吴轲
- 作品数：24 被引量：99H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肥大细胞体外诱生CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的作用
- 2009年
- 探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1∶2、1∶1、2∶1)置于48孔培养板中培养,作为三个实验组;未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3抗体和CD28抗体各2μg/ml,IL-2 1 000U/ml,5 d后流式检测Foxp3表达情况。RT-PCR,免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。与对照组相比,实验组Foxp3表达均升高(对照组:3.37%±0.40%;实验组为:8.23%±0.80%、10.87%±1.25%、13.63%±0.55%)。RT-PCR和免疫组化均检出TGF-β1表达。肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,可能与肥大细胞表达TGF-β1有关。
- 张维娜吴轲周鸿敏何文涛高英汪理林星光方泽民蔡兰军周巧丹雒真龙陈忠华
- 关键词：小鼠肥大细胞CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞TGF-Β1
- 胃肠道恶性肿瘤实验研究热点的现况与展望被引量：4
- 2015年
- 目前胃肠道恶性肿瘤的外科治疗,特别是微创外科正蓬勃发展,但仅从外科角度不足以显著提高胃肠道恶性肿瘤的疗效及预后.因此,提高胃肠道恶性肿瘤总体疗效应该从其发生和发展的机制研究入手.近年来,随着相关研究的不断深入,肿瘤免疫微环境、肿瘤干细胞（CSC）、胃肠道微生物组学、肿瘤信号系统和肿瘤免疫治疗等成为了胃肠道恶性肿瘤研究的热点.
- 陶凯雄吴轲
- 关键词：胃肠道恶性肿瘤肿瘤免疫治疗总体疗效免疫微环境肿瘤干细胞肠道微生物
- DOG-1蛋白在胃肠间质瘤中的表达及其意义被引量：10
- 2013年
- 目的探讨DOG．1在胃肠间质瘤（GIST）中的表达及其与GIST临床病理特征的关系。方法应用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测80例GIST及40例正常胃肠道组织中DOG-1及CD117的表达情况。结果80例GIST组织中有76例（95．0％）表达DOG．1，67例（83．8％）表达CD117，两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）；而40例正常胃肠道组织中，均未见CD117及DOG．1阳性表达。梭形细胞型GIST中，DOG．1与CD117阳性表达率均为96．0％（49／51）：上皮样细胞型GIST两者表达率分别为94．1％（16／17）和52．9％（9／17）；混合细胞型GIST分别为91．7％（11／12）和75．0％（9／12）。DOG．I的阳性表达与GIST患者的年龄、性别、肿瘤的发生部位及病理学分级均无关（均P〉0．05）。结论DOG．1在GIST组织中高表达。特别是在以上皮样细胞为主型中存在高表达，在正常胃肠道组织中不表达，有望作为诊断GIST的一种新型的标志物。
- 彭钊吴轲童强王国斌
- 关键词：胃肠间质瘤免疫组织化学组织芯片
- 胃肠外科基础研究现状与展望被引量：5
- 2016年
- 近年来，历史悠久的胃肠外科迎来了一个全新的发展机遇，无论是临床研究还是基础研究均得到了迅猛的发展。但是，随着生活水平的不断提高，胃肠道肿瘤的发生率亦逐渐升高，严重影响人们的生活质量威胁着生命健康。传统开腹手术治疗辅助化疗已经不能满足现代人们对生活质量和生命健康的要求。因此，早发现、早治疗，延长生存时间和提高生存质量是当前临床诊治的首要目标。而基础研究恰恰是完成这样一个目标的基石。科学技术的进步以及实验技术的提升加快了胃肠基础研究的步伐，使更深层次探究胃肠疾病发生、发展的机制得以实现。本论述从肿瘤干细胞、肿瘤相关微生物以及治疗相关的微创治疗及分子靶向治疗等方面对胃肠外科基础研究进行简要回顾及展望。
- 陶凯雄吴轲
- 关键词：胃肠外科
- 输注调节性T细胞延缓非肥胖糖尿病小鼠糖尿病的发生被引量：5
- 2008年
