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siRNA干扰LEF-1的表达对骨肉瘤细胞株F5M2侵袭和迁移的影响被引量：1: 2013年; 目的:检测LEF-1在骨肉瘤细胞株F4和F5M2中的表达;探讨siRNA干扰前后对骨肉瘤细胞中LEF-1的表达及对细胞侵袭和迁移的影响。方法:采用Western-blot及qRT-PCR检测具有不同转移能力的骨肉瘤细胞株(F4,F5M2)中LEF-1的表达水平;利用RNAi干扰技术将LEF-1 siRNA转染到F5M2细胞中,使用Western-blot检测转染LEF-1 siRNA后细胞中LEF-1蛋白的表达变化;Tanswell实验检测干扰LEF-1的表达对F5M2细胞侵袭和迁移的影响。结果:LEF-1在骨肉瘤细胞株F4,F5M2中差异表达,其中在F5M2细胞中的表达较高。在转染LEF-1 siRNA的F5M2细胞中,LEF-1蛋白表达水平显著降低。Tan-swell实验结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组F5M2细胞的侵袭和迁移能力显著降低。结论:LEF-1 siRNA可以下调骨肉瘤细胞中LEF-1的表达,抑制骨肉瘤细胞的侵袭和转移。LEF-1有可能成为骨肉瘤诊治的新靶点。; 任坤闫康张迎龙曾照辉刘涛裘秀春马保安; 关键词：RNAI 迁移

人关节软骨细胞的体外分离、培养与鉴定被引量：8: 2012年; 目的:研究人关节软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,观察各代人关节软骨细胞的形态学特性。方法:取人创伤性截肢的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养。通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对细胞进行鉴定。结果:两步酶消化法消化出的软骨细胞呈圆形,培养2-3天,细胞贴壁、变形,呈三角形或多角形,2周左右细胞融合成层,传代5次后出现去分化。软骨细胞增殖和生长缓慢。形态学、免疫组织化学染色显示细胞培养5代以内可以保持表型的稳定。结论:本研究采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化法获得大量高纯度、高活性的人关节软骨细胞。5代以内细胞生长良好,生物学特性明显,适合于实验研究,5代以后出现去分化现象。; 童迅赵海恩张栋赵新文曾照辉马保安; 关键词：软骨细胞细胞学

肘关节恐怖三联征合并尺骨鹰嘴骨折1例报道被引量：2: 2018年; 在肘关节损伤中,肘关节后脱位常常合并桡骨头骨折、尺骨冠状突骨折,因其损伤形式复杂、处理困难、术后疗效差、并发症多,被Hotchkiss于1996年将此类损伤首先描述并命名为＂肘关节恐怖三联征（terrible triad of the elbow）＂。本文通过介绍1例肘关节恐怖三联征伴尺骨鹰嘴骨折的病例,; 曾照辉张云飞张勇; 关键词：肘关节恐怖三联征人工桡骨头

人正常及骨关节炎软骨细胞体外培养的对照研究被引量：3: 2013年; 目的:研究人正常软骨细胞及骨关节炎软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,对其生物学特性进行对照并评价其生物学活性。方法:取人创伤性截肢与骨关节炎全膝置换的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养。通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,测细胞增殖,甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组织化学染色对细胞进行对照研究。结果:骨关节炎软骨细胞形态似成纤维细胞,生长速度明显较正常软骨细胞慢。MTT测细胞增殖显示,第2、4、6代骨关节炎软骨细胞在相同时间点大都比同代正常软骨细胞增殖速度慢(P<0.05)。甲苯胺蓝及II型胶原免疫组化染色显示,骨关节炎软骨细胞染色较正常软骨细胞浅,经多次传代后基本无着色。结论:正常软骨细胞5代以内细胞生长良好,生物学特性明显,5代以后出现去分化现象。骨关节炎软骨细胞增殖慢,生物学特征退变早,符合软骨细胞退变的表现。这为骨关节炎在软骨细胞水平的研究提供了实验基础。; 童迅贠喆张栋赵新文曾照辉于洋马保安; 关键词：人软骨细胞骨关节炎细胞学

WNT6基因在原发性骨肉瘤组织中的表达及其临床意义被引量：1: 2013年; 目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高。因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一。通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的可能作用机制,为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据。方法:收集70例原发性骨肉瘤、28例骨样骨瘤和25例骨软骨瘤标本的存档蜡块,应用SP免疫组织化学染色法检测组织中WNT6蛋白的表达情况,并应用统计学处理数据分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系。结果:WNT6在原发性骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为90.00%(63/70)、14.29%(4/28)和12.00%(3/25)。骨样骨瘤组织WNT6阳性表达率与骨软骨瘤组织相比差异无统计学意义(P>0.05);原发性骨肉瘤组织WNT6阳性表达率明显高于骨样骨瘤组织和骨软骨瘤组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。WNT6在骨肉瘤组织中的表达与Enneking分期、肺转移和预后呈正相关关系。结论:WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调,WNT6表达与骨肉瘤的Enneking分期、年龄、肺转移等相关,同时WNT6高表达患者生存率降低,对骨肉瘤的诊断和预后评估具有重要价值,并在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标,为骨肉瘤的生物学治疗提供新的靶点。; 曾照辉闫康任坤文艳华杨连甲马保安; 关键词：骨肉瘤免疫组织化学

循环肿瘤细胞自我种植对裸鼠骨肉瘤生长的促进作用被引量：1: 2012年; 目的:通过建立骨肉瘤裸鼠荷瘤模型,观察骨肉瘤中是否存在循环肿瘤细胞自我种植现象,并探讨其在骨肉瘤进展中的作用。方法:建立骨肉瘤裸鼠原位荷瘤模型后,处理组尾静脉注射红色荧光蛋白(RFP)标记循环肿瘤细胞,对照组注射PBS,2周后将处理组原位瘤体冰冻切片荧光显微镜下观察有无自我种植,并根据肿瘤生长指标(大小、重量、生长曲线)将处理组与对照组进行比较分析。结果:处理组瘤体冰冻切片后荧光显微镜下观察发现,原位瘤组织中有红色荧光散在分布,即存在循环肿瘤细胞自我种植现象。肿瘤生长各指标比较发现,处理组瘤体在大小、重量、生长速率上均显著高于对照组(P<0.05),具有统计学意义。结论:骨肉瘤中存在循环肿瘤细胞自我种植现象,并且能够促进原位灶的生长。; 张迎龙马琼刘涛文艳华任坤徐奎曾照辉裘秀春范清宇; 关键词：循环肿瘤细胞裸鼠模型骨肉瘤

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曾照辉

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