- 沉默circ0000745通过靶向miR-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响被引量：2
- 2022年
- 目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与miR-296-5p表达,分析circ;000745与miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ;000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ;000745+anti-miR-NC组、si-circ;000745+anti-miR-296-5p组;采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ;000745与miR-296-5p的靶向关系;采用Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circ;000745的表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56例,与存活患者相比,死亡患者的circ;000745明显增高(P<0.05),miR-296-5p明显降低(P<0.05)。与HT-29细胞相比,HCT-116细胞的circ;000745 mRNA表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05),选择HCT-116细胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ;000745组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);circ;000745可靶向调控miR-296-5p的表达;与miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);与si-circ;000745+anti-miR-NC组比较,si-circ;000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均P<0.05)。结论结直肠癌组织中circ;000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ;000745及低表达miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ;000745通过靶向miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转移,沉默circ;000745可�
- 覃先蓬赵高平杨春朱学强刘浩杨洲
- 关键词：结直肠癌细胞增殖迁移
- SATB2与miR-31、182对结直肠癌的靶向调控被引量：7
- 2019年
- 目的探讨结直肠癌中靶向调控特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白(SATB)2有关的miR-31和miR-182表达水平,并分析其与SATB2的关系。方法根据候选miRNAs的预测结果,构建SATB2基因3′UTR突变性和野生型的荧光素酶载体,与miRNA抑制物转染、报告基因检测和miRNA模拟物等技术手段相结合,检验候选miRNA是否对SATB2基因的表达具有靶向调控作用,确定miRNA对调控结直肠癌转移相关基因SATB2的靶效性。结果 miR-31和miR-182是靶向调控SATB2的候选基因。结直肠癌组织中miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05),与未转移比较,结直肠癌转移的miR-31和miR-182表达明显增高(P<0.05)。慢病毒感染结直肠癌细胞SW480得到稳定过表达。miR-31和miR-182的结直肠癌细胞株SW480/miR-31和SW480/miR-182的增殖能力明显高于对照SW480/Con(P<0.05)。SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞形成的克隆较对照SW480/Con细胞明显多(P<0.05),SW480/miR-31,停留在G0/G1期的细胞减少,S期的细胞增多,G2/M期细胞增多,SW480/miR-182,G0/G1期的细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞增多。与对照SW480/Con细胞比较,SW480/miR-31和SW480/miR-182的细胞内荧光素酶的活性明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞体外增殖能力均明显降低(P<0.05)。SATB2基因转染后,SW480/miR-31和SW480/miR-182细胞进入G0/G1期,S期细胞减少,G2/M期细胞减少,SATB2基因转染后,miR-31和miR-182细胞运动能力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠的瘤体积和瘤重量均明显增高(P<0.05)。与对照组比较,实验组裸鼠瘤的miR-31和miR-182表达均明显增高(P<0.05)。结论结直肠癌中靶向调控SATB2细胞的miR-31和miR-182在结直肠癌中的表达水平高低与癌细胞转移、克隆及预后相关,miR-31和miR-182能反向调控SATB2的表达。
