周刚
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒
- 本发明公开了一种能同时鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒，其组成包括：DNA聚合酶，dNTP，引物，PCR缓冲液，双蒸水；其特征在于：所述的引物由3对引物组成，其中，第1对引物的序列为SEQ ID NO：1...
- 韩凌霞司昌德周刚
- 不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究被引量：3
- 2014年
- 目的探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis,AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A亚群(Avian leukosis virus,ALV-A)RAV-1毒株实验,G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析,最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果 G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系,G1系最低,G6和G8系居中;G1系在攻毒后第5周开始,抗体效价一直高于其它鸡系,而G5系则最低,并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周,G1系的抗体效价显著高于G5系(P<0.05);G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周,低于其它鸡系,而G5系自攻毒后第9周至13周,极显著高于G1系(P<0.01)。结论 G1系在感染ALV后,死亡率较低,病变轻微,抗体保护力较强,且病毒的增殖较慢,因而其对AL具有较强的抗性,而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据,而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。
- 廉传江周刚司昌德文辉强陈洪岩韩凌霞
- 关键词：SPF鸡禽白血病抗性
- 鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒
- 本发明公开了一种能同时鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒，其组成包括：DNA聚合酶，dNTP，引物，PCR缓冲液，双蒸水；其特征在于：所述的引物由3对引物组成，其中，第1对引物的序列为SEQ ID NO：1...
- 韩凌霞司昌德周刚
- 文献传递
- 不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究
- 目的:探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据.方法:选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染ALV A亚群RAV-1毒株试验,G8系雏鸡(6羽...
- 廉传江周刚文辉强司昌德陈洪岩韩凌霞
- 关键词：禽白血病病毒感染
- 文献传递
- 禽白血病病毒斑点杂交检测方法的建立被引量：11
- 2010年
- 为建立禽白血病病毒(ALV)斑点杂交检测方法,本研究采用RT-PCR技术扩增ALV群特异性p27抗原基因的部分片段,并以纯化的p27PCR产物为模板,合成地高辛标记探针,以此建立了ALV的斑点杂交检测方法。用该方法对4份疑似感染ALV的现地病鸡组织样品和18枚鸡胚进行检测,结果表明所有样品均为阳性,而且与PCR检测结果的符合率达到100%。该方法具有良好的特异性和敏感性,适应于ALV临床大规模检测。
- 周刚牛成明司昌德韩凌霞
- 关键词：禽白血病病毒杂交检测RT-PCR技术地高辛标记探针PCR产物ALV
- 黑龙江省实验大鼠遗传学概貌分析被引量：1
- 2010年
- 目的对送检的黑龙江省生产的实验大鼠遗传概貌进行分析。方法参照国家标准《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法》GB/T14927.1-2001,应用乙酸纤维素板,利用Akp1、Es1、Es3、Es4、Es6、Es8、Es9和Es10等8种同工酶位点,对来自编号分别为2011、2014、3026、8028和8029的5个单位的SD、Wistar、DA、PVG等4个品系的25只实验大鼠,进行生化标记位点的检测。结果除单位2014的SD大鼠在Es3存在a和b两种带型,8028和8029未检测Es10、2014和3026未检测Es6,8,9,其余各单位的大鼠在8个位点都表现出相同的带型。结论送检的黑龙江省生产的SD和Wistar大鼠符合封闭群遗传学概貌;DA和PVG大鼠样品间带型一致。
- 韩凌霞刘霄磊牛成明周刚司昌德曲连东
- 内源和外源性禽白血病病毒鉴别PCR检测方法的建立被引量：8
- 2010年
- 为建立简单快捷的内、外源性禽白血病病毒(ALV)的鉴别检测方法,本研究根据外源性ALVA亚群标准株RAV-1的p27、env基因以及内源性ALVE亚群标准株ev1的env基因的保守序列,设计3对特异性引物,可分别对ALV、外源性ALV(A、B亚群)和内源性ALV(E、J亚群)进行扩增,扩增产物分别为793bp、387bp和234bp,通过对各反应条件的优化建立了同时检测并鉴别内、外源性ALV的多重PCR方法。该方法特异性良好、灵敏度可达到2×103copies,利用该方法和ELISA对5份现地病鸡组织样品和10枚疑似感染内源性ALV的鸡胚进行检测,结果表明:4份病鸡样品均扩增出3条特异性片段;而9枚鸡胚仅扩增出793bp和234bp的特异性片段,2种检测方法的符合率为100%。该方法为内、外源性ALV的临床鉴别诊断奠定了基础。
- 周刚牛成明司昌德韩凌霞
- 关键词：禽白血病外源性内源性复合PCR
- 禽白血病分子诊断及MHC单倍型鸡系对禽白血病的抗性研究
- 鸡主要组织相容性复合体（Major histocompatablity complex, MHC）基因具有高度多态性,国外大量的研究报道表明不同MHC单倍型的鸡对禽白血病（Avian leukosis, AL）的抗性有显...
- 周刚
- 关键词：禽白血病病毒MHC病毒载量荧光定量RT-PCR
- 文献传递
