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猪链球菌分子生物学分型方法研究进展被引量：4: 2010年; 猪链球菌是猪重要的致病菌,其种类繁多,鉴定困难。传统分型方法包括兰氏分群法,荚膜抗原分型,溶血性分型及生化分型法等。分子生物学技术的发展给猪链球菌的分型带来新的思路。论文对猪链球菌分子生物学分型方法进行介绍,包括多位点序列分型技术、脉冲场凝胶电泳、扩增片段长度多态性、随机扩增的多态性DNA、限制性片段长度多态性、核糖体分型,PCR-限制性片段长度多态性和测序。; 林荣高黎满香蒋伟陈滔; 关键词：猪链球菌分子生物学

蛙皮肤抗菌肽Dermadistinctin-L原核表达载体的构建被引量：1: 2010年; 根据GenBank中公布的猴蛙皮肤抗菌肽Dermadistinctin-L(DDL)成熟肽氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱密码子,设计合成了3条互补引物,通过PCR扩增得到完整的Dermadistinctin-L基因序列。将获得的基因序列克隆到原核表达载体pET-32a(+),经酶切鉴定和序列分析证明成功构建了pET32a-DDL表达载体,表达载体的正确构建为Dermadistinctin-L的高效表达和生物学活性研究奠定了基础。; 郑元敬黎满香刘珂颜运秋徐波卢帅林荣高; 关键词：密码子优化 PCR扩增表达载体构建

湖南猪源粪肠球菌的分离鉴定及16S rDNA系统进化分析被引量：5: 2011年; 从湖南各地送检至实验室的临床样本中分离到42株革兰氏染色阳性及过氧化氢酶阴性的球菌,其中78.6%来自于肺脏,菌落形态及染色镜检均与粪肠球菌参考株ATCC 29212相似,兰氏分群鉴定97.6%(41/42)为D群,生化特性符合粪肠球菌特征。16SrDNA测序鉴定显示:42个分离株与同步测序的ATCC 29212同源性在99.2%到100%之间,与所选择粪肠球菌参考序列的同源性在98.7%到100%之间,NCBI在线BLAST分析发现42株均与GeneBank收录的粪肠球菌序列同源性最高。湖南分离株16SrDNA序列与E.faecalis参考序列进化关系与地域分布无关,来源于不同宿主的菌株的16SrDNA变异并不大,而与E.faecium、E.canis、E.avium、E.hirae等4种肠球菌则有多处变异,这些变异区域在这4种肠球菌中却是保守的。; 黎满香林荣高薛立群蒋伟陈滔; 关键词：粪肠球菌 RDNA

抗菌肽研究进展被引量：35: 2011年; 由于细菌对抗生素耐药性不断出现,研发新型抗菌药物已迫在眉睫。抗菌肽是一种广泛存在于生物体内具备多生物活性的小分子多肽,其独特的抗菌机制和细菌不易对其产生耐药性,已倍受人们关注。论文对抗菌肽来源、分类以及生物特性、相关数据库基本情况、存在的问题等方面研究进展进行综述。; 刘诚黎满香卢帅林荣高蒋伟胡杨; 关键词：抗菌肽生物特性小分子多肽耐药性

湖南省猪源粪肠球菌基因多样性分析: 粪肠球菌是革兰氏阳性球菌,曾因是正常人和动物消化道常居菌而被忽略,后来因成为医院交叉感染的祸首,以及其对抗生素的广泛耐药性而在人类公共卫生领域备受关注。近年,动物感染粪肠球菌的报道陆续出现,但是在动物医学领域还是没有引起...; 林荣高; 关键词：粪肠球菌 AFLP 表型基因型; 文献传递