- 目的观察过继输注调节性T细胞（Treg）对非肥胖糖尿病（NOD）小鼠自发性糖尿病发生的影响。方法分选NOD小鼠天然调节性T细胞（nTreg），并诱导Naive T细胞转化为CD4^＋CD25^＋ Foxp3^＋调节性T细胞（iTreg），分别输注予4周龄的雌性NOD小鼠，观察糖尿病的发生情况，并确定细胞输注后Treg在体内的分布、检测血清中TGF-β1、IL-10及IL-4的表达以探讨Treg的作用机制。结果对照组小鼠13周龄时即100％自发性发生糖尿病，而输注iTreg和nTreg分别能延缓糖尿病的发生时间至24周龄和25周龄，与对照组比较差异有统计学意义（P〉0．05）。Treg细胞输注后主要分布在胸腺，iTreg在体内能促进TGF-β1、IL-10及IL-4表达的上调[血中浓度分别为（543．00±26．51）、（107．67±12．66）、（93．33±12．58）ng／L]，与对照组比较差异有统计学意义[（60．67±15．82）、（20．67±6．03）、（30．67±5．51）ng／L，P〈0．05]。结论在体外诱导生成的调节性T细胞可延缓NOD小鼠糖尿病的发生，其机制与上调具有免疫抑制效应的细胞因子相关。
- 张伟杰吴轲陈必成徐逸林星光昌盛陈忠华郑少玲
- 关键词：调节性T细胞糖尿病自身免疫性
- 腹腔镜下完整结肠系膜切除在左半结肠癌根治术中的应用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨腹腔镜下完整结肠系膜切除（complete mesocolic excision,CME）在左半结肠癌手术中的应用。方法回顾性分析2010年8月至2014年9月间42例行腹腔镜下 CME 治疗左半结肠癌病人的临床资料。结果本组所有病人手术均获成功,手术时间平均为（112.2±25.3） min,术中出血量平均为（54.4±21.6）ml；手术切除肠管的长度平均为（24.1±5.7）cm,清扫淋巴结数量平均为（18.5±6.2）枚；术后肛门首次排气平均时间为（3.3 ± 1.4）d,平均住院时间为（12.7±3.5）d,术后并发症发生4例,发生率为9.52%,其中切口感染 2例,肺部感染1例,吻合口出血1例,均经保守治疗后恢复。结论腹腔镜下左半结肠癌 CME 手术是安全可行的。
- 高金波刘兴华吕清吴轲帅晓明陶凯雄王国斌
- 关键词：腹腔镜完整结肠系膜切除左半结肠癌
- 术前输注供者脾细胞联合应用西罗莫司延长小鼠移植心存活时间的机理
- 2007年
- 目的 探讨移植术前输注供者脾细胞（DST）联合应用西罗莫司（SRL）延长小鼠移植心存活时间的机理。方法 单向混合淋巴细胞培养中的刺激细胞及静脉输注的脾细胞均采用经丝裂霉素C处理后失去增殖活性的Balb／c（H-2^d）小鼠脾细胞（包括体外实验和体内实验）。（1）体外实验：分为3组，空白对照组：取正常C57BL／6（H-2^b）小鼠（136小鼠）的脾细胞作为反应细胞；SRL组：取用SRL（1．5μ·g^-1·d^-1）灌胃7d后的B6小鼠脾细胞作为反应细胞；DST＋SRL组：取行脾细胞静脉输注8d、次日予SRL（1．5μl·g^-1·d^-1）灌胃7d后的B6小鼠的脾细胞作为反应细胞。观察各组在单向混合培养中的脾细胞增殖能力。（2）体内实验：Balb／c小鼠为供者，B6小鼠为受者，建立颈部异位心脏移植模型。实验分为3组，空白对照组：单纯行心脏移植；DST组：受者移植前8d给予供者脾细胞静脉输注；DST＋SRL组：受者移植前8d给予供者脾细胞静脉输注，次日予以SRL灌胃7d（1．5μl·g^-1·d^-1）。术后观察各组移植心的存活时间、病理表现、受者淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr细胞）和凋亡细胞比例的改变及同种抗原刺激后增殖活性变化。结果 体外实验中，DST＋SRL组反应细胞增殖活性平均为（13．76±2．81）％，明显低于空白对照组（28．14％±5．53％，P〈0．05）。体内实验中，空白对照组、DST＋SRL组以及DST组移植心平均存活时间分别为（8．6±0．48）d、（35±14．4）d和（4．83±0．52）d，DST＋SRL组存活时间显著延长（P〈0．05）；流式细胞术（FACS）分析显示DST＋SRL组脾细胞中CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例平均为（3．39±0．21）％，明显高于空白对照组（1．57％±0．3％，P〈0．05）。结论移植术前输注供者脾细胞联合应用西罗莫司可通过清除同种反应性T细胞克隆，增加受者体内CD4^＋CD25^
- 吴轲向芙莉袁劲曾志贵周鸿敏昌盛陈忠华
