张力民
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NLK通过Smad4负调控TGFβ信号通路
- 2014年
- 目的探讨NLK对转化生长因子β(TGFβ)信号通路的影响及其分子机制。方法采用蛋白质稳定性实验检测NLK对Smad4蛋白质降解的影响;体内泛素化实验检测过表达NLK对Smad4泛素化修饰的影响;荧光素酶报告基因实验检测NLK对TGFβ信号通路报告基因载体CAGA-luc和3TP-luc的影响;实时定量PCR技术检测NLK对TGFβ信号通路靶基因p21和PAI-1的影响。结果在HEK293T细胞内,过表达NLK促进Smad4的降解和泛素化修饰;在HEK293T细胞内过表达NLK抑制细胞因子TGFβ对CAGA-luc和3TP-luc的激活作用;在HepG2细胞内过表达NLK抑制TGFβ信号通路靶基因p21和PAI-1的表达。结论 NLK促进Smad4的泛素化修饰和降解,进而抑制TGFβ信号通路。
- 张力民詹轶群李围杨晓明
- 关键词：信号通路
- HPD、NLK调控NF-kB通路和TGFβ通路及机制研究
- 本论文包括两部分内容,一是羟苯丙酮酸二加氧酶/(hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, HPD/)正调控NF-κB通路促进肺癌细胞存活和迁移。二是NLK通过Smad4/(?/)印制TGFβ信...
- 张力民
- 关键词：HPDNF-ΚB肺癌TGFΒ
- 文献传递
- NLK以激酶非依赖的方式抑制Smad4的转录活性
- 2014年
- 目的验证Nemo样激酶(NLK)与Smad4之间的相互作用并探讨NLK对Smad4功能的影响。方法应用免疫共沉淀和谷胱甘肽硫基转移酶(GST)沉降技术检测NLK与Smad4之间相互作用,GST沉降技术确定Smad4与NLK相互作用的结构域,荧光素酶报告基因实验检测NLK及NLK激酶活性突变体-NLK(KM)对Smad4转录活性的影响,体内磷酸化实验检测NLK对Smad4磷酸化的影响。结果免疫共沉淀和GST沉降的结果显示,NLK与Smad4在体内和体外存在相互作用。GST沉降的结果显示Smad4通过MH2结构域与NLK结合。荧光素酶报告基因实验的结果显示,NLK和NLK(KM)均可抑制Smad4的转录活性,且抑制程度相同。体内磷酸化的结果显示,NLK不能磷酸化Smad4。结论 NLK与Smad4相互作用,以激酶非依赖的方式抑制Smad4的转录活性,NLK抑制Smad4的分子机制有待进一步探讨。
- 张力民李围杨晓明
- 关键词：蛋白激酶SMAD4转录活性