- 杨洲刚海菊覃先蓬贾贵清周晓刚赵高平高本领
- 关键词：结直肠癌
- siRNA干扰技术沉默p66SHC对结直肠癌细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨干扰p66shc基因表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、迁移的影响。方法实验分为对照组(不做任何处理)、NC-siRNA组和p66SHC-siRNA组,NC-siRNA组、p66SHC-siRNA组通过Lipofectamine 2000将特异性siRNA转染入结直肠癌HCT116细胞中。荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中p66SHC的表达量;四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell法观察细胞迁移、侵袭的变化;Western Blot检测细胞EMT相关蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)的水平。结果采用siRNA干扰HCT116细胞中p66SHC蛋白的表达后,细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),明显抑制细胞侵袭、迁移能力(P<0.05),E-cadherin蛋白的水平明显上调(P<0.05),Vimentin、N-cadherin蛋白的表达水平显著下调(P<0.05)。结论干扰p66SHC基因的表达能阻碍EMT的发生,从而降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭以及迁移能力。
- 杨洲刚海菊覃先蓬贾贵清王波杨春
- 关键词：结直肠癌HCT116细胞
- 2型糖尿病患者Roux-en-Y胃旁路术后血糖、胃肠激素、调节性B细胞和应激激素的相关性被引量：4
- 2019年
- 目的研究2型糖尿病患者Roux-en-Y胃旁路术(RYGB)术后血糖水平、调节性B细胞(Breg)、胃肠激素、应激激素的相关性。方法选择2015年6月至2018年6月住院行RYGB的T2DM患者103例,术后根据疗效分为完全缓解组(n=88)和改善组(n=15),检测患者手术前后血糖水平、Breg、胃肠激素、应激激素,分析术后各指标间的相关性。结果完全缓解组术后12个月空腹血糖(FPG)、皮质醇(Cor)、去甲肾上腺素(NE)、胃饥饿素(Ghrelin)、瘦素(Leptin)明显低于改善组,Breg明显高于改善组(P<0.05)。两组治疗前、治疗后12个月胰高血糖素样肽(GLP)-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Breg与FPG、体重指数(BMI)呈正相关(r=0.842,0.703,均P<0.05),Ghrelin与FPG、BMI呈负相关(r=-0.659,-0.582,均P<0.05),Leptin与FPG、BMI呈负相关(r=-0.720,-0.697,均P<0.05),Cor、NE与FPG呈负相关(r=-0.347,-0.334,均P<0.05)。结论2型糖尿病患者RYGB术后Breg、胃肠激素、应激激素与血糖水平、BMI相关。
- 周晓刚王林覃先蓬王凯
- 关键词：2型糖尿病ROUX-EN-Y胃旁路术血糖调节性B细胞胃肠激素应激激素
- 3D打印技术应用于复发黏液纤维肉瘤腹腔腹壁多发转移1例报告
- 2022年
- 患者,女,74岁,患者因“发现左下腹包块1年余”为主诉于2021年3月20日入院。1年余前发现左下腹包块至我院就诊,于2019年11月30日全麻下行“剖腹探查术”,术后病检回示:“腹壁包块”梭形细胞肿瘤;免疫组化示低度恶性黏液纤维肉瘤(MFS)。6月余前偶然发现左下腹部一包块,大小约4 cm×5 cm,质韧,无压痛,偶伴黑便及便秘;于当地医院就诊予以对症治疗后上述包块无明显减小(具体用药不详)。为求进一步诊治来我院。入院查体:腹部平坦,可见陈旧性手术瘢痕,无腹壁静脉曲张,未见肠型及蠕动波;腹软,全腹无压痛、反跳痛及肌紧张;左下腹部可扪及一大小约4×5 cm包块,质韧固定,无压痛。肝脾肋下未触及,肝肾区无叩痛,移动性浊音阴性,肠呜音正常。入院诊断:腹部包块:性质;入院后完善腹部增强CT:下腹壁见一不规则巨大肿块影,最大径约15.5 cm,密度不均,跨越左侧腹直肌生长,向外膨突,向内形成不规则肿块,肿块跨越腹中线,向上达骶1椎体层面,向右、向下达耻骨联合上方、膀胱局部受推挤,向左下达左侧腹股沟区,增强扫描病灶呈明显不均匀持续性强化(见图1)。考虑肿瘤占位性病变,结合病史考虑纤维肉瘤复发可能大。
