谢闵
- 作品数：12 被引量：55H指数：6
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- LDL、oxLDL对THP-1巨噬细胞PCSK9、LDLR表达的影响研究被引量：11
- 2008年
- 为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测THP-1巨噬细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blot检测THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达.结果发现,不同浓度LDL处理THP-1巨噬细胞后,随着LDL浓度的增大,细胞内脂滴数目略有增多.免疫荧光染色发现,PCSK9在THP-1巨噬细胞上的表达随LDL浓度的增加而增多,胞浆内定位于某一特定细胞器中;RT-PCR、Western blot检测发现,LDL可以呈浓度依赖性下调THP-1巨噬细胞中LDLR的表达和上调PCSK9的表达.不同浓度oxLDL处理THP-1巨噬细胞后,随oxLDL浓度的增大,脂滴颗粒明显增加;oxLDL处理对THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达影响均不明显.研究结果表明:THP-1巨噬细胞上,同时有PCSK9和LDLR的表达,且PCSK9定位于胞浆中某一特定细胞器;oxLDL对THP-1巨噬细胞LDLR和PCSK9表达没有影响;LDL能够降低THP-1巨噬细胞表面LDLR的表达,同时上调PCSK9表达,初步说明在THP-1巨噬细胞中,两者有一定的相关性.
- 刘录山程艳丽谢闵杨琼潘利红姜志胜唐朝克危当恒唐志晗
- 关键词：THP-1巨噬细胞
- 环氧化物酶-2、血管内皮生长因子、拓扑异构酶Ⅱ在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义被引量：13
- 2014年
- 目的 探讨三阴性乳腺癌（TNBC）组织中环氧化物酶-2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）的表达及其相关性.方法 收集乳腺癌标本构建组织芯片,应用免疫组织化学检测COX-2、VEGF、TopoⅡ的表达,并结合临床病理特征进行相关性分析.结果 COX-2和VEGF在TNBC中的表达率（78.3％和87.0％）高于非TNBC（66.7％和84.5％）,但差异均无统计学意义（P＞0.05）,TopoⅡ的表达率比较差异有统计学意义（91.3％和71.4％,P＜0.05）;TNBC中三者的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理学类型及分级、脉管侵犯均无相关（P＞0.05）;VEGF与淋巴结转移相关（P＜0.05）,而COX-2、TopoⅡ却无相关（P＞0.05）;COX-2、VEGF和TopoⅡ相互之间均相关（P＜0.05）.结论 TNBC中TopoⅡ明显高表达;VEGF表达与淋巴结转移有关;COX-2、VEGF、TopoⅡ之间的表达呈明显相关,可能共同参与TNBC的发病过程和临床转归.
- 谢闵许增祥孙圣荣
- 关键词：三阴性乳腺癌环氧化物酶-2血管内皮生长因子
- pcsk9siRNA对oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响
- 人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9 ( proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,pcsk9)基因编码神经细胞凋亡调节转化酶-1蛋白(neural apoptosis regu...
- 谢闵
- 关键词：THP-1源性巨噬细胞凋亡小分子干扰RNA
- 低密度脂蛋白对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和低密度脂蛋白受体表达的影响
- 2007年
- 谢闵程艳丽刘录山
- 关键词：病理学与病理生理学低密度脂蛋白PCSK9低密度脂蛋白受体THP-1源性巨噬细胞
- 氧化修饰高密度脂蛋白促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨氧化型高密度脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化及部分免疫功能的影响。方法制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白细胞介素4使其分化为骨髓源性树突状细胞。实验分为PBS阴性对照、高密度脂蛋白组、氧化型高密度脂蛋白组和脂多糖阳性对照组。采用流式细胞术检测骨髓源性树突状细胞CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测各实验组骨髓源性树突状细胞刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测分泌到培养基中的白细胞介素12和白细胞介素10。结果与PBS组相比,氧化型高密度脂蛋白处理的骨髓源性树突状细胞,其CD86、MHCⅡ表达率、混合淋巴细胞反应液体闪烁计数和细胞因子分泌量都明显升高;高密度脂蛋白组各项指标升高不如氧化型高密度脂蛋白明显。结论氧化型高密度脂蛋白可促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化和细胞因子的分泌。
- 许增祥谢闵唐雅玲王双杨永宗
- 关键词：动脉粥样硬化树突状细胞氧化型高密度脂蛋白免疫高密度脂蛋白
- pcsk9／NARC-1在脂质代谢和神经系统中的作用被引量：10
- 2008年
- 人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因(pcsk9)编码神经细胞凋亡调节转化酶-1蛋白(NARC-1),该基因属于蛋白转化酶家族.pcsk9/NARC-1通过调节细胞表面低密度脂蛋白受体,从而在胆固醇代谢中发挥重要作用;其两种不同突变类型,可导致血液中胆固醇水平完全相反的变化,出现低胆固醇血症或高胆固醇血症.最近发现,pcsk9/NARC-1可能还影响神经系统分化,调节神经元凋亡.pcsk9/NARC-1与动脉粥样硬化(As)和阿尔茨海默病(AD)的发生可能存在潜在联系.考虑到载脂蛋白E(ApoE)在As和AD中也都起着重要作用,探讨pcsk9/NARC-1与ApoE之间可能的相关性对阐明两者在胆固醇代谢紊乱和神经系统疾病中的作用可能具有重要意义.
