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猪对PRRSV易感性差异的研究进展被引量：4: 2010年; 猪繁殖与呼吸综合征是当前危害养猪业最严重的传染病之一,其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV)。由于PRRSV的不断变异,其感染力和致病力增强,现有疫苗的保护效果不佳,且弱毒活疫苗有变异成新强毒的风险。本文从宿主遗传变异的角度讨论猪对PRRSV的易感性,包括猪免疫应答的变异与易感性、猪对PRRSV易感性的品种(系)间差异以及PRRSV抗性育种亟待解决的问题,试图为PRRS的防制提供新的思路。; 丰秀静曹少先孟春花孟春花刘铁铮; 关键词：PRRSV DIFFERENCES 猪繁殖弱毒活疫苗抗性育种致病力

一种基于微卫星指纹图谱的湖羊和无角陶塞特羊鉴别方法: 本发明公布了湖羊和无角陶赛特羊的微卫星指纹图谱，属于分子生物学领域。其建立方法包括以下步骤(1)湖羊和无角陶赛特羊DNA的提取；(2)微卫星引物的筛选和扩增；(3)选择有品种特征性的引物构建指纹图谱。该DNA指纹图谱中湖...; 曹少先曾检华刘铁铮孟春花丰秀静; 文献传递

一种天然过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控子: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种天然过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控子。本发明所述天然过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控子是从芹菜或大蒜或甘菊或西番莲或苹果或桔子或薄荷中分离提取的芹菜素，芹菜素的化学名称为4’,5,7...; 沈萍萍丰秀静周飞飞; 文献传递

通用型动物转基因载体的构建及验证被引量：2: 2012年; 为了构建通用型动物转基因载体,以pBluescriptⅡKS+为基础,根据标记基因所含酶切位点,设计改造多克隆位点,插入从pTARGET载体中扩增的SV40启动子及新霉素磷酸转移酶基因(Neo),其下游插入共表达序列、增强型绿色荧光蛋白质基因(EGFP)及SV40 poly A,并在SV40启动子上游和SV40 poly A下游各添加一个同向的LoxP位点,构建成通用载体pNIGFP,标记基因上游拥有Xho I、Sal I、SacⅡ多克隆位点,下游拥有Nhe I、Cla I、Sac I位点。酶切鉴定和测序表明pNIGFP构建正确。pNIGFP脂质体法转染山羊胎儿成纤维细胞,荧光显微镜下观察到EGFP高表达。遗传霉素(G418)筛选表明,Neo基因表达正常,山羊胎儿成纤维细胞的最适筛选浓度为600"g/ml。pNIGFP可利用G418进行抗性筛选,还可通过EGFP表达对外源基因的整合进行实时跟踪,另外,该载体具有LoxP位点,外源基因整合后可用Cre重组酶去除标记基因,具有高效、方便、安全的特点。; 丰秀静田石蒋进孟春花茆达干曹少先; 关键词：LOXP

Apigenin靶向激活PPARγ及其对肥胖相关炎症的抑制: 本论文从Apigenin遏制肥胖相关炎症的角度展开，得出Apigenin通过靶向结合并激活巨噬细胞中PPARγ进而对肥胖相关炎症起到显著遏制作用的重要结论。如前所述，PPARγ是调控细胞代谢的重要药物靶点，Apigeni...; 丰秀静; 关键词：芹菜素过氧化物酶体增殖物激活受体Γ; 文献传递

脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化被引量：3: 2011年; 探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法,为筛选出体细胞核移植的供核细胞,制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导,对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化,荧光显微镜下统计转染后24 h的转染效率。结果显示:在24孔培养板中,每孔接种细胞6×104个,24 h后进行转染,质粒DNA每孔0.6μg,脂质体与质粒DNA比例为4.5∶1.0,脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时,转染效率最高,达到81.2%。; 丰秀静曹少先孟春花王慧利钱勇王锋成勇; 关键词：转染效率脂质体绿色荧光蛋白

一种白杨素噻唑衍生物及其制备方法和应用: 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种白杨素噻唑衍生物及其制备方法和应用。本发明在白杨素结构中引入了噻唑集团，合成结构新颖的白杨素衍生物，并发现此化合物对巨噬细胞的替代活化具有促进作用，即可以发挥抑炎的功效，可制备成治...; 沈萍萍丰秀静徐加发杨威威; 文献传递

罗威纳杂交犬MC4R基因多态性与体重体尺的相关性研究被引量：4: 2011年; 为了探讨黑素皮质素受体4(melanoeortin receptor-4,MC4R)基因多态性对罗威纳杂交犬生长性状的影响,以罗威纳杂交犬混合DNA为模板,对MC4R基因进行PCR扩增,扩增产物直接测序筛选多态性位点。结果发现3个碱基颠换,分别是154 bp处T/C、755 bp处G/T及895 bp处T/C颠换,其中895 bp处T/C颠换存在于ApaⅠ酶切位点内,以此建立了基于ApaⅠ的PCR-RFLP检测方法,并对67只罗威纳杂交犬进行检测分析。结果表明,在受检罗威纳杂交犬中检测到AA(0.104)、AB(0.493)和BB(0.403)3种基因型,AB基因型体重显著高于BB基因型,AA、AB基因型胸围极显著高于BB基因型。可以考虑将MC4R基因作为犬体重、体尺性状选择的候选基因。; 张俊曹少先丰秀静孟春花刘铁铮赵瑶溪; 关键词：PCR-RFLP 生长性状

人α-乳白蛋白质基因的克隆及其在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达被引量：1: 2012年; 采用PCR方法从人类基因组DNA中扩增hα-LA基因,将扩增产物克隆到pMD19-T载体,并进行测序验证。通过双酶切法将测序正确的hα-LA亚克隆至真核表达载体pCEP4,构建真核表达载体pCLA并进行酶切鉴定。用脂质体法将pCLA转染至奶山羊胎儿成纤维细胞中,用RT-PCR法检测细胞中hα-LA基因mRNA的表达,用Western-blotting法检测培养上清液中hα-LA蛋白质的表达。结果显示:克隆的hα-LA基因序列完全正确,pCLA酶切鉴定正确,RT-PCR检测到转染细胞中hα-LA基因mRNA的表达,Western-blotting检测到转染细胞培养上清液中hα-LA蛋白质。表明所克隆的hα-LA基因组DNA能够在奶山羊胎儿成纤维细胞中正确转录和翻译。; 苏磊曹少先丰秀静田石孟春花王慧利张庆晓王锋; 关键词：基因克隆

一种白杨素噻唑衍生物及其制备方法和应用: 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种白杨素噻唑衍生物及其制备方法和应用。本发明在白杨素结构中引入了噻唑集团，合成结构新颖的白杨素衍生物，并发现此化合物对巨噬细胞的替代活化具有促进作用，即可以发挥抑炎的功效，可制备成治...; 沈萍萍丰秀静徐加发杨威威; 文献传递

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丰秀静