- 一种表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种可用于快速克隆和表达目的基因PCR产物的一种表达型前T载体，及其制备与应用。本发明的有益效果主要体现在：一步法使目的基因克隆并得到表达，省略复杂的重组过程；在构建过程中无需对PCR产物进行纯化、酶切，前T...
- 林陈水许明于真真任慧颖杨丹燕
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- 一种制备骨形态发生蛋白BMP－2成熟肽的方法
- 本发明提供了一种制备重组骨形态发生蛋白BMP－2成熟肽的方法：删除DsbA基因信号肽第2～18个氨基酸编码基因，保留第一个甲硫氨酸的密码子作为起始密码子，得到片段重组于表达载体中，获得的重组质粒1；将骨形态发生蛋白BMP...
- 林陈水付水星任慧颖黎小军徐伟于真真许明郑小玲钱俊青
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- 一种前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种前T载体，由以下方法制备得到：(1)以含有氨苄青霉素除外的大肠杆菌敏感的抗生素的抗性基因的质粒为模板进行PCR扩增，在引物的5’末端引入XcmI酶切位点，扩增得到含有所述抗生素的抗性基因及其上下游表达调控...
- 林陈水于真真许明任慧颖杨丹燕
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- 一种胞内融合表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种胞内融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI-GSGSG-HHHHHH-XcmI-Amp<Sup>r</Sup>-XcmI-HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET39质...
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- 一种前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种前T载体，由以下方法制备得到：(1)以含有氨苄青霉素除外的大肠杆菌敏感的抗生素的抗性基因的质粒为模板进行PCR扩增，在引物的5’末端引入Xcm I酶切位点，扩增得到含有所述抗生素的抗性基因及其上下游表达调...
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- 一种周质分泌融合表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种周质分泌融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI－GSGSG－HHHHHH－XcmI－Amp<Sup>r</Sup>－XcmI－HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET3...
- 林陈水于真真杨丹燕许明任慧颖
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- 色氨酸酶在大肠杆菌周质中的分泌融合表达被引量：1
- 2008年
- 按照大肠杆菌偏爱密码子合成编码"BspTI位点-连接肽(Gly-Ser-Gly-Ser-Gly-6His-Tag-Ek-site(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)"序列的DNA序列,利用重叠延伸拼接技术,将其与色氨酸酶基因TnaA拼接,利用BspTI和HindⅢ重组至pET-39二硫键形成蛋白DsbA基因的下游,转化表达宿主Escherichia coliBL21(DE3),成功构建分泌融合表达型色氨酸酶基因工程菌.通过摇瓶培养实验研究了诱导剂浓度、诱导温度及诱导时间对色氨酸酶活性的影响.工程菌以含2%甘油的LB为培养基,A600=0.5时,加入终浓度为0.05 mmol/L的Isopropyl-βD-1-thiogalactopyranoside(IPTG),30℃诱导培养8 h,可在周质空间中表达高活性的色氨酸酶融合蛋白.在培养基中添加0.5%的甘氨酸,酶活可提高6.3倍.本实验首次实现了色氨酸酶基因的周质分泌融合表达.
- 于真真林陈水
- 关键词：基因重组大肠杆菌分泌表达
- 一种胞内融合表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种胞内融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI－GSGSG－HHHHHH－XcmI－Amp<Sup>r</Sup>－XcmI－HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET39质...
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- 一种表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种可用于快速克隆和表达目的基因PCR产物的一种表达型前T载体，及其制备与应用。本发明的有益效果主要体现在：一步法使目的基因克隆并得到表达，省略复杂的重组过程；在构建过程中无需对PCR产物进行纯化、酶切，前T...
- 林陈水许明于真真任慧颖杨丹燕
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- 一种周质分泌融合表达型前T载体及其制备与应用
- 本发明提供了一种周质分泌融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI-GSGSG-HHHHHH-XcmI-Amp<Sup>r</Sup>-XcmI-HindIII的DNA 1片段；(2)定点突变pET...
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