张永国
- 作品数:61 被引量:231H指数:10
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 猪瘟Shimen株致猪血管内皮细胞病变前后表达差异基因寻找及E2基因PK-15细胞表达
- 张永国
- 关键词:猪瘟猪血管内皮细胞差异显示技术E2基因
- 文献传递
- 汉坦病毒H8205株基因组全序列分析
- 采用RT-PCR技术扩增出汉坦病毒H8205株L、M、S基因序列,利用5'-RACE和3'-RACE扩增出基因的末端,将其分别克隆于pGEM-T Easy载体上进行序列测定,利用重叠片段拼装出汉坦病毒H8205株的基因组...
- 张永国刘伯华李靖战大伟夏玉坤罗渊祝庆余
- 关键词:汉坦病毒基因组全序列RACE系统发生树
- 文献传递
- 人及野鸟H5N1病毒株在人体靶细胞复制及拮抗人细胞因子能力差异分析
- H5N1禽流感病毒跨越种属屏障感染人类是当前全球关注的重要社会公共卫生问题之一。为了揭示H5N1病毒跨种传播的机制,本研究利用分离/保存的3株人源及7株青海野鸟源的H5N1病毒株(人分离株株A/Beijing/01/03...
- 刘伯华夏玉坤罗渊张永国李靖祝庆余
- 文献传递
- 汉坦病毒H8205株基因组全序列分析
- 汉坦病毒118205株为本室1982年利用Vero E6细胞从黑龙汀省病人全血标本中分离,采用RT-PCR、5'-RACE和3'-RACE扩增出H8205株基因全序,序列分析表明H8205株L片段长度为6533bp,读码...
- 张永国刘伯华李靖战大伟夏玉坤罗渊祝庆余
- 关键词:汉坦病毒氨基酸
- 文献传递
- 猪瘟病毒p80基因NTPase/RNA解旋酶功能区在E.coli中的表达被引量:3
- 2003年
- 采用PCR技术扩增出猪瘟病毒GXYL株和C株p80基因的NTPase/RNA解旋酶功能区(sGXNS3和sCNS3),将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-sGXNS3和pET-sCNS3。PCR、酶切和序列分析鉴定目的基因插入位置、方向和读码框完全正确。1 0mmol/LIPTG诱导得到分子量为26kD的目的蛋白,Westernblot检测表明,表达的目的蛋白能被CSFV阳性血清识别。
- 庄淑珍刘湘涛韩雪清张彦明张永国薛青红冯卫权谢庆阁
- 关键词:猪瘟病毒
- H5N1禽流感病毒空斑特征和对小鼠致病性关系研究
- 观察人源 H5N1禽流感病毒 A/Viet Nam/1194/2004和 A/Beijing/01/03及禽源病毒 A/black-headed goose/Qinghai/1/2005(H5N1)在 MDCK 细胞上的...
- 李靖战大伟刘伯华张永国户义夏玉坤杨保安祝庆余
- 文献传递
- 猪瘟流行野毒株E_2基因编码的gp55蛋白模拟分析被引量:6
- 2003年
- 利用RT-PCR和PCR技术扩增出近期猪瘟流行野毒株的E2基因,将其克隆到载体上测定核苷酸序列,根据Alfort株和Brescia株、C-株确定起始氨基酸三联体的正确位置后推导出其氨基酸序列,结果表明近期流行的猪瘟毒株与疫苗毒株和强毒株之间存在一定差异;利用DNAstar软件分析E2基因编码的gp55蛋白的疏水性、抗原性和二级结构,并与猪瘟疫苗毒株(C-株)进行比较,结果表明,目前流行的猪瘟病毒与疫苗毒的gp55蛋白在抗原性、二级结构上存在一定的差异,而C末端疏水性差异不大。
- 张永国张彦明邢福珊许信刚胡建和刘湘涛韩雪清
- 关键词:猪瘟疏水性抗原性
- 我国南方蜱样本中发现犬埃立克体DNA被引量:27
- 1999年
- 目的调查我国南方蜱样本埃立克体感染情况。方法用已发表的埃立克体16SrRNA基因的属特异引物和自行设计的犬埃立克体种特异引物,对广东、广西和海南部分地区采集的蜱样本进行PCR检测,并将阳性PCR产物克隆测序,结果通过Internet提交到美国国立医学图书馆/国家健康研究所的站点,利用BLAST对核酸数据库进行同源性检索。结果从广东采集的血红扇头蜱和广西采集的微小牛蜱样本中扩增出埃文克体452bp特异片段和大埃立克体的555bp特异片段。测序和检索结果证实这些片段均为犬埃立克体,并且两种蜱中的埃立克体DNA片段有至少4bp差异。结论这是首次在我国发现犬埃立克体病原线索。微小牛蜱也能携带犬埃立克体。表明我国极有可能存在该病的自然疫源地,有必要进行深入研究。
- 潘华陈香蕊马玉海孙洋于强佟世德张雪颍牛华张永国JacquelineDawson
- 关键词:埃立克体DNA
- 一种拯救流感病毒的方法及其专用双向转录载体
- 本发明公开了一种拯救流感病毒的方法及其专用双向转录载体。该双向转录载体,是在pVAX1的多克隆位点插入RNA聚合酶I的启动子和RNA聚合酶I的终止子得到的环状重组载体;所述RNA聚合酶I的终止子位于所述pVAX1的CMV...
- 祝庆余刘伯华张永国战大伟户义夏玉坤罗渊杨保安李靖
- 文献传递
- 猪瘟病毒Shimen株p80基因的克隆及其真核表达质粒的构建被引量:3
- 2005年
- 根据已发表的猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)Alfort株和Brescia株的全基因组序列,设计2对引物P1/P2和B1/B2,在B1和B2的5'端分别加上XhoI和ApaI位点,以CSFVShimen株细胞毒为材料一步法提取总RNA,并以此为模板采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR),成功地扩增到约2.0kb的片段,将此PCR产物回收后与pMD18-T连接、转化,获得重组质粒,经PCR扩增,限制性酶切(BamhI/HindШ)和序列部分测定鉴定为阳性重组质粒P80-T。将P80-T分别经XhoI和ApaI酶切消化、回收后,与经XhoI/ApaI酶解的真核表达载体PEGPF-C1连接、转化,获得重组质粒,经PCR,XhoI和ApaI限制性酶切和序列测定鉴定为真核表达质粒P80-P,目的基因的插入位置、方向和读码框完全正确。为下一步在哺乳动物细胞中表达猪瘟病毒p80蛋白奠定了基础。
- 孙裴张彦明魏中锋倪斌洪海霞张永国郭抗抗王晶钰
- 关键词:真核表达质粒细胞毒套式PCR猪瘟病毒CSFV