郭设平
- 作品数：42 被引量：158H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛分枝杆菌mpb64基因的克隆、鉴定及其表达被引量：3
- 2005年
- 以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增mpb64基因,纯化PCR产物并与 pDM18-T载体连接、转化,经酶切及核苷酸序列鉴定为正确后,酶切产物亚克隆到原核表达载体 pET30a(+)的KpnI／EcoRI位点,构建重组表达质粒pET30a+-mpb64,转化到大肠杆菌DE3内,以 IPTG进行诱导,终浓度为1mmol／L,诱导产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明,PCR方法成功扩增 出mpb64基因,核苷酸序列测定验证了其正确性,重组表达质粒表达的pET30a+-mpb64融合蛋白 相对分子量为30.4kDa,与实测相符。牛分枝杆菌pET30a+-mpb64的成功表达为牛结核病的诊断 及新型疫苗的研究奠定了基础。
- 张秀华刘思国宫强王春来王牟平彭永刚沈国顺郭洋郭设平
- 关键词：SDS-PAGE电泳核苷酸序列测定PCR产物IPTGT载体
- 牛分枝杆菌DNA疫苗免疫效果的研究
- 根据Gen Bank中发表的已知序列设计多对特异性引物,以牛分枝杆菌Vallee Ⅲ菌株基因组DNA为模板扩增Ag85B、esat-6、hsp65、mpb64、mpb70和mpb83基因片断,并通过SOE-PCR技术扩增...
- 宫强刘思国郭设平王春来王勇刘建东迟磊赵昆孔宪刚
- 文献传递
- 牛分枝杆菌三价串联抗原基因的原核表达及其免疫学活性研究
- 应用PCR方法从牛分枝杆菌vallee株基因组中扩增获得MPB70、MPB83和ESAT-6三个目的基因片段,利用基因搭桥和连接技术,将三基因串连于同一表达载体pET32(a)中,每个基因之间以连接肽相隔.利用大肠杆菌表...
- 郭设平刘思国张秀华王春来宫强郭洋邵美丽
- 关键词：牛分枝杆菌融合基因原核表达免疫学活性PCR方法
- 文献传递
- 牛分枝杆菌DNA疫苗免疫效果的研究
- 根据GenBank中发表的已知序列设计多对特异性引物,以牛分枝干菌ValleeⅢ菌株基因组DNA为模板扩增Ag85B、esat-6、hsp65、mpb64、mpb70和mpb83基因片断,并通过SOE-PCR技术扩增Ag...
- 宫强刘思国郭设平王春来王勇刘建东迟磊赵昆孔宪刚
- 文献传递
- 猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗诱导小鼠免疫保护效果的观察被引量：3
- 2006年
- 重组表达猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子基因:apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣ、apfa和omp,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP组合免疫小鼠作为试验I组,重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢr、OMPr、ApxⅣ和rApfa组合免疫小鼠作为试验Ⅱ组,PBS为对照组,分3次免疫小鼠,采用背部皮下多点注射,每次间隔2周,免疫剂量为0.2 mL/只,3免后1周分别以APP1型菌Shope 4074株(5×109cfu)和APP2型菌S1536株(5×1010cfu)进行攻毒试验。通过小鼠保护率与抗体效价的相关性研究、肺部病理变化及肺脏细菌的分布情况等指标进行综合评价。结果显示,试验Ⅰ组4种重组蛋白特异性抗体水平显著高于其他两组(P<0.05),对APP1型菌攻毒的保护率(9/10)明显高于试验Ⅱ组(5/10)和对照组(0/8),小鼠的免疫保护率与抗体效价之间存在显著正相关;且该组对APP2型菌攻毒的保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它两组(典型肺部损伤)。间接免疫荧光试验表明试验Ⅰ组对肺脏细菌的清除效果也明显优于其他两组。本试验揭示试验Ⅰ组对不同血清型APP攻击能够提供很好的交叉保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。
- 邵美丽刘思国王春来王勇宫强尹训南郭设平刘建东佟恒敏
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗免疫保护力间接免疫荧光试验病理变化
- 基于牛分枝杆菌新型重组蛋白的间接ELISA方法及其应用
- 牛结核病是一种严重危害奶牛业和人类健康的人兽共患传染病,控制和消灭牛结核病是消灭人结核病的前提和基础,而快速有效的诊断是控制牛结核病的关键。PPD皮试诊断方法作为OIE法定的方法具有无可比拟的优越性。但该方法不能有效区分...
- 郭设平刘思国王春来邵美丽宫强张秀华郭洋
- 关键词：牛结核病融合蛋白间接ELISA
- 文献传递
- 牛结核病病原生态学和流行病学研究
- 牛结核病是严重危害牛和多种动物的人畜共患病,本文将从牛结核病的病原分类、动物感染谱、传播途径、地区分布和流行情况以及影响疾病的流行因素等方面进行综述,旨在为牛结核病的研究和防制提供参考。
- 刘思国王春来郭设平张秀华郭洋邵美丽宫强
- 关键词：牛结核病病原生态学流行病学
- 文献传递
- 猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗在小鼠体内的免疫机制及其保护效力被引量：6
- 2007年
- 【目的】欲构建具有较好交叉免疫保护效果的多组分重组亚单位疫苗,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。【方法】利用分子克隆和重组表达技术获得了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rApxⅣ、rApfa和rOMP。并设立以灭活苗(5×108cfu)为试验Ⅰ组,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP为试验Ⅱ组,以rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rApxⅣ、rApfa和rOMP为试验Ⅲ组,以PBS为空白对照组。分3次免疫BALB/c小鼠,每次间隔2周,第3次免疫后的第7天以APP1型(5×109cfu)和APP2型(5×1010cfu)进行攻毒保护试验。【结果】试验Ⅱ组的4种抗体水平(ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和OMP)和脾淋巴细胞诱生IL-2水平显著高于其它3组(P<0.05),脾淋巴细胞增殖水平也一直高于其它3组(P>0.05)。且试验Ⅱ组对APP1型保护作用(9/10)明显高于试验I组(6/10)、试验Ⅲ组(5/10)和对照组(0/10),而对APP2型保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它3组(典型肺部损伤),显示出细胞免疫和体液免疫水平与免疫攻毒保护之间存在着正相关性。【结论】试验Ⅱ组通过激活体液免疫和细胞免疫,对不同血清型APP的攻击提供了很好的交叉保护作用。
- 邵美丽刘思国王春来王勇宫强尹训南郭设平刘建东佟恒敏
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗保护力淋巴细胞增殖
- 牛结核病的研究进展
- 牛结核病(bovine tuberculosis)是由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)所引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病,可通...
- 刘思国王春来郭设平宫强邵美丽
- 关键词：牛结核病病原学流行病学
- 文献传递
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅢA基因的克隆和表达
- 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放...
- 邵美丽刘思国王春来郭洋张秀华郭设平佟恒敏
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌
- 文献传递
