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陈志强
作品数:
3
被引量:7
H指数:1
供职机构:
湖南农业大学动物医学院
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发文基金:
国家质检总局科技计划项目
中国博士后科学基金
湖南省自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
王权
中国农业科学院上海兽医研究所
陈永军
中国农业科学院上海兽医研究所
程天印
湖南农业大学动物医学院
常小斌
湖南农业大学
李健
上海出入境检验检疫局
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文献类型
3篇
中文期刊文章
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3篇
农业科学
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弓形虫
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食品
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孢子虫
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基因
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基因扩增
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分子检测
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分子检测技术
1篇
刚地弓形虫
1篇
PCR
机构
3篇
湖南农业大学
2篇
中国农业科学...
1篇
上海出入境检...
作者
3篇
陈志强
2篇
陈永军
2篇
程天印
2篇
王权
1篇
王巧全
1篇
李健
1篇
常小斌
1篇
潘细妹
1篇
王晓君
传媒
2篇
中国兽医寄生...
1篇
湖南农业大学...
年份
1篇
2009
2篇
2007
共
3
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动物源性食品中弓形虫Nested PCR-RFLP分子检测技术的建立
被引量:6
2007年
目的 为了建立一种快速、特异、灵敏检测动物源性食品中弓形虫的技术。方法根据原虫rDNA的部分序列,找出弓形虫和新孢子虫共同保守DNA片段,设计套式PCR两对引物,以Ultra Pure^TM基因组DNA快速提取试剂盒提取弓形虫和新孢子虫DNA为模板,初步建立了检测两种虫体的NestedPCR技术。将纯化的Nested PCR产物成功地克隆到pGEM-T-easy载体中,经鉴定、测序并进行同源性分析。结果 Nested—PCR的外、内引物对两种虫体rDNA基因均能进行扩增,长度分别在800~900bp、400~500bp之间。内引物扩增DNA序列与公布的同种虫体DNA序列同源性较高,弓形虫和新孢子虫分别达99.1%、97.2%,但它们两者之间差异较大,同源性仅为86.6%。用软件寻找能区别两者基因序列差异的酶切位点,挑选内切酶进行RFLP实验,结果表明新孢子虫NestedPCR扩增片段能被Vspl酶切。同时进行该分子检测技术的特异性和敏感性试验,实验证明该NestedPCR能对弓形虫和新孢子虫rDNA基因进行特异性的扩增,而对其它原虫基因未能扩增出任何片段;该Nested-PCR能检测出100个弓形虫速殖子/g猪肉。结论 本实验建立NestedPCR检测方法不仅可用于检测动物性食品中弓形虫,而且能明确区分弓形虫和新孢子虫。
王权
王巧全
潘淑娟
陈志强
陈永军
常小斌
李健
关键词:
弓形虫
新孢子虫
套式PCR
弓形虫上海株SAG2基因克隆和序列分析
被引量:1
2007年
目的:对弓形虫上海株SAG2基因进行克隆与鉴定。方法:采用PCR方法从弓形虫上海株总DNA中扩增到SAG2基因,与pGEM-T-easy vector连接,并进行DNA测序分析。结果:用DNAStar软件对扩增出的片断与GenBank上的7个虫株相应的序列进行同源性比较,不同宿主和不同区域上的弓形虫SAG2基因序列差异很小。结论:用基因重组技术获得的SAG2抗原,作为候选疫苗和诊断抗原,有着广阔的发展前景。
陈志强
程天印
王权
陈永军
关键词:
弓形虫
PCR
利用环媒恒温基因扩增法检测生猪刚地弓形虫
2009年
基于已公布的刚地弓形虫Sag2基因序列设计了1套特异引物,经过条件优化,成功建立了针对刚地弓形虫(简称弓形虫)的环媒恒温基因扩增检测法.根据扩增弓形虫和其他几种病原生物的效果对该方法进行评估.结果表明,该方法只检出致病性弓形虫,特异性良好;检测最低速殖子浓度为4个/μL.对长沙、株洲、湘潭三地生猪血样检测的结果是仔猪、成猪和种母猪弓形虫感染率分别为6.45%、7.69%和15.38%.
程天印
王晓君
潘细妹
陈志强
关键词:
刚地弓形虫
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