- 关键词：西罗莫司
- 体外分化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可减轻小鼠皮肤移植急性排斥反应被引量：3
- 2010年
- 目的利用转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制。方法分选获取CD4+CD25-T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β1刺激组和TGF-β1组。检测CD4+CD25+T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型,于0、1、2、3 d输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间,并检测移植物的病理改变和受鼠外周淋巴细胞的增殖能力。结果 TGF-β1组中CD4+CD25+T细胞比例与无TGF-β1刺激组相近,但高表达Foxp3 mRNA(P<0.05)。将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注无TGF-β1刺激组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(7.3±1.6)d,低于对照组(P<0.05);而输注TGF-β1组细胞小鼠MST为(24.1±2.5)d,较对照组和无TGF-β1刺激组明显延长(P<0.05)。病理检测亦显示TGF-β1组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润。用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β1组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组。进一步检测外周血中IL-4和IFN-γ的表达水平,结果显示TGF-β1组小鼠体内IL-4和IFN-γ均明显低于对照组和无TGF-β1刺激组。结论 TGF-β1可诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,将诱导后的调节性T细胞进行过继输注可延长小鼠皮肤移植物存活时间。
- 袁劲吴轲陈忠华
- 关键词：转化生长因子-Β1调节性T细胞皮肤移植
- 儿童遗体供肾肾移植(综述)
- 随着器官移植技术的改善与移植物生存时间的延长，等待移植的人数在不断增加，而本身有限的供体更显得尤为短缺。合理地扩大供体的来源，科学地放宽筛选供者的尺度，成为解决上述问题的方法之一。在脑死亡器官捐献立法的基础上，欧美许多国...
- 吴轲昌盛陈忠华
- 关键词：器官移植排斥反应肾移植
- 文献传递
- 小鼠骨髓源性肥大细胞的培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在体外利用小鼠骨髓干细胞诱导获得高纯度的肥大细胞。方法:从小鼠股骨获得骨髓细胞,放入含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,加入不同浓度的刺激因子,即IL-3和SCF各分别为10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml,放入CO2培养箱中培养4周,用免疫组化观察CD117的表达,用流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞的比例,用甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度,并与较常用的肥大细胞系P815做比较。结果:培养获得的肥大细胞,其中IL-3和SCF分别为10ng/ml和15ng/ml时均可在4周后得到纯度大于95%的CD117和FcεRIα双阳性肥大细胞,而20ng/ml时FcεRIα的表达却有所降低,双阳性细胞仅达90%,而P815细胞系表达FcεRIα的比例很低。免疫组化发现培养获得的细胞大部分均表达CD117。甲苯胺蓝染色发现培养获得的细胞核被染成深蓝色,胞浆中布满大量紫红色的颗粒,呈现肥大细胞的典型特征。而P815却少见典型的紫红色异染颗粒。结论:用IL-3和SCF各10ng/ml可在体外成功培养获得高纯度的小鼠骨髓源性肥大细胞,且其在表型和成熟度方面均好于P815细胞系。
- 张维娜吴轲周鸿敏彭清臻何文涛高英林星光方泽民陈忠华
- 关键词：肥大细胞骨髓小鼠
