张晓菲
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 供职机构：石河子大学医学院新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- ABCA1中间缺失突变体的构建及其抗砷性研究被引量：3
- 2010年
- 目的:构建缺失ABCA1,ABCA1蛋白胞外第一环第264-520位氨基酸密码子的基因,并真核表达检测其抗砷性变化。方法:应用重叠区扩增基因拼接法的原理,在拼接延伸后,再进行一次PCR扩增,得到缺失第264-520位氨基酸密码子的ABCA1基因,克隆至pcDNA3.1/V5-His真核表达载体。通过激光共聚焦检测突变体细胞定位,MTT加砷后检测突变体生存率变化。结果:成功构建缺失ABCA1蛋白胞外第一环第264-520位氨基酸密码子的基因。共聚焦显微镜观察突变体定位于细胞膜上,随机区组方差分析结果显示ABCA1突变体生存率明显低于ABCA1野生型。结论:ABCA1胞外第一环缺失突变后基本丧失抗砷功能。
- 张晓菲谭晓华程建兵李金涛孟强杨磊
- 关键词：ABCA1克隆抗砷基因
- 多药耐药及相关蛋白基因抗砷作用
- 2009年
- 目的研究多药耐药基因(MDRI)、多药耐药相关蛋白基因(MRP1)在长期砷暴露的细胞获得对砷的耐受过程中的作用,为抗砷机制的研究提供基础依据。方法采用抑制剂维拉帕米(Verapamil)、MK571,在单一水平和联合水平上阻断MDR1和MRP1基因发挥作用,通过四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞的生存率及半数致死量(IC50);通过原子荧光法(AFS)分别检测给予Verapamil、MK571的实验组和对照组在不同时间点抗砷细胞内砷的含量。结果在2,4,8,16,32,64μmol/L砷浓度下,给予抑制剂的抗砷细胞生存率分别为(73.5±0.02)%,(54.6±0.07)%,(44.2±0.05)%,(20.5±0.09)%,(13.5±0.1)%,(7.6±0.05)%,明显低于同步对照组的生存率(93.5±0.05)%,(71.5±0.02)%,(49.2±0.03)%,(38.8±0.08)%,(37.6±0.06)%,(19.5±0.04)%。Verapamil作用下IC50为8.8μmol/L,MK571作用下IC50为6.22μmol/L;同时给于2种抑制剂时,逆转作用更为明显,IC50为5.23μmol/L;MK571作用下,抗砷细胞内砷含量增加明显,至10 h时砷含量达到最大值1.62 ng,明显高出Verapmil组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MDR1、MRP1基因在抗砷细胞获得耐药性过程中起重要作用。
- 郭淑丽罗先道杨丽狄春红程建兵张晓菲杨磊
- 关键词：耐受多药耐药基因多药耐药蛋白蛋白基因
- ABCA1在胆固醇逆转运中作用的研究进展被引量：13
- 2010年
- ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)是一种以ATP为能源进行物质转运的膜蛋白,胆固醇、磷脂等脂类物质是ABCA1的主要转运底物,胆固醇负荷、cAMP、PPAR等信号在调节ABCA1表达中有重要影响。ABCA1在胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport,RCT)过程中与载脂蛋白结合参与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的形成,是RCT中的第一步也是关键的一步,也是该领域中研究的热点。
- 张晓菲谭晓华杨磊
- 关键词：ATP结合盒转运蛋白载脂蛋白高密度脂蛋白胆固醇逆转运
- ABCA1胞外第一环缺失突变体构建及其抗砷性研究
- 目的：本课题运用改进的重叠区扩增基因拼接法(gene splicing by overlap extension ,SOE)分别构建缺失ABCA1蛋白胞外第一环第323-579，535-625位氨基酸密码子的基因，真核表...
- 张晓菲
- 关键词：抗砷基因重叠区扩增基因拼接法HELA细胞凋亡原子荧光光度法