湖南省猪源粪肠球菌AFLP分析: 2012年; 为探讨分离自湖南省不同地区的42株猪源粪肠球菌的亲缘关系,采用扩增片段长度多态性(AFLP)方法对此42株分离菌进行分型研究。结果表明,湖南地区分离到的粪肠球菌在基因上存在多样性,按照同源性为75%分类可以获得21种基因型;分离株CS64、CS81和CS86有着很近的亲缘关系,且所获得AFLP图谱与菌株毒力基因型有一定的相关性。本试验应用AFLP技术分析猪源粪肠球菌基因水平的差异,同时结合以往对分离株的初步鉴定,进一步确定了其所在种,并了解不同地理种群已出现了分化。; 田世成黎满香蒋伟林荣高郭洪香屈泰龙; 关键词：粪肠球菌扩增片段长度多态性

肠球菌研究进展被引量：8: 2011年; 肠球菌(Enterococcus)是革兰阳性、过氧化氢酶阴性球菌,是人和动物肠道内主要常存菌群。该菌可引起群体致病和医院交叉感染,临床上表现为尿路感染、菌血症、心内膜炎等,加之许多报道显示肠球菌对多种抗生素都有耐药性和具有较强的致病性,因此越来越受到人们的关注。论文从生物学特性、毒力因子、耐药性、流行病学、临床检测等方面对该菌的研究现状进行概述。; 蒋伟黎满香林荣高田世成; 关键词：肠球菌毒力基因

粪肠球菌PCR检测方法的建立被引量：10: 2010年; 为建立一种基于细菌16 S rDNA的粪肠球菌PCR检测方法,用于检测临床样本和鉴定分离纯化的细菌,通过比较肠球菌间16 S rDNA的差异,设计了1对特异性引物,并对PCR反应条件进行了优化,对PCR的特异性和敏感性进行了检测。结果显示,粪肠球菌ATCC29212及42个鉴定阳性的临床分离株为PCR阳性,检测结果与16 S rDNA测序的鉴定结果一致,其他种属的4株菌为PCR阴性,所得扩增条带单一且与预期的产物大小一致,测序表明该条带为目的条带;该方法的最小检出量为134 CFU,并能直接对病料进行检测。表明所建立的PCR方法能特异地检测粪肠球菌,且敏感、简易、快捷,适用于实验室的日常检测。; 黎满香林荣高薛立群蒋伟陈滔; 关键词：粪肠球菌聚合酶链反应

抗菌肽Dermadistinctin串联表达载体的构建及表达产物抗菌活性的鉴定被引量：3: 2009年; 根据GenBank中Dermadistinctin K(DDK)和Dermadistinctin L(DDL)的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏嗜性密码子,采用SOE法合成了DDK和DDL基因。在DDK及DDL基因序列中引入肠激酶裂解位点,并将其依次克隆入pET-32a(+)质粒,构建了串联体融合表达载体P-DDK,并将其转入Rosetta(DE3)中进行融合表达;表达产物在终浓度为0.1 mmol/LIPTG诱导4 h后可达到最大表达量。对重组蛋白DDK进行镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后,对酶切产物进行了抑菌活性分析。分析结果表明,抗菌肽DDK与DDL的混合物对金黄色葡萄球菌(CowanⅠ)、大肠杆菌DH5α、致病性大肠杆菌O1、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌均具有一定的抑菌活性。; 卢帅黎满香刘珂颜运秋郑元敬林荣高; 关键词：串联体抗菌活性

猪链球菌2型湖南分离株4种毒力基因的序列分析被引量：3: 2011年; 本试验对猪链球菌2型湖南分离株的cps2j、mrp、epf、sly四种毒力基因进行部分序列扩增、测序后分析,结果表明,4株2型猪链球菌均可检出这四种毒力基因,其中cps2j、epf、sly三基因与国内外报道其他分离株具有很高同源性(98%以上)。然而湖南分离株Hunan-An1、Hunan-An2、Hunan-Ping的mrp基因与其他对比菌株相比同源性低,进化关系远,有较大变异。; 黎满香林荣高颜运秋卿泰安卢帅蒋伟陈滔; 关键词：猪链球菌2型毒力因子

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林荣高