郝向芳
- 作品数：13 被引量：18H指数：3
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局科技发展基金上海市科委科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TC21/R-Ras 2在肿瘤中的研究进展被引量：2
- 2008年
- TC21/R-Ras2是RAS原癌基因家族的成员之一,与人的多种肿瘤如乳腺癌、食管癌和口腔癌的形成密切相关,研究表明其在不同的组织、细胞系中通过不同的信号转导通路,例如PI3K-MAPK、MAPK-mTOR、PI3K/AKT等,促进肿瘤的形成、细胞的恶性转化以及转移。
- 罗海荣郝向芳李锦军
- 关键词：肿瘤信号转导
- 具有缺氧反应性的Notch信号抑制蛋白调节鼠结肠癌细胞的体内生长被引量：1
- 2009年
- 目的:研究缺氧细胞中的Notch信号对小鼠结肠癌细胞体内生长的影响。方法:将缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α中的氧依赖性蛋白降解结构域(oxygen-dependent degradation domain,ODD)、抑制Notch信号的mastermind样(mastermind-like,MAML)突变体蛋白1和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)重组构建融合蛋白表达载体。通过在免疫荧光显微镜下观察荧光强度,应用Western印迹和实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测融合蛋白对缺氧的反应性和抑制Notch信号的能力。通过失巢凋亡实验和小鼠体内肿瘤形成实验,观察融合蛋白DNMAML1-ODD-GFP(DOG)对CT26结肠癌细胞体外失巢凋亡和小鼠体内肿瘤生长的影响。结果:DOG融合蛋白在细胞中的稳定表达依赖于缺氧条件,该融合蛋白能够靶向抑制缺氧CT26细胞中的Notch信号靶基因Hes1 mRNA的表达(P<0.01)。体外失巢凋亡实验表明,DOG融合蛋白可显著促进缺氧CT26细胞的失巢凋亡(P<0.01)。小鼠体内成瘤实验显示,DOG融合蛋白的表达可抑制结肠癌细胞CT26在小鼠体内的生长(P<0.01)。结论:成功构建了靶向阻断缺氧细胞中Notch信号的融合蛋白表达载体。缺氧结肠癌细胞中的Notch信号对于肿瘤生长起重要作用。
- 何爱丽马爱辉瞿玉兰郝向芳赵林川刘永忠
- 关键词：细胞缺氧重组融合蛋白质类NOTCH信号
- 肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用
- 本发明提供了肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用。具体地，本发明提供的所述肝癌细胞系HCC-LY10的性状稳定，可稳定多次传代，并且适用于建立的肝癌动物模型，是肝癌的基础和临床前期应用研究的理想细胞系。另外，该肝癌细胞...
- 李锦军姚明闫明霞张立行刘蕾葛超郝向芳顾健人
- 文献传递
- ANGPTL4基因对不同肝癌细胞株生长的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:观察血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like4,ANGPTL4)基因对不同肝癌细胞株生长的影响。方法:用RT-PCR和Western印迹法检测9种不同肝癌细胞及永生化肝细胞中ANGPTL4的表达水平;选择ANGPTL4低表达的Huh-7、MHCC-LM3和中度表达的MHCC-97L共3个肝癌细胞株,以pEGFP-N1质粒为载体,用Lipofectamine 2000脂质体转染ANGPTL4基因,用G418筛选结合FCM法对转染阳性细胞进行筛选,建立过表达ANGPTL4的稳定细胞株。制备细胞芯片,用Ki-67荧光免疫细胞化学技术检测3个稳定细胞株的体外增殖率,用裸小鼠体内成瘤实验观察ANGPTL4对这3个细胞株在裸小鼠体内生长的影响。结果:ANGPTL4 mRNA在未转染肝癌细胞Huh-7和MHCC-LM3中低表达,在MHCC-97L细胞中中度表达,在Hep3B细胞中高表达。细胞芯片检测结果表明,与空载体组相比,稳定过表达ANGPTL4的Huh-7细胞体外增殖率较低(P=0.00074),而稳定过表达ANGPTL4的MHCC-LM3(P=0.07308)和MHCC-97L(P=0.01152)细胞株的体外增殖率则较高。体内实验证实,ANGPTL4可以明显抑制Huh-7细胞的裸鼠体内成瘤(P=0.00110),而促进MHCC-LM3细胞(P=0.05750)和MHCC-97L细胞(P=0.01891)的裸鼠体内成瘤。结论:ANGPTL4对不同肝癌细胞株的生长有不同影响,而对同一种细胞株体内和体外生长的影响基本一致。
