胡云霏 作品数:7 被引量:9 H指数:2 供职机构: 湖南农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 湖南省科技厅重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
通过噬菌体展示技术结合亚细胞定位方法筛选细菌表面保护性抗原 寻找细菌表面蛋白作为潜在的疫苗或者药物作用靶点研究对象,可以用于预防和治疗相应的细菌性疾病。本论文中,我们以红斑丹毒丝菌(革兰氏阳性菌)和A型猪巴氏杆菌(革兰氏阴性菌)为研究对象,建立一种新的通过噬菌体展示技术结合亚细胞... 胡云霏关键词:噬菌体展示 模拟抗原表位 亚细胞定位 表面蛋白 红斑丹毒丝菌 文献传递 利用噬菌体展示技术筛选猪圆环病毒2 Cap蛋白的线性B细胞表位 衣壳蛋白(Cap)是圆环病毒2的唯一结构蛋白,因其良好的抗原保护性,成为疫苗研究的主要对象。为了寻找一种快速且简单的方法来确定Cap蛋白的抗原表位,我们以亲和层析纯化的Cap蛋白特异性多克隆抗体为靶分子,利用噬菌体随机7... 葛猛 颜爱 胡云霏 李润成 余兴龙关键词:猪圆环病毒2型 衣壳蛋白 噬菌体展示 文献传递 猪瘟病毒NS5A多克隆抗体的制备及鉴定 本实验采用原核表达方式表达CSFV NS5A重组蛋白(rp-NSSA),以纯化获取的rp—NS5A免疫小鼠制备多克隆抗体。采用PCR方法从携带猪瘟病毒兔化弱毒(Hog CholeraLapinized Virus HCL... 蒋大良 胡云霏 王淑琴 屈泰龙 赵墩 钱幸 田世成 喻凯 余兴龙关键词:猪瘟病毒 基因克隆 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 一种改进的高效模拟抗原表位噬菌体的筛选方法 被引量:1 2017年 以抗红斑丹毒丝菌多克隆抗体为研究对象,首先加入噬菌体与抗体作用,保证目的噬菌体与抗体的高效结合,再通过蛋白A和蛋白G能快速、高亲和力吸附抗体Fc段的特性,将抗体-噬菌体复合物固定在酶标孔中;经洗涤和洗脱后将筛选的噬菌体稀释,分装到10块96孔培养板中扩增。第1轮筛选所获得的噬菌体种类一般少于1×104个,经约1 000倍稀释后,每个酶标孔中扩增的噬菌体少于10个,这将极大地降低噬菌体因竞争扩增而丢失的概率,甚至无噬菌体丢失。结果显示,相比于传统方法从224个样品中获得36个多肽,本次从100个样品中就获得了72个多肽。同时,为满足大量噬菌体样品的验证工作,采用加入40 m L/L吐温-80的培养基在10 m L离心管中以2 m L体积扩增噬菌体,最终的噬菌体效价提高了317%,总量超过8×1010,足以满足后续试验的要求。该改进的方法可以显著提高噬菌体筛选的效率,可操作性强,具有广泛的普遍适用性。 胡云霏 葛猛 岑静 李润成 余兴龙关键词:噬菌体展示 模拟抗原表位 多样性 扩增 利用噬菌体展示技术筛选猪圆环病毒2 Cap蛋白的线性B细胞表位 衣壳蛋白(Cap)是圆环病毒2的唯一结构蛋白,因其良好的抗原保护性,成为疫苗研究的主要对象。为了寻找一种快速且简单的方法来确定Cap蛋白的抗原表位,我们以亲和层析纯化的Cap蛋白特异性多克隆抗体为靶分子,利用噬菌体随机7... 葛猛 颜爱 胡云霏 李润成 余兴龙关键词:衣壳蛋白 噬菌体展示 表位 文献传递 猪血清中抗猪丹毒丝菌特异性IgG的纯化 被引量:6 2013年 为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG,采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明,血清用量对IgG的纯化结果影响不大,而细菌的用量则与IgG的获得量成正比;用猪丹毒丝菌与阳性血清吸附,初步纯化出的猪丹毒丝菌特异性IgG,再用SPA亲和层析法特异性的浓缩和纯化IgG,获得的抗体含量为240μg/mL,即从8 mL阳性血清中获得360μg猪丹毒丝菌特异性IgG,其纯度接近100%,可用于噬菌体展示的靶分子。 胡云霏 钱幸 王淑琴 余兴龙 刘晓波 罗璋关键词:猪血清 猪丹毒丝菌抗原表位和表面分子结合肽的噬菌体展示以及初步分析 猪丹毒丝菌为革兰氏阳性无芽孢杆菌,主要对猪有致病作用,引起的疾病称为猪丹毒。本实验以猪丹毒丝菌为研究对象,应用噬菌体展示技术对其抗原表位和表面分子结合肽(SMBP)进行研究,主要实验如下:通过菌体抗原吸附和重组葡萄球菌蛋... 胡云霏关键词:多克隆抗体 噬菌体展示 模拟表位 文献传递