柳照应
- 作品数：9 被引量：35H指数：4
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- 发文基金：重庆市教委科研基金国家教育部博士点基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 桑尺蠖多酚氧化酶的纯化及其部分生物化学性质被引量：4
- 2007年
- 经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,使桑尺蠖Phthonandria atrineata(Butler)多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6.28倍.该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的Km值分别为9.64 mmol/L、6.82 mmol/L和4.30 mmol/L.这种多酚氧化酶在pH=7.0,37℃时活性最高.利用多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用.此外,该酶对EDTA和金属离子比较敏感.
- 张永亮曾媛琴贾永红柳照应艾均文朱勇
- 关键词：桑尺蠖多酚氧化酶纯化抑制剂
- 家蚕耐氟性遗传育种研究进展被引量：1
- 2007年
- 家蚕的耐氟性不仅随其龄期、世代的不同有差异,也与其品种的不同和健康性有关,其耐氟性主要由微效多基因的加性效应控制或耐氟显性主效基因控制,选用耐氟性强的品种作亲本,结合耐氟性与其他经济性状的相关性,运用科学的遗传育种方法选育出高耐氟性家蚕新品种,是解决氟化物对蚕业生产危害的方法之一。本文综述了家蚕耐氟性遗传育种的研究进展。
- 李傲祥朱勇张高军曾媛琴柳照应张永亮
- 关键词：家蚕氟中毒
- 氟化物对家蚕细胞色素P450影响的研究
- 细胞色素P450酶系又称作多功能氧化酶系(MFO)，它对内源物质的代谢与降解或外源化合物的活化与降解等进行催化和调控。昆虫中的细胞色素P450作用涉及生长、发育、取食等过程，对异生物质的代谢特性导致昆虫对杀虫剂的抗性，还...
- 柳照应
- 关键词：家蚕细胞色素P450氟化物氟中毒
- 文献传递
- 野桑蚕多酚氧化酶的部分生化特性分析被引量：2
- 2007年
- 基于开发专一的酶抑制剂控制野桑蚕危害桑园的目的,采用硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100凝胶过滤等方法,纯化了野桑蚕(Bom byx mandarina)多酚氧化酶,纯化倍数为57.14倍。该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的米氏常数(Km)值分别为3.39、2.06和3.17 mmol/L,在pH 7.0、37℃时活性最高。利用硫脲、抗坏血酸等多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用。此外,该酶对乙二胺四乙酸(EDTA)和金属离子比较敏感。
- 张永亮朱勇曾媛琴贾永红柳照应艾均文
- 关键词：野桑蚕多酚氧化酶生化性质
- 家蚕细胞色素P450基因CYP6AE2的分子克隆与序列分析被引量：11
- 2007年
- 为了在分子水平上研究家蚕(Bom byx mori)细胞色素P450基因的特性,更好地探讨该基因与家蚕抗性的相关机制,依据已有的家蚕基因组数据,通过BLASTP比对,选择与抗性相关的6家族中含有预测基因数量最多的CYP6AE亚家族的1条序列,并设计1对引物,用RT-PCR方法克隆了家蚕细胞色素P450家族基因CYP6AE2(Gen-Bank登陆号:EF415296)。该基因的ORF为1 572 bp,编码523个氨基酸,推定的蛋白质分子质量为60.2 kD,等电点为8.50。将该基因的cDNA和家蚕基因组序列比对,结果表明该基因只有1个内含子;与已知的同亚家族基因CYP6AE1(欧洲防风草结网毛虫Depressaria pastinacella)、CYP6AE12(棉铃虫Helicoverpa armigera)编码的氨基酸序列比对,同源性同为53%。
- 艾均文董元凌孔卫青杨金宏刘劲张永亮张学松柳照应朱勇
- 关键词：家蚕细胞色素P450基因基因克隆
- 添食氟化物对家蚕中肠组织细胞色素P450和b5含量的影响被引量：6
- 2010年
- 为了探讨家蚕对NaF的代谢机制,以家蚕耐氟品种T6和敏感品种734为材料,5龄起蚕分别添食用200、400mg/LNaF溶液浸泡后的桑叶,检测蚕体内氧化酶系重要成员细胞色素P450和b5的含量变化。添食NaF后的168h内,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450含量比添食清水对照组高3～7倍,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长具有较高的相关性(R2=0.8220);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。添食NaF后的24～48h,敏感品种734中肠组织的细胞色素P450含量迅速增加,为添食清水对照组的1～2倍,随后逐渐下降,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长无较好的线性关系(R2=0.4727);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。在氟化物作用下,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450、b5含量显著增加,对氟化物敏感品种734中肠组织的细胞色素P450、b5含量变化相对较小,推测细胞色素P450和b5与家蚕对氟化物的代谢具有一定关联。
- 米智柳照应朱勇李傲祥曾媛琴杜文华隆耀航
- 关键词：家蚕细胞色素P450细胞色素B5
- 家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达被引量：1
- 2008年
- 以含有CYP337A1基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物经TA克隆测序鉴定后,亚克隆至原核融合表达载体PET50(b)(含有编码64.3 kD的Nus.Tag蛋白标签)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。利用SDS-PAGE方法,以空载和未诱导菌体作对照,对细菌总蛋白进行电泳分析,结果表明:经1mmol/L IPTG诱导2h后,即能看到1条大约120 kD的蛋白质特异带,与预计大小一致。进一步利用不同时间、不同温度以及不同浓度的IPTG进行诱导结果比较,发现在诱导时间为2h,温度为32℃,IPTG浓度为0.6 mmol/L的诱导条件下,融合蛋白表达量最大。该实验为利用该基因的蛋白产物进行功能分析创造了条件。
- 董元凌艾均文柳照应张湖静李傲祥朱勇
- 关键词：家蚕细胞色素P450原核表达
- 细胞色素P450新家族的第一个基因CYP337A1的分子克隆与序列分析被引量：7
- 2008年
- 依据家蚕基因组数据,通过BLASTP比对,选择了主要与抗性相关的CYP3集团(clan)中具有完全编码框并含有P450基因特征结构域的1条序列为研究对象,用RT-PCR方法对其进行了克隆.结果表明,该基因ORF为1 467 bp,编码489个氨基酸,推定的蛋白质分子质量为56.60 KDa,等电点为8.64.只有1个内含子,外显子/内含子边界处符合GT-AG规则.与美国棉铃虫的CYP321A、邪恶按蚊的CYP6P9的相似性(identity)相对较高,分别为34%、32%,低于同一家族成员氨基酸相似性应高于40%的规定,从而被细胞色素P450委员会命名为新家族的第一个基因CYP337A1(GenBank登陆号:EF415297).
- 艾均文董元凌孔卫青杨金宏张学松柳照应张永亮朱勇
- 关键词：细胞色素P450基因克隆家蚕
- 氟化物对家蚕生长发育的影响被引量：3
- 2009年
- 为了探究家蚕T6和734两品系耐氟力的差异,分别对其4龄时期氟敏指数,以及5龄时期体重变化和死亡率进行调查,在100ppm、200ppm、300ppm、400ppm氟化物浓度下,734的氟敏指数分别是:29.14、62.22、104.36和137.61,而T6的分别是:4.38、11.13、26.87和43.76,两品系的氟敏指数随着氟化物浓度的增大而增大,但734指数增加远远大于T6;734体重变化较T6明显,并且734的死亡率也远大于T6。表明了家蚕T6品系具有较强的耐氟能力。
- 米智柳照应朱勇
- 关键词：家蚕氟化物氟敏指数死亡率