- 周科覃先蓬周晓刚
- 关键词：耻骨联合蠕动波
- 鼻肠管在Roux-en-Y吻合术后加速康复中的临床意义被引量：2
- 2017年
- 目的探讨鼻肠管肠内营养在Roux-en-Y吻合术后加速康复的临床意义。方法胃肿瘤Roux-en-Y吻合术后置入鼻肠管28例患者归为研究组，未置入鼻肠管33例患者归为对照组。分析两组患者营养状况[体质量指数（BMI）、营养风险筛查2002（NRS2002）评分、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）和前白蛋白]和预后指标（肠鸣音恢复及肛门排气或排便时间、吻合口漏、腹腔脓肿或感染、切口感染或延迟愈合、术后肺部感染、术后住院时间、非计划内再手术或再入院率）。结果两组基线资料（性别、年龄、BMI、NRS2002评分、手术时间及术中出血量）比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。两组术后第6天前白蛋白（t=-2．05，P=0．045）、肠鸣音恢复时间（t=7．71，P=0．000）、肛门排气或排便时间（t=4．52，P=0．000）、术后住院时间（t=4．43，P=0．000）、切口感染或延迟愈合率（χ^2=4．78，P=0．029）比较，差异均有统计学意义。两组吻合口漏、腹腔脓肿或感染率、非计划内再手术率或再人院率比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）；术后肺部感染比较差异无统计学意义（P〉0．05），而≥70岁患者两组比较差异有统计学意义（Fisher法，P=0．029）。结论胃肿瘤Roux-en-Y吻合术经鼻肠管肠内营养可促进机体蛋白合成，促进肠功能恢复，缩短住院时间等，有利于患者术后加速康复，但建议I〉70岁者视患者肺部情况是否置管或提前拔管。
- 贾贵清刘鑫杨洲覃先蓬赵高平
- 关键词：肠道营养胃切除术吻合术
- 不同类型脂肪乳剂对胃癌根治术患者术后疗效的影响被引量：5
- 2017年
- 目的观察不同类型脂肪乳制剂对胃癌根治术患者营养状况、肝肾功能及预后的影响。方法输注结构脂肪乳218例患者设为结构甘油三酯（STG）组，输入中长链脂肪乳194例患者设为中／长链甘油三酯（MCT／LCT）组。分析两组患者营养状况[体重指数（BMI）、营养风险筛查（NRS2002）评分、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和前白蛋白（PA）]、肝肾功能[谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、血尿素（Urea）和血肌酐（Cr）]及预后指标。结果两组基线资料[性别、年龄、BMI、NRS2002评分、手术时间及术中出血量]比较差异均无统计学意义（P=0．750，0．266，0．585，0．555，0．058，0．134）。两组TP、ALB、PA、AST、ALT于术前、术后3d及7d在一定趋势内变化，STG组检测指标变化趋势分别为：（63．67±7．97）g／L-（62．51±6．98）g/L、（37．23±5．57）g／L～（34．92±4．55）g／L、（174．87±58．23）g/L-（144．60±41．54）g／L、（28．59±16．10）U／L-（29．59±19．22）U／L、（24．08±28．75）U／L～（25．96±21．73）U／L；MCT／LCT组分别为：（64．28±8．22）g／L～（61．00±6．56）g／L、（37．55±5．42）g／L-（33．09±3．89）g／L、（179．08±59．79）g/L-（132．10±42．39）g／L、（29．11±15．39）U／L-（40．04±46．13）U／L、（24．46±28．17）U／L-（35．30±41．87）U／L，两组变化趋势比较差异均有统计学意义（P=0．024，0．001，0．009，0．038，0．030）。两组TBIL、Urea和Cr于术前、术后3d及7d变化趋势比较差异均无统计学意义（P=0．560，0．242，0．954）。两组患者的术后肛门排气时间、术后7d体重变化比较，差异有统计学意义（P=0．030，0．023），而吻合口漏、切口感染率及住院时间比较差异无统计学意义（P=0．900，0．250，0．696）。结论胃癌根治术患者应用结构脂肪乳肠外营养�
- 贾贵清覃先蓬
- 关键词：胃癌肠外营养结构脂肪乳
- 腹腔镜与肠梗阻导管联合治疗老年梗阻性结直肠癌临床观察被引量：15
- 2019年
