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一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法: 本发明公开了一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法，该试剂盒包括电动研磨器、溶液A(裂解液)、溶液B（DNA结合液）、溶液C（DNA洗涤液）、溶液D（DNA洗脱液）和DNA吸附柱。该发明的丝...; 潘力周斌何攀吕扬勇; 文献传递

RNA干扰技术降低黑曲霉细胞工厂的内源蛋白背景被引量：1: 2014年; 利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)改造黑曲霉细胞工厂,减少其内源蛋白表达背景。研究RNAi载体中反向互补片段特异性对RNA干扰的影响,同步干扰糖化酶基因glaA、淀粉酶基因amyA及蛋白酶调控因子基因prtT,并利用经RNA干扰改造的黑曲霉宿主SH-2表达异源脂肪酶基因tll。研究结果表明,不同长度的靶基因反向互补片段表现出不同程度的RNA干扰效应,载体pAMDS-RNAi-glaA388对糖化酶的干扰效果(94.40%)比载体pAMDS-RNAi-glaA784(70.60%)好;经三基因RNAi载体pAMDS-multi-RNAi改造的黑曲霉菌株中glaA、amyA、prtT的表达量仅为原始菌株的5.30%、17.10%和34.60%;利用经三基因RNAi载体改造的黑曲霉菌株表达脂肪酶tll,最高酶活达到97.27 U/mL,比利用原始菌株表达tll的最高酶活(73.05 U/mL)提高33.16%。因此,RNAi技术可以有效降低黑曲霉宿主内源蛋白的表达背景,有利于提高外源基因在黑曲霉细胞工厂中的表达水平和稳定性。; 银超王云艳何攀陈婧王斌潘力; 关键词：RNA干扰技术黑曲霉细胞工厂糖化酶淀粉酶

黑曲霉来源脯氨酰蛋白酶在无孢黑曲霉SH-2中表达的研究: 黑曲霉(Aspergillus niger)来源脯氨酰蛋白酶(prolyl endoprotease，PEP)是一种可以高效水解蛋白质或多肽脯氨酸残基羧基端肽键的蛋白酶。PEP可以用于提高啤酒澄清度、治疗乳糜泻疾病和降低...; 何攀; 关键词：高通量筛选基因敲除; 文献传递

一种高效改造丝状真菌的方法及改造的丝状真菌菌株: 本发明公开了一种高效改造丝状真菌的方法及改造的丝状真菌菌株，方法是向丝状真菌细胞中同时导入多基因干扰构建体和目的蛋白表达构建体，再通过筛选得到高效改造丝状真菌；其中多基因干扰构建体包含可以在丝状真菌细胞内起始转录的启动子...; 潘力何攀周斌吕扬勇王云艳; 文献传递

一种基因组DNA提取方法及试剂盒: 本发明公开了一种基因组DNA提取方法及试剂盒，该试剂盒包含研磨器、溶液A（裂解液）、溶液B（DNA结合液）、溶液C（DNA洗涤液）、溶液D（DNA洗脱液）和纯化柱。该发明的试剂盒，成本低廉，试剂成分简单，操作流程少，不仅...; 潘力周斌王斌何攀吕扬勇廖瑜玲李秀鹏; 文献传递

一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法: 本发明公开了一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法，该试剂盒包括电动研磨器、溶液A(裂解液)、溶液B（DNA结合液）、溶液C（DNA洗涤液）、溶液D（DNA洗脱液）和DNA吸附柱。该发明的丝...; 潘力周斌何攀吕扬勇; 文献传递

根癌农杆菌介导脂肪酶在无孢黑曲霉中的高效表达被引量：3: 2012年; 黑曲霉(Aspergillus niger)具有高效的蛋白表达和分泌能力.为实现异源蛋白在无孢黑曲霉中的高效重组表达,在优化遗传筛选标记的基础上,建立了根癌农杆菌介导的、以潮霉素抗性基因为筛选标记的黑曲霉转化体系.利用该体系介导米黑根毛霉脂肪酶(RML)转化黑曲霉SH-1,通过PCR鉴定、酶活检测、镍柱亲和层析及SDS-PAGE电泳检测等确定成功获得了RML的黑曲霉转化子,并通过发酵条件优化实现了RML的高效表达,对硝基苯酚比色法测得转化子酶活最高可达15 U/mL,是其在酵母中表达水平的10倍以上.; 潘力王云艳王斌何攀李俊星; 关键词：根癌农杆菌介导转化基因表达

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何攀