）值由（2.527±0.316）μg/m L降至（0.719±0.087）μg/mL,相对逆转率达到（72.435±2.921）%,从而提高了SGC7901/ADM细胞对三尖杉酯碱的敏感性。激光共聚焦显微镜下,细胞形态发生改变,染色质凝聚、边缘化,琼脂糖凝胶电泳DNA呈梯状条带,呈现明显的凋亡特征,结果表明,沉默MDR1基因增强了三尖杉酯碱诱导的SGC7901/ADM细胞凋亡。
- 张闯邵淑丽李旭艳张珍珠张伟伟恽冬泽
- 关键词：三尖杉酯碱
- 单菌落PCR在发夹RNA重组克隆鉴定中的应用被引量：1
- 2014年
- 以单菌落为模板进行PCR扩增,直接筛选插有发夹RNA(Small hairpin RNA,shRNA)干扰片段的重组阳性克隆。以圆滑单菌落为PCR模板,采用载体通用引物直接扩增目的片段,质粒测序验证PCR结果的正确性。结果表明,在筛选的6个菌落中均扩增出324 bp的目的条带,进一步进行测序分析鉴定,证实了菌落PCR阳性克隆含有发夹RNA干扰片段。单菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效筛选重组阳性克隆的方法。
- 李旭艳恽冬泽邵淑丽
- 关键词：重组克隆
- 姜黄素诱导沉默MDR1基因的SGC7901/ADM细胞凋亡被引量：1
- 2018年
- 为探讨MDR1基因沉默对姜黄素诱导人胃癌SGC7901/ADM细胞凋亡的影响,将已构建的靶向MDR1基因的RNAi表达载体转染SGC7901/ADM细胞,建立转染细胞单克隆,流式细胞术检测细胞外排功能。姜黄素处理SGC7901/ADM细胞48 h后,通过激光共聚焦显微镜下观察细胞形态结构,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化。结果显示,各干扰载体转染组细胞内Rho-123荧光强度不同程度增强,细胞经姜黄素处理48 h后,激光共聚焦显微镜下呈明显的凋亡形态结构,DNA琼脂糖凝胶电泳呈梯状条带,说明MDR1基因沉默能促进姜黄素诱导SGC7901/ADM细胞凋亡。
- 孙新迪邵淑丽李旭艳张伟伟张珍珠恽冬泽朱少伟
- 关键词：姜黄素
- 肿瘤靶向治疗研究进展被引量：1
- 2007年
- 肿瘤是目前世界上死亡率最高的疾病之一,手术、放化疗是目前治疗肿瘤的常用手段.但是肿瘤是一个多因素导致的疾病,必须从多方面考虑其治疗机制.靶向治疗是现阶段肿瘤治疗的新技术,可针对多种机制来抑制肿瘤的发生和发展或消除肿瘤.对此,相关研究者们已在肿瘤靶向治疗方面开展了大量的工作,为肿瘤的防治提供了参考依据。
- 恽冬泽邵淑丽
- 关键词：肿瘤抗体治疗基因治疗病毒治疗
- MDR1基因沉默增强紫杉醇诱导SGC7901/ADM细胞凋亡的敏感性
- 2017年
- 为了探讨MDR1基因沉默对紫杉醇诱导人胃癌SGC7901/ADM细胞凋亡的影响,本研究构建靶向MDR1基因重组干扰载体,稳定转染SGC7901/ADM细胞,流式细胞术检测P-gp外排泵功能。激光共聚焦显微镜下观察细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂情况。结果发现,构建的shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MDR1稳定转染SGC7901/ADM细胞后,细胞内Rho-123相对荧光强度升高;激光共聚焦显微镜下观察到,细胞形态发生改变,出现凋亡特征,与SGC7901/ADM细胞相比,经紫杉醇处理后SGC7901/ADM-2.1-3细胞的DNA片段化更为明显。结果表明,MDR1基因沉默增强了紫杉醇诱导SGC7901/ADM细胞凋亡的敏感性。
- 邵淑丽李妍李旭艳张伟伟恽冬泽
- 关键词：紫杉醇
