郭静
- 作品数:7 被引量:13H指数:2
- 供职机构:湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金:湖北省农业科技创新中心资助项目国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 新城疫病毒耐热活疫苗载体系统及其应用
- 本发明属病毒遗传操作领域,具体涉及一种新城疫病毒(NDV)耐热活疫苗载体系统及其应用。本发明的新城疫病毒耐热活疫苗载体系统包括:a)转录质粒,通过将NDV耐热疫苗株的基因组全长cDNA克隆至pBR322载体中获得;b)三...
- 温国元邵华斌杨峻王红琳罗青平张蓉蓉艾地云罗玲商雨郭静陈晨
- 文献传递
- 新城疫病毒TS09耐热株在BHK细胞上的传代培养被引量:8
- 2012年
- 以新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)TS09耐热株为研究对象,研究了该毒株在幼仓鼠肾传代细胞(BHK细胞)上的培养适应性。通过培养条件的优化、连续传代培养和极限稀释法纯化,获得了一株新的、纯化的、适应BHK细胞的NDV耐热株,命名为TS09-C株。TS09-C株的生物学特性测定结果表明,TS09-C株在BHK细胞中的增殖滴度为107.9TCID50/mL,平均鸡胚致死时间(MDT)大于120 h,脑内致病指数(ICPI)为0。与亲本株TS09株相比,TS09-C株的基因序列发生了较为明显的改变,但TS09-C株与亲本株仍保持着较近的遗传进化关系。
- 温国元商雨郭静杨峻王红琳罗青平张蓉蓉邵华斌
- 关键词:耐热BHK细胞传代
- 新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:2
- 2013年
- 经对部分发表在NCBI里的新城疫病毒序列进行比对,在其F基因上找到1段相对保守序列,根据保守序列设计1对引物和1条TaqMan探针,以新城疫I系疫苗株(Mukteswar株)作为标准品,通过系列条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了一种灵敏度高、特异性强和重复性好的荧光RT-PCR检测新城疫病毒的方法。该方法能检测最低初始病毒浓度为10^2.2ELD50/mL,且在10^8.2~10^2.2ELD50/mL内Ct值与病毒浓度的对数值(1gELD50/mL)呈很好的线性关系,R^2达到0.9975;该方法对禽流感、禽痘病毒和禽大肠杆菌等禽病病原核酸无交叉反应;批间和批内重复性良好;临床样品检测中荧光RT—PCR与鸡胚分毒的符合率、诊断灵敏度和诊断特异性分别为98.5%,50.0%和98.4%。因此,荧光RT—PCR检测方法的建立为新城疫病毒检测提供了一种快速有效的方法,为新城疫病毒的研究奠定了一定的基础。
- 商雨郭静王红琳罗青平胡薛英邵华斌程国富温国元
- 关键词:荧光RT-PCR新城疫病毒F基因
- 新城疫病毒耐热活疫苗载体系统及其应用
- 本发明属病毒遗传操作领域,具体涉及一种新城疫病毒(NDV)耐热活疫苗载体系统及其应用。本发明的新城疫病毒耐热活疫苗载体系统包括:a)转录质粒,通过将NDV耐热疫苗株的基因组全长cDNA克隆至pBR322载体中获得;b)三...
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- 文献传递
- 新城疫病毒耐热弱毒TS09-C株反向遗传操作系统的建立被引量:3
- 2014年
- 为了建立新城疫病毒(NDV)耐热弱毒株的反向遗传操作平台,以NDV TS09-C耐热弱毒株为研究对象,构建了TS09-C株的全长c DNA克隆质粒和3个分别表达NP、P和L的辅助质粒。通过4个质粒共转染预感染有表达T7 RNA聚合酶的痘病毒的BHK-21细胞,拯救出了重组病毒r TS09-C株。生物学特性试验结果表明,重组病毒r TS09-C株具有与亲本株相似的耐热、弱毒和细胞增殖特性。NDV耐热毒株反向遗传操作系统的建立为耐热活疫苗载体的研究,进一步研发新型多联(多价)耐热禽用活疫苗提供了技术平台,也为耐热机理的研究打下基础。
- 温国元郭静商雨陈晨王红琳罗青平张蓉蓉王宏才张腾飞杨峻程国富邵华斌
- 关键词:耐热反向遗传操作
- 一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用
- 本发明涉及一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用,其微生物保藏号是:CCTCC V201113;分类命名:新城疫病毒TS09-C株;保藏时间是:2011年5月9日;保藏单位:中国典型培养物保藏中...
- 温国元邵华斌杨峻商雨王红琳罗青平张蓉蓉郭静艾地云罗玲
- 一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用
- 本发明涉及一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用,其微生物保藏号是:CCTCC No.V201113;分类命名:新城疫病毒TS09-C株;保藏时间是:2011年5月9日;保藏单位:中国典型培养物...
- 温国元邵华斌杨峻商雨王红琳罗青平张蓉蓉郭静艾地云罗玲
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