杨卉新
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目国家级星火计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 乳糖酶及其基因的研究进展被引量：3
- 2014年
- 综述了动物和人的乳糖酶结构和功能以及乳糖酶基因的结构和表达特点,并探讨了乳糖酶基因多态性与乳糖不耐症的关系。
- 杨卉新杜海廷田玉民
- 关键词：乳糖酶基因多态性乳糖不耐症
- 大骨鸡HSP70蛋白的表达、纯化及质量检测被引量：2
- 2017年
- 旨在构建鸡热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达质粒p ColdⅡ-HSP70,诱导表达、纯化后检测HSP70蛋白的质量。将目的基因扩增后克隆至表达载体p Cold II,构建重组载体p ColdⅡ-HSP70,在2种大肠杆菌菌株(BL21(DE3)和Rosetta(DE3)p Lys S中经IPTG在不同温度与不同浓度条件下诱导表达并纯化。经SEC-FPLC和HPLC进行纯度鉴定,采用鲎试剂检测蛋白内毒素含量(将HSP70蛋白按1 200、600、120倍稀释);Western blot及质谱方法检测蛋白分子量。结果显示:酶切和测序结果均证实HSP70表达载体构建正确,可诱导表达。经IPTG诱导表达后确定BL21(DE3)在37℃条件下表达蛋白效果最佳,经检测HSP70蛋白的相对分子质量为71 988.04,蛋白纯度大于90%,内毒素小于500 Eu/mg。结果表明:成功构建了大骨鸡HSP70基因的表达载体,获得了纯化的HSP70蛋白,为进一步研究HSP70在热应激中的作用机制提供了基础。
- 赵颂杨卉新朱弘焱陶晓莉苏玉虹田玉民
- 关键词：大骨鸡HSP70克隆表达蛋白纯化
- 鼠肌纤维丝切蛋白CFL2互作蛋白的筛选与鉴定
- 2016年
- 筛选并鉴定小鼠腿肌组织中与丝切蛋白CFL2相互作用的蛋白质。通过免疫共沉淀技术分离小鼠腿肌组织中CFL2蛋白复合物,对获得的免疫共沉淀复合物进行SDS-PAGE分离,将分离出的差异条带用胰蛋白酶进行酶切,酶切后的肽段进行液相色谱分离,最后通过电喷雾质谱技术分析肽段组成并鉴定蛋白质,获得与CFL2互作的组织蛋白谱。通过Western blot检测,确定在天然状态下小鼠腿肌组织中CFL2与Ndufb7之间存在相互作用。首次利用免疫共沉淀联合质谱技术成功从小鼠腿肌组织中筛选并鉴定出与CFL2相互作用的蛋白Ndufb7,为进一步研究CFL2在骨骼肌肌纤维形成中的作用提供理论基础。
- 赵颂杨卉新许晶朱弘焱陶晓莉田玉民苏玉虹
- 关键词：免疫共沉淀质谱
- 猪附红细胞体病研究进展被引量：8
- 2013年
- 目前由猪附红细胞体(嗜血支原体)感染引起的附红细胞体病对我国的养猪业已经造成了严重影响,尤其是附红细胞体感染常为其他病原体入侵打开了门户,成为引起继发感染的直接原因。本文从病原学、附红细胞体的生物学特性、诊断方法、治疗和预防、发病机制以及免疫系统变化的角度综合性阐述了附红细胞体病的研究进展,为后续的研究和防制提供借鉴。
- 杨卉新单思巴彩凤
- 关键词：附红细胞体生物学发病机制
- 猪MEF2C基因慢病毒表达载体构建及C2C12细胞转染条件的优化被引量：2
- 2014年