- 曾一元郝向芳李红敖军平姚明葛超李锦军
- 关键词：肝肿瘤肿瘤细胞细胞生长
- 原发性肝癌患者血清诱导人肝癌细胞上皮-间叶间变被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨原发性肝癌和肝硬化患者的外周血清和门脉血清以及健康志愿者外周血清对肝癌细胞SMMC-7721体外生长行为、细胞骨架和侵袭能力的影响。方法:采用不同血清培养细胞,观察SMMC-7721细胞发生上皮-间叶间变反应(epi-thelial-mesenchymal transition,EMT)的能力。采用荧光免疫细胞化学检测不同血清对SMMC-7721细胞骨架蛋白(F-actin、β-tu-bulin)、上皮细胞表面分子E-cadherin、间叶细胞标志分子Vimentin表达的影响。采用体外迁移试验和侵袭试验观察不同血清对SMMC-7721细胞迁移、侵袭能力的影响。结果:不同血清诱导体外培养SMMC-7721细胞EMT的结果表明,肝硬化患者的门脉血清、肝癌患者的门脉血清和外周血清可诱发细胞发生形态学改变,其明显的特征是细胞形态由多角形变为纺锤形,即典型的EMT,而健康志愿者的外周血清则无此作用。荧光免疫细胞化学检测结果显示,经肝癌患者门脉血清处理的细胞,其骨架蛋白(F-actin、β-tubulin)的表达和排列、上皮细胞表面分子E-cadherin、间叶细胞标志分子Vimentin的表达发生明显改变。结论:肝癌患者门脉血清可促进SMMC-7721细胞的EMT反应、迁移和侵袭,这可能是导致肝细胞癌发生肝内转移、甚至远处转移的部分主要原因。
- 徐文郝向芳李红谢海洋蒋国平胡晨葛超李锦军
- 关键词：血清
- 肝癌细胞系HCC-LY5的建立及应用
- 本发明提供了肝癌细胞系HCC-LY5的建立及应用。具体地，本发明提供的所述肝癌细胞系HCC-LY5的性状稳定，可稳定多次传代，并且适用于建立的肝癌动物模型，是肝癌的基础和临床前期应用研究的理想细胞系。另外，该肝癌细胞系H...
- 李锦军姚明闫明霞张立行孙荷芬刘蕾葛超郝向芳顾健人
- 文献传递
- ANGPTL4作为血清学检测肝癌转移的标志物及其应用
- 本发明涉及一种ANGPTL4作为血清学检测肝癌转移的标志物及其应用。具体地，本发明提供了血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)在(a)制备检测肝癌转移的诊断试剂或试剂盒以及(b)制备血清检测肝癌的诊断试剂或试剂盒中的用...
- 李锦军李红姚明葛超闫明霞赵方瑜田华郝向芳顾健人
- 文献传递
- 肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用
- 本发明提供了肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用。具体地，本发明提供的所述肝癌细胞系HCC-LY10的性状稳定，可稳定多次传代，并且适用于建立的肝癌动物模型，是肝癌的基础和临床前期应用研究的理想细胞系。另外，该肝癌细胞...
- 李锦军姚明闫明霞张立行刘蕾葛超郝向芳顾健人
- 文献传递
- TC 21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。
- 郝向芳胡晨葛超李红殷胜勇谢海洋蒋国平陈陶阳李锦军
- 关键词：肝肿瘤亚细胞定位
- S100A4蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨S100A4蛋白在肝细胞癌、肝硬化、癌旁组织及正常肝组织中的表达及临床意义。方法:用组织芯片技术结合免疫组织化学法检测S100A4蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,采用统计学方法分析其表达差异的临床意义。结果:免疫组织化学检测发现,S100A4蛋白在人原发性肝细胞癌、硬化肝组织、癌旁肝组织中表达较高,在正常肝组织中表达则很低,表达阳性率分别为70.2%、54.4%、41.7%和0.0%;统计学分析结果表明,S100A4蛋白表达影响肝癌患者的术后生存期,低表达患者的生存期比高表达患者延长。结论:S100A4蛋白在肝癌及相关组织中的表达率依次为,肝细胞癌>癌旁肝>肝硬化>正常肝,在非微血管侵袭肝癌患者中S100A4阳性表达可明显降低其术后生存率。
- 郝向芳李红葛超胡晨陈陶阳李锦军
- 关键词：肝细胞免疫组织化学S100A4蛋白
