李春梅
- 作品数：6 被引量：41H指数：2
- 供职机构：中国海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金：山东省农业良种工程项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 半滑舌鳎的一种细胞凋亡抑制因子的克隆、鉴定与分析被引量：1
- 2008年
- 克隆半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的1种细胞凋亡抑制因子survivin基因,并对其序列及表达模式进行分析。结果表明,该基因cDNA序列全长704 bp(GenBank登录号为EU499314),包括86 bp5’非翻译区,444 bp开放阅读框以及含poly(A)信号的174 bp的3’非翻译区,编码147个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,半滑舌鳎survivin氨基酸序列与斑马鱼、非洲爪蟾、鸡、小鼠和人survivin氨基酸序列的同源性分别达到了63.3%,49.0%,43.7%,43.6%和41.5%。RT-PCR分析表明,survivin基因在半滑舌鳎成体雌鱼卵巢中大量表达,在雌鱼的肾脏中微量表达,在其它雌鱼的组织中无表达,在雄性的任何组织中均无表达。该基因在受精卵、多细胞和囊胚3个胚胎发育的早期阶段,大量表达,而随着胚胎发育的进程,survivin基因的表达逐渐减少,在孵化前尾芽期胚胎中只有微量表达,在孵化后5 d的仔鱼中,几乎检测不到survivin基因的表达。表明该基因可能参与卵子形成和胚胎的早期发育。
- 孙业盈张全启齐洁陈妍婕李春梅钟其旺王志刚
- 关键词：半滑舌鳎凋亡抑制蛋白SURVIVIN基因克隆
- 鱼类MHC基因的研究概况被引量：9
- 2009年
- 主要组织相容性复合体(MHC)是在脊椎动物中发现的编码免疫球蛋白样受体的高度多态的基因群,因其在免疫系统中的重要作用而备受关注。近年来,随着发现鱼类中也存在MHC基因,自1990年代开始对鱼类的MHC进行了广泛的研究,获得了许多重要信息。本文对近年鱼类MHC的结构、基因数目、多态、表达、功能以及在鱼类研究中的应用等方面的研究作了简要介绍。
- 李春梅张全启齐洁王志刚
- 关键词：鱼类MHC主要组织相容性抗原基因
- 牙鲆fibrinogen β基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2009年
- 通过mRNA差异显示发现一个鳗弧菌刺激后在牙鲆肝脏中表达量显著增加的片段,结合RACE技术得到了该差异片段1 856 bp的全长cDNA,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码的蛋白质含有fibrinogenβ的C末端签名序列。同源性分析表明其氨基酸序列与鱼类以及哺乳类的fibrinogenβ都具有高度的相似性,因此可断定此基因为牙鲆的fibrinogenβ基因(GenBank登录号为EF581895)。RT-PCR分析表明,在注射鳗弧菌后,该基因在肝脏、肾脏、脾脏、腮、肠、心脏中的表达量呈现逐渐增加的趋势。推测其可能在鳗弧菌侵染中,起到了促进伤口愈合的作用,或通过和其他细胞因子结合在防御细菌的侵染中发挥免疫调节作用。
- 李朔齐洁王志刚范玉顶李春梅刘志鹏张全启
- 关键词：OLIVACEUS克隆
- 半滑舌鳎两种Aquaporin1同源基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2009年
- 克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)AQP1o和AQP1基因的全长cDNA序列,并对其序列和表达模式进行了分析.结果表明,AQP1ocDNA全长为993 bp,包括120 bp的5′非翻译区,789 bp的开放阅读框,84bp的3′非翻译区,编码262个氨基酸的蛋白质,分子质量为28.3×103.AQP1的cDNA全长为1 335 bp,包括63bp的5′非翻译区,786 bp的开发阅读框,486 bp的3′非翻译区,编码261个氨基酸的蛋白质,分子质量为27.4×103.聚类分析表明半滑舌鳎AQP1o蛋白与金头鲷和塞内加尔鳎等海洋鱼类在卵巢中特异表达的AQP1o聚为一类,而AQP1与非卵巢特异表达的AQP1聚为一类,表明该两类基因为不同类型的AQP1同源基因.RT-PCR分析表明两个基因具有不同的表达模式,AQP1o主要在卵巢中表达,提示其在卵巢中具有特定的生理功能、而AQP1则在雌雄鱼的多种组织中表达.
- 孙业盈张全启齐洁于燕李朔李春梅钟其旺
- 关键词：半滑舌鳎克隆
- 半滑舌鳎生长因子midkine的定点改造及原核表达
- 2013年
- 为进一步研究半滑舌鳎midkine(MK)成熟肽活性与功能,对半滑舌鳎生长因子MK成熟肽进行定点改造及原核表达。根据大肠杆菌偏爱密码子的特点,实验利用SOEing PCR法对半滑舌鳎MK成熟肽进行定点突变。将改造后的半滑舌鳎成熟肽MK克隆到载体质粒pET32a(+),构建原核表达载体pET32a(+)-MK,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株中。SDS-PAGE结果显示,与对照组相比,经IPTG诱导表达后半滑舌鳎重组蛋白MK存在于大肠杆菌上清液中,产物相对分子质量约为33 ku。研究表明,本实验对半滑舌鳎生长因子midkine成功进行了定点改造,原核表达质粒成功构建并在大肠杆菌中高效表达,且主要以可溶形式存在。
- 王亚楠刘旭东穆琳琳刘志鹏李春梅于海洋张全启
- 关键词：半滑舌鳎MIDKINE原核表达融合蛋白
- 半滑舌鳎DMRT 1基因的克隆与表达分析被引量：28
- 2008年
- 利用同源克隆的方法克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的DMRT 1基因;并用RT-PCR技术检测了该基因在半滑舌鳎不同发育时期以及雌雄成鱼的不同组织的表达情况.结果表明,该基因cDNA序列全长1 232 bp(GenBank登录号为EU007655),包括774 bp开放阅读框,131 bp5′非翻译区以及含poly(A)信号的329 bp的3′非翻译区,编码258个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明,半滑舌鳎DMRT1氨基酸序列与牙银汉鱼、黑鲷、青鳉、河豚和斑马鱼DMRT1氨基酸序列的同源性分别达到了63%、59%、54%、53%和52%;与光滑爪蟾、小鼠和人类的同源性较低分别为38%、42%和41%.RT-PCR分析表明,DMRT 1基因在半滑舌鳎早期胚胎不同发育时期和孵化后5、13、18、22和35 d的仔鱼均有表达,在孵化后22 d表达量最高.在成体鱼中只在雄性精巢中有特异表达,其他组织均无表达,表明该基因可能参与半滑舌鳎雄性性腺的发育或精子的形成.
- 孙业盈张全启齐洁王志刚陈妍婕李春梅钟其旺
- 关键词：半滑舌鳎DMRT1基因克隆
