孙明霞
- 作品数：8 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪圆环病毒病基因工程疫苗研究进展被引量：4
- 2022年
- 猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)在全球范围内广泛流行,各生长阶段的猪均易发该病,因其致病性高、传染性强、能够引起严重的免疫抑制等特点,严重阻滞了全球养猪业的健康发展。猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是导致PCVD的主要病原,其对环境的耐受力强,对氯仿不敏感,在56℃或70℃均能够存活一段时间。
- 高艳飞王尚辉王海伟孙明霞潘力肖培宇蔡雪辉涂亚斌
- 关键词：猪圆环病毒病猪圆环病毒2型基因工程疫苗主要病原PCV2耐受力
- 一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用
- 本发明属于抗病毒生物制品技术领域，公开了一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用。根据日本脑炎病毒EDIII结构域的loop肽中筛选确定一个三肽，其序列为：NSK。体外实验结果显示用此肽预处理BHK-21细胞，能明显干扰...
- 茅翔李晨于亚玲葛玲玲王月孙明霞
- 文献传递
- 细胞自噬在猪繁殖与呼吸综合征病毒体内体外感染中的研究
- 在本研究中，对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体内体外感染引起的宿主细胞的自噬反应进行了系统研究。在PRRSV感染的Marc-145细胞，病毒的复制可以显著提高自噬蛋白LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化，形成双层囊泡的自...
- 孙明霞黄丽王刚茅翔蔡雪辉
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒宿主细胞
- 文献传递
- 一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用
- 本发明属于抗病毒生物制品技术领域，公开了一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用。根据日本脑炎病毒EDIII结构域的loop肽中筛选确定一个三肽，其序列为：NSK。体外实验结果显示用此肽预处理BHK-21细胞，能明显干扰...
- 茅翔李晨于亚玲葛玲玲王月孙明霞
- 非洲猪瘟病毒p72蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：11
- 2021年
- 为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)的血清学检测方法,本研究根据ASFV Georgia2007/1株基因组合成其p72全长基因,并将其克隆至p GEX6p-1载体,构建重组质粒pGEX6p-1-p72并经酶切、PCR和测序鉴定正确后转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达后经SDS-PAGE和western blot鉴定,结果显示获得了可溶性表达且纯度较高的重组p72蛋白(rp72)。利用GST亲和纯化层析柱纯化,得到浓度为0.2 mg/mL的rp72。以rp72作为包被抗原,通过优化各反应条件建立检测猪血清中非洲猪瘟抗体的间接ELISA方法,结果显示,rp72最佳包被浓度为1.25μg/mL,封闭时间为37℃1 h;待检血清稀释度为1.100,孵育时间为37℃30 min;羊抗猪IgG-HRP孵育时间为37℃1 h。利用该方法检测280份阴性血清,确定其临界值为0.412。采用建立的间接ELISA抗体方法对PEDV、PRRSV、CSFV、PRV、TGEV、PPV、PCV、E.coli阳性猪血清进行检测,结果显示,除ASFV阳性对照为阳性外,其他病原阳性血清检测结果均为阴性,该方法特异性强;将非洲猪瘟抗体阳性猪血清2倍倍比稀释(1.100~1.6400)后,利用该方法进行检测,结果显示其检测阳性血清的稀释度为1.3200倍时OD_(450nm)值仍大于临界值,敏感性高于市售西班牙ASFV阻断ELISA试剂盒检测结果,本研究建立的方法敏感性较高;对该方法进行批内和批间重复性试验,结果显示批内和批间的变异系数均<10%,重复性良好。利用本研究建立的ASFV ELISA抗体检测方法(p72)对184份临床血清进行检测,结果显示该方法敏感性为100%,特异性为98.70%;与ASFV阻断ELISA抗体检测试剂盒方法总符合率为98.91%,kappa值为0.961。本研究首次基于rp72建立的非洲猪瘟抗体间接ELISA检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,为ASFV抗体检测提供了一种快速、精准、经济、高效的方法。
- 庚辛孙明霞王淑杰汤艳东高金源蔡雪辉
- 关键词：非洲猪瘟病毒ELISA
- 与自噬相关蛋白Becline 1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白的筛选与鉴定
- 2017年
- 为了对与自噬相关蛋白Becline 1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白进行筛选和鉴定,试验进行了pull-down、Shotgun质谱分析和免疫共沉淀(Co-IP)以及激光共聚焦检测。结果表明:病毒蛋白UL36与Becline 1之间可能存在相互作用关系;UL36-1与Becline 1蛋白之间具有稳定的相互作用关系,相互作用区域位于UL36的去泛素酶区域;UL36-1与Becline 1共定位于胞浆中。说明自噬相关蛋白Becline 1与猪伪狂犬病毒蛋白UL36的去泛素酶区域存在相互作用。
- 侯琳琳孙明霞王海明汤艳东刘永刚涂亚斌姜成刚王淑杰王刚蔡雪辉
- 关键词：猪伪狂犬病毒自噬蛋白相互作用
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒引起MARC-145细胞产生自噬对病毒复制的影响及其信号通路研究
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus，PRRSV)引起以妊娠母猪繁殖障碍以及仔猪和生长育肥猪呼吸道症状和高死亡率为特征的猪繁殖与呼吸综合征(...
- 孙明霞
- 关键词：自噬作用病毒复制
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒对仔猪骨髓感染及损伤的初步研究被引量：2
- 2014年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对断奶仔猪骨髓的损伤,本研究采用HP-PRRSV HuN4株接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性的健康断奶仔猪,并在病毒感染后10 d检测仔猪骨髓内病毒感染及细胞凋亡情况。PCR和间接免疫荧光试验结果显示HuN4株感染仔猪骨髓内存在病毒;流式细胞计数分析和TUNEL法检测结果显示病毒感染仔猪的骨髓内出现大量的凋亡细胞。本实验结果表明,HP-PRRSV能够感染仔猪骨髓,引起仔猪骨髓损伤并导致机体免疫抑制。本研究为进一步探索HP-PRRSV感染诱导仔猪中枢免疫器官的损伤机制奠定了基础。
- 李莉王刚刘永刚李爱东陶冶佟杰于颖涂亚斌王淑杰孙明霞姜成刚蔡雪辉
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒骨髓细胞凋亡