- MEF2C基因能够控制肌细胞分化过程中的基因转录,特别在骨骼肌、心肌和平滑肌中介导细胞的分化。本研究将猪MEF2C基因化学合成后经Bam HI和Asc I双酶切后克隆到慢病毒表达载体pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP中,获得的重组质粒用限制性内切酶酶切分析和测序鉴定;利用慢病毒阴性对照侵染靶细胞C2C12来确定最佳MOI值以及靶细胞最适抗生素Blasticidin剂量。结果显示猪MEF2C基因成功克隆到慢病毒表达载体中;该重组质粒侵染靶细胞C2C12的最佳MOI值为300;靶细胞抗生素的筛选剂量为4μg/mL,维持剂量为3μg/mL上述试验为建立MEF2C稳定过表达细胞系提供了前期工作基础。
- 朱弘焱杨卉新田玉民苏玉虹
- 关键词：慢病毒表达载体C2C12细胞
- 禽白血病J亚群病毒特性的研究
- 2017年
- 禽白血病引起以造血细胞恶性增生为主的肿瘤,引起养禽业较大的经济损失,其致病病毒—禽白血病病毒(ALV)的J亚群是目前危害鸡群的最主要亚群。gp85决定了ALV-J的亚群特异性,其基因具有极高变异,目前尚未有应用于临床的疫苗和防制药物。本文介绍了ALV的基因组结构、ALV-J亚群的致病特点和流行特点,以及ALV-J gp85的基因变异、单克隆抗体和疫苗的研究进展,为进一步深入研究ALV-J gp85的致病机理、研究开发诊断试剂盒和有效的预防疫苗提供了参考。
- 杨卉新李冰
- 关键词：ALV-J流行病学基因变异
- 猪细小病毒的分型、遗传进化及流行病学研究进展被引量：5
- 2015年
- 猪细小病毒(PPV)是影响母猪繁殖性能,尤其是初产母猪的重要因素。目前,已经比较明确细小病毒具有复杂的生活史;其分型为PPV-4型、博卡病毒和PPV5-6型。不仅家猪和野猪感染PPV,而且多种动物体内存在PPV的特异性抗体,因此PPV的宿主范围在扩大,感染谱逐渐加宽。本综述将为PPV的预防、诊断和治疗提供借鉴。
- 杨卉新田玉民
- 关键词：细小病毒遗传进化流行病学
- 猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶单克隆抗体制备及鉴定被引量：2
- 2017年
- 为制备猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)的特异性单克隆抗体,设计合成多肽并与载体蛋白偶联,经细胞融合、培养基筛选、阳性细胞的检测与单克隆化后,获得3株能稳定分泌抗skMLCK单克隆抗体的杂交瘤细胞株;种植BALB/c小鼠腹腔,收集腹水,纯化后得到skMLCK的单克隆抗体。分别应用高效液相色谱、质谱和Western blot对纯化单克隆抗体进行抗体纯度、效价和敏感性检测。结果显示:获得的猪skMLCK单克隆抗体,能特异性识别skMLCK纯化蛋白、猪肌肉组织的内源性蛋白。本试验成功制备了能特异性结合猪skMLCK的单克隆抗体,这为今后进一步研究探讨skMLCK对猪肌肉发育的影响提供物质基础。
- 杨卉新朱弘焱陶晓莉苏玉虹田玉民
- 关键词：单克隆抗体特异性
- 限量饲喂对庄河大骨鸡母鸡育成期生长性能的影响被引量：4
- 2016年
- 研究限饲对大骨鸡育成期生长性能的影响,将90只12周龄大骨鸡随机分成3个组：自由采食组、限饲Ⅰ组（13～14周龄,105g/（d·只）;15～17周龄：110g/（d·只）;18～20周龄,120g/（d·只））和限饲Ⅱ组（限饲Ⅰ组的80%）;每个组设3个重复,每个重复10只。结果表明：与自由采食组相比,限饲Ⅱ组极显著降低了13～20周龄育成期大骨鸡增重;而20周龄育成鸡体重限饲Ⅰ组与自由采食组、限饲Ⅱ组间差异不显著。限饲Ⅰ组18周龄母鸡的体重均匀度明显改善（P〈0.05）。20周龄体重与13～20周龄累计采食量极显著正相关,自由采食大骨鸡的平均日采食量与周龄极显著正相关。
- 王佳玉杨卉新丛钰佳顾党田玉民苏玉虹王铁良
- 关键词：大骨鸡育成期限饲
