范开吉
- 作品数：3 被引量：13H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人Fkbp19的多克隆抗体的制备
- 2010年
- 目的:制备针对人Fkbp19的多克隆抗体,为进一步研究Fkbp19基因的功能奠定基础。方法:利用鉴定正确的重组原核表达载体pET21a-Fkbp19,在大肠杆菌BL21-DE3中诱导表达,应用Ni-NTA亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白,并免疫家兔制备多克隆抗体,Western blot及免疫荧光的方法检测抗体对乳腺癌细胞中内源性Fkbp19蛋白的识别能力。结果:成功地在大肠杆菌中实现了His-Fkbp19融合蛋白的表达,经纯化后免疫家兔得到了高滴度的多克隆抗体,该抗体可以用Western blot的方法检测内源性Fkbp19蛋白。结论:所制备的多克隆抗体可以用于Fkbp19的Western blot检测。
- 范开吉张彦刘迺发孙强杨晓
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- Fkbp19基因的初步研究及抗体制备
- 我们利用芯片筛选的方式首先发现Fkbp19在HBx-p21转基因小鼠的HCC组织中是高表达的，并用Northern blot的方法进行了验证;而且在病人HCC组织中检测Fkbp19的表达发现，有75％的病例显示Fkbp1...
- 范开吉
- 关键词：抗体制备细胞生长蛋白合成
- 文献传递
- 心肌细胞过表达miR-27b导致小鼠发生心肌纤维化和线粒体损伤被引量：13
- 2012年
- 以往的miRNA芯片研究结果显示,miR-27b在人类心脏疾病标本和压力负荷引起的小鼠心肌肥厚模型中表达水平明显升高,提示其在心脏疾病发生过程中发挥了重要功能。为研究miR-27b在心脏组织中的功能,文章建立了在心肌细胞特异性-肌球蛋白重链(-MHC)启动子(5.5 kb)控制下过表达miR-27b的转基因小鼠。通过Real-time PCR检测,发现miR-27b前体和成熟体表达水平在转基因小鼠心脏组织中明显升高。miR-27b转基因小鼠不仅出现心肌肥厚,还表现出明显的心肌纤维化。进一步研究表明心肌纤维化的关键调节分子金属基质蛋白酶13(MMP13)是miR-27b的靶分子,在miR-27b转基因小鼠中MMP13显著下调,胶原分子I和III则显著上调。此外,还发现miR-27b转基因小鼠会出现心脏超微结构的损伤。以上研究结果表明,miR-27b可能通过抑制MMP13促进心肌纤维化。
- 侯宁王剑李振华曹阳范开吉杨晓
- 关键词：心肌细胞转基因小鼠心肌纤维化MMP13
