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一种诱导启动子NtPCS1P及其应用: 本发明公开了一种诱导启动子NtPCS1P及其应用，属于生物技术和植物基因工程领域，其核苷酸序列包括如下（a）或（b）或（c）的序列：（a）具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；或（b）与a）限定的核苷酸序列具有75...; 刘继恺吴婵娟高永峰唐运来; 文献传递

烟草NtMTPC4启动子的克隆与缺失分析被引量：1: 2017年; 组织特异性启动子是基因工程研究及实际应用中的重要工具。为了研究烟草NtMTPC4启动子的表达特性,采用实时荧光定量PCR方法分析烟草金属耐受蛋白C4(MTPC4)基因NtMTPC4在烟草不同组织中的表达模式,并利用PCR技术克隆得到NtMTPC4的上游启动子NtMTPC4-P。根据调控元件的分布对NtMTPC4-P进行不同程度的缺失,获得了NtMTPC4-P1、NtMTPC4-P2和NtMTPC4-P3缺失体;构建全长NtMTPC4-P和不同缺失体的植物表达载体,并通过花序浸染法转化拟南芥,对获得的转基因拟南芥进行GUS组织化学染色分析。结果表明,NtMTPC4基因的表达具有组织特异性,其在花中的表达量最高。NtMTPC4-P全长2 287 bp,含有CAAT-box、TATA-box、GTGANTG10和POLLEN1LELAT52等顺式作用元件和调控元件。GUS组织化学染色结果表明,全长启动子NtMTPC4-P和不同缺失体都能特异性地驱动GUS基因在转基因拟南芥花粉中的表达。本研究结果为通过基因工程技术在花粉中特异表达目的基因提供了新的调控元件。; 刘继恺张林高永峰吴婵娟唐运来; 关键词：烟草克隆

烟草NtGSH2基因的克隆及表达特性分析被引量：6: 2017年; 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是生物体内的非蛋白巯基类化合物,具有抗氧化、抗衰老和重金属解毒等重要的生理功能。本研究从烟草(Nicotiana tabacum L.)中克隆到谷胱甘肽合成酶基因NtGSH2,该基因编码555个氨基酸残基的蛋白质。氨基酸序列比对和进化树分析发现,NtGSH2与其他植物同源蛋白具有较高的一致性,且与枸杞(Lycium chinense)LcGSHS/LcGS和番茄(Solanum lycopersicum)SlGSH2归为一类,亲缘关系最近。组织表达模式分析表明,NtGSH2基因在烟草的根、茎、叶、花和种子中均表达,其中在花中的表达量最高,在种子中的表达量最低。实时荧光定量PCR检测表明,NtGSH2受CdCl_2和ZnCl_2诱导表达。将NtGSH2连接到原核表达载体pET32a上,转化获得含有NtGSH2基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌并成功表达目的蛋白。该研究结果为进一步分析NtGSH2基因功能及谷胱甘肽的生物合成提供了一定的理论依据。; 吴婵娟刘继恺冉巧黄才芝唐运来; 关键词：基因表达谷胱甘肽烟草 NT

NtMTP1基因过表达对增强烟草Zn胁迫耐受性的研究被引量：4: 2016年; 该研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,对烟草金属耐受蛋白1(MTP1)基因(NtMTP1)在烟草不同组织以及不同质量浓度ZnSO_4处理下的表达进行了分析;利用农杆菌介导法,将NtMTP1基因植物过表达载体pBI121-35S∶∶MTP1转化野生型烟草,筛选得到NtMTP1基因过表达的转基因烟草植株,并进行不同质量浓度ZnSO_4处理,检测NtMTP1基因过表达对烟草Zn胁迫耐受性的影响。结果表明:NtMTP1基因在烟草中呈现组织特异性表达,主要在花与叶中表达;NtMTP1基因的表达受到Zn^(2+)诱导,在400μmol/L ZnSO_4处理后,表达量达到最高,为对照组的3.81倍;3株转基因烟草植株中NtMTP1基因表达量分别为野生型的10.42、7.61和11.84倍,与野生型相比,过表达植株对Zn胁迫的耐受性显著增强。研究结果为阐明NtMTP1基因在烟草体内Zn^(2+)转运过程中的生物学功能提供了重要依据。; 冉巧吴婵娟高永峰唐运来黄才芝刘继恺; 关键词：烟草锌耐受性

烟草NtGSH2和NtPCS1基因的分子特征及其对Cd和Zn的响应: 高等植物主要通过络合作用和区室化作用进行重金属解毒，而谷胱甘肽合酶和植物络合素合酶是植物体重金属解毒途径的关键酶。本研究以烟草（Nicotiana tabacum）为材料，克隆烟草谷胱甘肽合酶基因（NtGSH2）和植物络...; 吴婵娟; 关键词：烟草生物学功能

一种诱导启动子NtPCS1P及其应用: 本发明公开了一种诱导启动子NtPCS1P及其应用，属于生物技术和植物基因工程领域，其核苷酸序列包括如下（a）或（b）或（c）的序列：（a）具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；或（b）与a）限定的核苷酸序列具有75...; 刘继恺吴婵娟高永峰唐运来; 文献传递

烟草氧化胁迫相关基因NtOSA1的克隆表达及亚细胞定位分析被引量：3: 2016年; 植物类蛋白激酶Abc1家族(activity of bc1complex)在植物生长发育及响应非生物胁迫中起着重要的作用。该研究通过将拟南芥AtOSA1蛋白氨基酸序列与烟草转录组数据进行比对,利用巢式PCR技术克隆得到1个烟草氧化胁迫相关Abc1家族基因NtOSA1,NtOSA1与拟南芥AtOSA1基因具有72.89%的一致性。NtOSA1基因开放阅读框长度为2 283bp,编码760个氨基酸,含有典型的ABC1结构域、一个激酶结构域、叶绿体定位信号肽和两个跨膜结构域。采用实时荧光定量PCR技术,对NtOSA1基因在烟草不同组织以及氧化胁迫、盐胁迫等处理下的表达分析表明:NtOSA1基因的表达具有组织特异性,主要在叶片中表达;NtOSA1基因在H2O2和NaCl处理后表达量上升,均在处理后6h达到最大值,分别为处理前的1.95和2.69倍。亚细胞定位结果表明,NtOSA1蛋白定位在细胞叶绿体上,与预测结果一致。研究表明,NtOSA1基因参与了烟草抗氧化胁迫和盐胁迫的响应。; 刘继恺高永峰吴婵娟张林陈彩霞; 关键词：烟草基因克隆亚细胞定位

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吴婵娟