马继红
- 作品数：15 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 快速检测A型流感病毒的Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：6
- 2010年
- 根据A型流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)基因保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan BHQ探针,建立快速检测A型流感病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆A型流感病毒M基因靶序列并将其连入pMD-18T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.998。检测结果显示,该方法的灵敏度可达10 copies/μL或1 EID50病毒且特异性良好,除A型流感病毒外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪输血传播病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好,批内和批间变异系数均小于3%。对40份实验感染样品的检测结果表明,该方法与病毒分离结果一致,比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高,特异性更强。
- 马继红于海周艳君李国新闫丽萍张善瑞王斌童光志
- 关键词：A型流感病毒TAQMAN探针实时荧光定量RT-PCR
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立
- 利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段，分别克隆到双向转录表达载体PBD上，构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒，纯化质粒，将8个质粒共转染293T细胞...
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- 关键词：猪流感病毒反向遗传操作技术致病机理疫苗
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立被引量：3
- 2011年
- 利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段,分别克隆至双向转录表达载体PBD上,构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒。将8个质粒共转染293T细胞,收取转染48 h时的细胞上清并接种9～11日龄SPF鸡胚,成功拯救出有血凝活性的病毒。经序列测定,确定拯救病毒的8个基因片段均来自猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)基因组。H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的成功建立为猪流感病毒致病机理、传播机制及病毒基因功能的研究奠定了基础;同时,为H1N2亚型猪流感新型疫苗的研制开辟了新的途径。
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- 关键词：猪流感反向遗传操作技术
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究
- 引言H1亚型猪流感(swine influenza,SI)是由隶属于正粘病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)引起的猪呼吸道疾病,是目前危害全世界养猪业的重要呼吸道疾病之一...
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 文献传递
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立
- 引言猪流感(swine influenza)是由A型流感病毒引起的,广泛存在猪群中的一种严重的猪呼吸系统疾病。一直以来,由于猪流感单独感染不会在猪群大规模的流行和也不引起猪群的死亡,猪流感的在临床上一直没有引起广泛的重视...
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究被引量：2
- 2011年
- DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）HA基因DNA疫苗的表达量，增强其免疫效果，本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因密码子优化为猪体内偏嗜性密码子optiHA，同野生型A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因分别与真核表达载体PCAGGS连接构成重组质粒PCAGGS—optiHA和PCAGGS—HA，然后分别转染293T细胞，48h后采用间接免疫荧光的方法检测Ⅲ基因的瞬时表达蛋白情况。将质粒PCAGGS—HA、PCAGGS—optiHA以100μg／只的剂量，采用后腿肌肉多点注射的方式，免疫6-8周龄雌性BALB／c小鼠，同时设立空载体PCAGGS对照。共免疫3次，每次间隔2周，三免2周后对每组以10^3.87 EID50的A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）进行攻毒。采用ELISA、血凝抑制试验、细胞因子检测和肺组织病毒含量测定等实验评价这两种DNA疫苗的免疫效果。结果表明，HA基因密码子优化的DNA疫苗可显著提高体液免疫和细胞免疫的应答水平，攻毒后免疫组PCAGGS—optiHA的保护效力明显高于免疫组PCAGGS—HA。这一结果为进一步研究和设计有效的SIVDNA疫苗奠定了基础。
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 关键词：猪流感病毒HA基因密码子优化
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究
- 目的：采取对免疫原基因进行密码子优化来提高DNA疫苗的免疫原性。方法：免疫6-8周龄雌性BALB/c小鼠，对小鼠进行免疫，共三次，每次间隔 2w，三免二周后以103.87E1D50的A/Swine/Guangdong/1...
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 关键词：免疫效力
- 通用型流感疫苗研究进展
- 疫苗免疫是目前防控流感病毒最有效的方式。现有流感疫苗在不同亚型间的交叉保护力较差，且由于HA和NA蛋白存在抗原漂移和转换，极大的限制了现有疫苗的免疫保护效果，导致疫苗频繁更新。而动物模型研究结果显示，基于流感病毒基因组保...
- 马继红童光志
- 关键词：流感病毒动物模型
- M2e合成肽猪流感病毒通用疫苗及其应用
- 本发明公开了一种M2e合成肽猪流感病毒通用疫苗，该疫苗用分支肽将A型流感病毒M2蛋白N端保守的23个氨基酸序列与通用型辅助性T细胞表位进行连接。本发明还公开了该疫苗在制备预防或治疗猪流感的药物中的应用。本发明的M2e合成...
- 童光志于海杨馥如马继红周艳君
- 文献传递
- 通用型流感疫苗研究进展被引量：1
- 2011年
- 疫苗免疫是目前防控流感病毒感染最有效的策略。现有流感疫苗在不同亚型间的交叉保护力较差,并且由于HA和NA蛋白存在抗原漂移和转换现象,极大地影响了现有疫苗的免疫保护效果,甚至导致疫苗免疫失败。而动物模型研究结果显示,基于流感病毒基因组保守区域的疫苗能够对不同型或亚型的流感病毒产生广谱的交叉保护,本文主要介绍基于M2e、HA和NP的通用型流感型疫苗研究进展。
- 马继红于海童光志
- 关键词：HANP