- 目的:观察腹腔镜与肠梗阻导管联合治疗老年梗阻性结直肠癌的效果和安全性。方法:收集我院2017年1月至2018年3月117例老年梗阻性结直肠癌患者资料,根据是否应用肠梗阻导管分为两组,56例行急性期结直肠肿瘤切除术的患者为对照组,61例行经肛门肠梗阻导管置入术置管成功的患者为观察组,冲洗引流7～10 d再行腹腔镜结直肠肿瘤切除术,比较两组手术方式、TNM分期、肿瘤部位、肿瘤最大径、淋巴结清扫数、术后排气时间、术后住院时间、总住院时间和术后并发症。结果:两组肿瘤最大径、术后住院时间差异无统计学意义(P> 0.05)。观察组淋巴结清扫数为(14.9±2.6)枚,多于对照组的(10.4±2.1)枚,术后排气时间和总住院时间长于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。两组均无死亡病例,观察组手术切口感染、腹腔感染、菌血症、低钠低钾低蛋白血症、吻合口瘘和下肢水肿发生率分别为4.92%、1.64%、1.64%、49.18%、1.64%和4.92%,明显低于对照组的21.43%、12.50%、14.29%、75.00%、12.50%和23.21%,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:腹腔镜与肠梗阻导管联合治疗老年梗阻性结直肠癌疗效好、创伤小,安全性好,推荐作为符合适应证的老年患者首选的手术方案。
- 周晓刚王林覃先蓬王凯
- 关键词：腹腔镜肠梗阻导管老年梗阻性结直肠癌
- 激活Wnt信号通路阻滞沉默ZEB2对结直肠癌细胞增殖抑制和凋亡促进作用被引量：6
- 2018年
- 目的研究下调结直肠癌细胞中E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)的表达对细胞增殖的影响。方法 ZEB2 shRNA组、ZEB2 shRNA+氯化锂(LiCl)组细胞用感染ZEB2 shRNA慢病毒之后的SW48细胞,shRNA-NC组细胞用感染shRNA-control慢病毒之后的SW48细胞,ZEB2 shRNA+Li Cl组细胞在实验开始时在细胞培养液中添加20 mmol/L的Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl。对照组细胞不作任何处理。以实时荧光PCR和Western blot检测结肠细胞中ZEB2的表达水平。用Western blot法测定下调ZEB2后的结直肠癌细胞中Wnt信号通路蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc表达水平。用Wnt信号通路激活剂处理下调ZEB2后的结直肠癌细胞,CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白剪切型Caspase-9(c-caspase-9)、剪切型Caspase-3(ccaspase-3)水平。结果 ZEB2在结直肠癌细胞中的表达水平高于正常结肠细胞。ZEB2 shRNA慢病毒感染可以下调结直肠癌细胞中ZEB2的表达。沉默ZEB2后的结直肠癌细胞的增殖能力降低,细胞凋亡增多,细胞中c-caspase-9、c-caspase-3蛋白水平升高,β-catenin、c-Myc蛋白水平降低。Wnt信号通路激活剂可以逆转沉默ZEB2后结直肠癌细胞增殖抑制和凋亡促进作用。结论沉默ZEB2诱导结直肠癌细胞凋亡并抑制细胞增殖,而Wnt信号通路激活剂可以逆转沉默ZEB2的这种作用。
- 杨洲刚海菊覃先蓬贾贵清王波杨春
- 关键词：结直肠癌增殖WNT信号通路
- 直肠癌手术前后血清miR-24-3p和FOXQ1水平变化及其与预后的关系研究被引量：2
- 2018年
- [目的]研究直肠癌患者手术前后血清miR-24-3p和叉头框蛋白Q1(FOXQ1)水平变化及其与预后的关系。[方法]选择2011年2月~2014年10月在我院行根治性手术切除的64例直肠癌患者(直肠癌组)作为研究对象,同时期体检健康且无肿瘤家族史的50例正常者(正常组)作为对照,检测直肠癌患者手术前后及正常组血清miR-24-3p和FOXQ1水平,分析血清miR-24-3p和FOXQ1水平与直肠癌患者临床病理特征和3年生存率的关系。[结果]直肠癌组手术前和手术后血清miR-24-3p相对表达量均显著低于正常组(P<0.05),血清FOXQ1水平均显著高于正常组(P<0.05),直肠癌患者术后血清miR-24-3p相对表达量显著升高,血清FOXQ1水平显著降低;直肠癌患者术后半年内复发患者血清miR-24-3p相对表达量显著低于未复发患者(P<0.05),血清FOXQ1水平显著高于未复发患者(P<0.05)。血清miR-24-3p表达水平与直肠癌患者TNM分期、浸润程度及淋巴结转移有关(P<0.05),血清FOXQ1水平与直肠癌患者肿瘤大小、TNM分期、浸润程度及淋巴结转移有关(P<0.05);直肠癌组患者血清miR-24-3p和FOXQ1表达水平呈显著负相关关系(r=-0.762,P=0.000);术后血清miR-24-3p升高率>48.15%患者3年生存率显著高于升高率<48.15%患者(P<0.05),血清FOXQ1降低率>33.69%患者3年生存率显著高于降低率<33.69%患者(P<0.05);FOXQ1表达水平是影响直肠癌患者预后的危险因素,而miR-24-3p表达水平是直肠癌患者预后的保护因素。[结论]直肠癌患者术后血清miR-24-3p水平显著升高,FOXQ1水平显著降低,其升高或降低程度与患者远期预后密切相关。
- 杨洲刚海菊王波覃先蓬贾贵清周晓刚
- 关键词：直肠癌