- 谢闵潘利红杨琼刘录山王贵学
- 关键词：胆固醇代谢动脉粥样硬化阿尔茨海默病载脂蛋白E
- pcsk9基因突变与胆固醇血症被引量：7
- 2007年
- 常染色体显性高胆固醇血症(ADH)是家族早发性动脉粥样硬化的最主要的危险因素.在与ADH有关的基因突变中,LDL-R、apoB100基因突变导致ADH的机制已经比较明确,而pcsk9基因突变与ADH相关是最近发现的.pcsk9基因编码神经凋亡调节转化酶即NARC-1,它通过在蛋白水平降低肝细胞上LDL受体的数量,使血液中LDL不能被清除,从而与高胆固醇血症相关联.研究pcsk9与LDL之间的关系,探索pcsk9在高胆固醇血症以及动脉粥样硬化发生中的作用及机制,将有助于高胆固醇血症和动脉粥样硬化发病机制的研究,也能为防治高胆固醇血症和动脉粥样硬化提供新思路.
- 程艳丽谢闵刘录山王贵学
- 关键词：前蛋白转化酶低密度脂蛋白受体
- 氧化修饰性脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞迁移的影响
- 2009年
- 目的:探讨氧化修饰性脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞(bone marrow derived dendritic cells,BM-DCs)迁移的影响。方法:制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用rmGM-CSF和rmIL-4使其分化为BMDCs。采用流式细胞术检测BMDCs CD86和MHCⅡ的表达率、免疫荧光技术检测BMDCs CD11c的表达率,以此来鉴定获得细胞为实验所需要的BMDCs。实验分为PBS阴性对照组、LDL组、ox-LDL组、HDL组、oxHDL组和LPS阳性对照组,采用动物实验和Transwell迁移系统分别观察各实验组中BMDCs在体内外的迁移能力。结果:获得的BMDCs CD86、MHCⅡ和CD11c的表达率明显升高,是实验所需的细胞;与相应的脂蛋白组相比,其氧化脂蛋白处理的BMDCs组有更多的细胞发生迁移。结论:氧化脂蛋白可促进C57BL/6J小鼠BMDCs发生迁移。
- 许增祥谢闵唐雅玲王双杨永宗
- 关键词：树突状细胞迁移动脉粥样硬化
- PCSK9 siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:研究前蛋白转换酶枯草溶菌素9(PCSK9)siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达的影响。方法:以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,应用Lipofectamine 2000转染不同浓度PCSK9 siRNA进THP-1源性巨噬细胞中,RT-PCR及Western blot筛选出最有效的siRNA,再转染入THP-1源性巨噬细胞,24 h后加入ox-LDL处理24 h,采用油红O染色检测细胞内脂质蓄积情况,RT-PCR分析细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达。结果:浓度为80 nmol/L的PCSK9 siRNA基因沉默效应最佳;油红O染色结果表明ox-LDL组细胞内脂质蓄积情况最为明显,PCSK9 siRNA转染组次之;PCSK9 siRNA转染组CD36 mRNA表达水平相对于ox-LDL组降低(P<0.05),而ox-LDL组和PCSK9 siRNA转染组SR-A1及SR-B1 mRNA表达无明显差异。结论:PCSK9可能通过影响摄取脂质的细胞膜表面受体CD36表达,参与动脉粥样硬化的发生发展。
- 唐志晗武春艳谢闵刘录山姜志胜
- 关键词：CD36
- pcsk9 siRNA对oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响被引量：25
- 2009年
- 为研究pcsk9基因沉默后对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响,用不同浓度oxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48h,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测pcsk9 mRNA、NARC-1蛋白的表达.应用Lipofectamine 2000转染3对pcsk9 siRNAs进THP-1源性巨噬细胞中,筛选出最有效的siRNA再转染入THP-1源性巨噬细胞,24h后加入oxLDL处理48h,Hoechst33258染色观察细胞评价细胞凋亡,流式细胞术计数检测细胞凋亡率.结果发现,75mg/LoxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48h后,Hoechst33258染色可见大量凋亡细胞.同时RT-PCR、Western blot检测发现,pcsk9 mRNA和NARC-1蛋白质表达量均随oxLDL浓度的增加而增加,75mg/LoxLDL组增加最明显.不同浓度siRNA转染THP-1源性巨噬细胞后,RT-PCR筛选出3对siRNAs的终浓度为80nmol/L均可出现明显的沉默效应.选取此浓度在蛋白质水平检测基因抑制情况,筛选出最有效的一对siRNA.将筛选出来的siRNA转染细胞24h后,再用oxLDL处理48h,Hoechst33258染色及流式细胞计数结果显示,转染siRNA组凋亡明显被抑制.结果表明,在本研究的浓度范围内,随着oxLDL浓度增加pcsk9的表达随之增加,同时,THP-1源性巨噬细胞凋亡也明显增加,75mg/LoxLDL最明显,pcsk9 mRNA和蛋白质的表达也在该浓度最高.提示pcsk9 siRNA能有效抑制pcsk9基因的表达,从而有效抑制由oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞的凋亡.
- 刘录山谢闵姜志胜杨琼潘利红武春艳唐志晗唐朝克危当恒王佐
- 关键词：凋亡小分子干扰RNA
