李新禹
- 作品数：8 被引量：6H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种抗血管内皮细胞生长因子受体2/抗CD3双特异单链抗体
- 本发明涉及一种基因工程抗体，具体地说涉及一种抗血管内皮细胞生长因子受体2/抗CD3双特异单链抗体，该双特异抗体包括两个分别对血管内皮细胞生长因子受体2和CD3抗原特异性的结合位点。本发明还涉及编码所述双特异抗体的核苷酸序...
- 唐晓波李淑珍李郁梅鄢成伟陈莉李新禹
- 文献传递
- 一种肝细胞癌相关蛋白HSP70的表达纯化方法
- 本发明提供了一种肝细胞癌相关蛋白HSP70的表达纯化方法。该方法包括以下步骤：合成目的基因HSP70；将基因与质粒载体分别用EcoRI与XhoI进行双酶切后连接转化感受态细胞DH5α，提取重组质粒后转化感受态细胞BL21...
- 唐晓波李淑珍单瑞辉陈莉李新禹吴红
- 波形蛋白基因的构建、表达及鉴定被引量：1
- 2012年
- 文章进行波形蛋白(VIM)基因重组质粒的构建,并进行表达与鉴定,为开辟新的肝癌诊断方法奠定基础。从人宫颈癌细胞(HELA)中提取总RNA并采用PR-PCR及PCR技术克隆VIM基因,经酶切连接等构建带有GST标签的PGEX-4T-1-VIM重组表达质粒,在大肠杆菌DH5α菌中扩增重组质粒,并在BL21菌中进行诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blotting等进行鉴定。重组及表达蛋白Vimentin的融合蛋白,为建立一种新的肝癌早期诊断方法奠定基础。
- 戴丽娟李新禹陈莉唐晓波
- 关键词：肝癌克隆
- 一种抗血管内皮细胞生长因子受体2/抗CD3双特异单链抗体
- 本发明涉及一种基因工程抗体，具体地说涉及一种抗血管内皮细胞生长因子受体2/抗CD3双特异单链抗体，该双特异抗体包括两个分别对血管内皮细胞生长因子受体2和CD3抗原特异性的结合位点。本发明还涉及编码所述双特异抗体的核苷酸序...
- 唐晓波李淑珍李郁梅鄢成伟陈莉李新禹
- 肝癌相关基因GP73的原核表达及其抗体制备
- 目的：表达人高尔基体糖蛋白73(GP73)的融合蛋白，制备其相应抗体，并为制备相应的肝癌诊断试剂盒奠定基础。 方法：利用生物信息学方法分析GP73的序列，根据它的亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段...
- 李新禹
- 关键词：肝癌原核表达抗体制备杂交瘤细胞系诊断试剂盒
- 抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测被引量：5
- 2011年
- 目的:构建和表达抗血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/抗CD3双特异单链抗体(bscVEGFR2×CD3),及亲和活性测定。方法:设计抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体基因序列,由公司合成并亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),筛选高效分泌表达bscVEGFR2×CD3的克隆株。表达产物经Ni-NTA柱纯化,120 g/L SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用流式细胞术(FCM)检测生物学活性。结果:bscVEGFR2×CD3重组表达载体测序证实序列正确。bscVEGFR2×CD3能够在CHO细胞中进行分泌表达,筛选出6株高表达克隆株。120 g/L SDS-PAGE显示相对分子质量(Mr)约56 000有1条带,与预期相符,Western blot证明anti-His抗体能与这条蛋白条带发生特异性结合。FCM检测bscVEGFR2×CD3能与CD3+jurkat细胞和VEGFR2+A375细胞特异性结合。结论:成功构建和表达抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体,该抗体具有与VEGFR2、CD3特异性结合的免疫学活性。
- 戴丽娟鄢成伟李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波
- 关键词：CD3VEGFR2
- 一种肝细胞癌相关蛋白HSP70的表达纯化方法
- 本发明提供了一种肝细胞癌相关蛋白HSP70的表达纯化方法。该方法包括以下步骤：合成目的基因HSP70；将基因与质粒载体分别用EcoRI与XhoI进行双酶切后连接转化感受态细胞DH5α，提取重组质粒后转化感受态细胞BL21...
- 唐晓波李淑珍单瑞辉陈莉李新禹吴红
- 文献传递
- 高尔基体糖蛋白GP73基因的构建、表达及鉴定
- 2011年
- 目的重组及表达人高尔基体糖蛋白73(GP73)的融合蛋白,为建立一种新的肝癌诊断方法奠定基础。方法提取转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞(293细胞)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出GP73基因,将其分别与带有HIS标签的PET-32a及GST标签的PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆并测序鉴定。进一步构建表达体系,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,最终在BL21菌中表达GP73融合蛋白(分别含有HIS,GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果 293细胞株提取的RNA经RT-PCR、PCR扩增后得到一条255 bp的DNA片段,经测序鉴定为GP73基因序列;并在大肠杆菌中实现了可溶性高表达,Western blot鉴定为GP73融合蛋白。结论采用原核表达方法可获得高纯度的GP73融合蛋白,为进一步开发GP73诊断试剂打下基础,为肝癌的诊断开辟新途径。
- 李新禹李淑珍陈莉单瑞辉唐晓波
- 关键词：肝癌克隆
