祝建顺
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家天然橡胶产业技术体系建设专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用电激共转化法转化橡胶树悬浮细胞的初步研究被引量：1
- 2016年
- 利用电激转化法对橡胶树悬浮细胞系进行转化,初步确定卡那霉素的筛选浓度、共转化的实验条件。通过电激共转化法将NPTII、GUS、EGFP和Hb CBF1基因成功导入到橡胶树悬浮细胞并整合到基因组中。通过卡那霉素抗性筛选、GFP荧光观察和PCR验证等方法,确定外源DNA片段转化成功。共筛选得到95个抗性愈伤组织,其中9个愈伤组织经过PCR验证确定整合有外源DNA片段,1个愈伤组织共转化有NPTII和GUS基因。此结果表明电激共转化法可成功应用于橡胶树悬浮细胞转化操作。
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- 关键词：橡胶树共转化
- 橡胶树细胞悬浮系电激转化体系的初步研究被引量：3
- 2011年
- 以橡胶树属种间杂交系B1(H.brasiliensis×H.nitida)的细胞悬浮系为试材,采用均匀设计结合偏最小二乘(PLS)回归,以瞬时表达率(Y1)、细胞成活率(Y2)为试验指标综合评价,以因变量最大值为优化方向,同时对两个试验指标进行回归建模。实验结果表明,正常接种后培养3 d对数期的悬浮细胞,在10μF、2 kn、1 300 V/cm的电激条件下,蔗糖浓度为0.4 mol/L的电激转化液,加入终浓度为90μg/mL的线性质粒CaMV35S-EGFP-NOS,600 mbar压强下抽真空1 min,可使细胞瞬时表达率达到0.648 1%,成活率达到56.984 7%。通过对电激转移中相关因素的优化,建立了一种适用于橡胶树悬浮细胞系较稳定的电激转移体系,为橡胶树悬浮细胞系转基因的研究提供有效方法。
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- 关键词：橡胶树均匀设计偏最小二乘回归
- 巴西橡胶树HbEBP1基因表达及其功能研究
- 橡胶树是多年生热带作物,常规育种周期很长,选育一个大规模推广的良种,一般要25～30年时间,且入选率很低,仅千分之几。在橡胶生产上,非生物胁迫严重影响了橡胶的产量,特别是低温、干旱。如何利用植物分子生物学技术,从橡胶树的...
- 祝建顺
- 关键词：巴西橡胶树抗逆
- 文献传递
- 橡胶树HbEBP1蛋白亚细胞定位初步研究被引量：1
- 2013年
- 利用融合PCR法构建HbEBP1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体,成功转化拟南芥,借助激光共聚焦显微镜检测HbEBP1-EGFP融合蛋白在转基因植株根细胞中的表达及分布。结果显示:在转基因植株根中观察到强烈荧光信号,并分布于细胞质与细胞核中。结果证实了HbEBP1蛋白同时定位于细胞质与细胞核中。
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- 关键词：橡胶树融合PCR亚细胞定位
