兰金苹 作品数:34 被引量:68 H指数:6 供职机构: 河北北方学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 转基因生物新品种培育专项 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 文化科学 更多>>
水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达 被引量:7 2012年 钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略,利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达,揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测,发现OsCBL-1、OsCBL-3、OsCBL-5、OsCBL-9和OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现其在不同反应间的表达也有区别,提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。 刘雨萌 兰金苹 曹英豪 刘钊 刘丽娟 李莉云 曹振伟 刘国振调控OsPR1a基因表达增强水稻抗白叶枯病的研究 窦世娟 刘国振 李莉云 杨明 兰金苹 魏健 郭亚璐 刘玉晴 燕高伟 成果以作物与病原菌互作为基础,研究水稻防御信号转导过程中,不直接识别病原物的下游病程相关基因OsPR1a的功能,以其找到非专化广谱抗病相关基因。该项目通过构建OsPR1a超表达和基因沉默转化载体,获得水稻转基因植株,积累...关键词:关键词:水稻 基因表达 过表达OsMPK17激酶蛋白质增强了水稻的耐旱性 被引量:4 2020年 促分裂原活化蛋白质激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)在真核生物中高度保守,在水稻逆境应答反应中也发挥着重要作用。本研究表达纯化了水稻OsMPK17蛋白质,制备了特异性抗体,对多种非生物逆境胁迫下的蛋白质样品进行免疫印迹分析,发现OsMPK17蛋白质在干旱胁迫下诱导表达,提示该蛋白质在干旱胁迫应答中发挥作用。对脱落酸和茉莉酸甲酯处理的离体叶片蛋白质分析发现,OsMPK17蛋白质表达丰度下降,提示该蛋白质的功能发挥可能受激素调控。为此,构建了过表达OsMPK17蛋白质的载体,转化水稻后筛选获得了OsMPK17蛋白质过表达的纯合株系。田间种植鉴定结果表明,转基因株系的株高变矮、穗长变短、结实率降低。种子萌发期拟旱(PEG-6000)处理条件下,过表达OsMPK17株系的种子长势明显比野生型好,根长与芽长均显著大于野生型。幼苗期失水试验表明,转基因植株的失水率低于野生型。在土培干旱胁迫后恢复浇水的试验中,过表达OsMPK17蛋白质的转基因水稻生长也好于野生型。综上,过表达OsMPK17蛋白质提高了水稻的耐旱性。本研究增进了对水稻OsMPK17基因功能的了解。 马金姣 兰金苹 张彤 陈悦 郭亚璐 郭亚璐 燕高伟 魏健 窦世娟 魏健 窦世娟 杨明关键词:水稻 免疫印迹 逆境胁迫 过表达 8个WRKY转录因子在水稻叶片生长和抗病过程中的表达分析 被引量:3 2014年 WRKY是植物体内最大的转录因子家族之一,其成员在植物生长发育和抗逆过程中发挥重要作用。为了解水稻WRKY的功能,本研究利用蛋白质免疫印迹(w estern blotting,WB)技术,检测了8个WRKY转录因子在水稻叶片生长和Xa21介导的抗白叶枯病过程中的表达丰度变化。结果表明:OsWRKY12、43、55和86在苗期表达量较低,随叶片的生长表达逐步增加;OsWRKY50和84在苗期叶片中的表达量相对较高,成熟期下降;未检测到OsWRKY40/64和52在叶片中的表达。在Xa21介导的白叶枯病抗性反应中,OsWRKY40/64、50和52受白叶枯病菌诱导表达,OsWRKY84受侵染后表达量上调,OsWRKY12、43、55和86在抗病过程中没有检测到表达丰度的变化。进一步比较这些转录因子在抗、感和对照(Mock)反应中的表达,发现抗、感反应间蛋白质的表达变化是相似的。研究结果提示:OsWRKY12、43、55和86可能在叶片正常生长中发挥作用;OsWRKY40/64和52可能在水稻-白叶枯病菌互作过程中发挥作用;OsWRKY50和84则在叶片生长和抗白叶枯病过程中都有一定的功能。 史佳楠 李莉云 徐文静 关明俐 李雪姣 牛东东 兰金苹 窦世娟 刘丽娟 刘国振关键词:WRKY 水稻 免疫印迹 白叶枯病 转录因子 三条新颖短肽筛选及抑菌作用的初报 2011年 【目的】为了发现新的农作物病原菌抗菌肽,人工设计并构建了大容量短肽文库,从中筛选并合成96条短肽用于鉴定其对农作物病原菌的抑菌活性。【方法】采用琼脂扩散法,对靶标菌—棉花枯萎病菌(Fusarium f.sp.vasinfecum)、棉花红腐病菌(Fusarium moniliforme)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)和马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)进行抑菌初筛,并测定了有抗菌作用短肽的最小抑菌浓度和抑菌持久性。【结果】得到了A6、D4和F10对上述四种病原真菌抑菌效果较强,抑菌时间较长的抗菌肽,通过与抗菌肽数据库氨基酸序列对比,未见这3条抗菌肽的同源序列。【结论】研制的3条短肽属于新颖抗菌肽,为防治农作物真菌病害提供了新的基因资源。 兰金苹 李莉云 汪洋 王宪云 刘丽娟 刘国振 成雄鹰关键词:病原真菌 抑菌作用 一种医用钛的阳极氧化装置 本实用新型提供了一种医用钛的阳极氧化装置,其包括筒状结构的反应容器、阴极接触端和阳极接触端,阴极接触端和阳极接触端的上端分别设置有阴极固定夹和阳极固定夹,阴极接触端下方设置有环状的铂环,铂环上设置有用于调节铂环直径的调节... 黄勇 王冰冰 张雪姣 兰金苹 乔海霞 马立飞文献传递 水稻病程相关蛋白质在逆境胁迫下的表达研究 被引量:6 2013年 植物病程相关(PR)基因一般在病原物侵染过程中受诱导发生转录上调.目前有证据提示植物PR基因在非生物逆境胁迫下也发生转录变化,但其蛋白质的表达变化情况还鲜有报道.为了解水稻PR蛋白质在逆境胁迫下的表达特征,本文采用免疫印迹技术(Western blotting,WB)调查了8个PR蛋白质在冷、热、旱、淹和盐等5种胁迫下的表达谱.结果表明:在冷胁迫下PR8表达上调,在热胁迫下PR1a、PR3、PR5和PR16表达下调;在旱胁迫下PR1a、PR2和PR8表达上调,而PR5和PR16表达下调,在淹胁迫下PR1、PR2和PR15表达上调,PR1a、PR3、PR5和PR8表达下调;在盐胁迫下PR2和PR3表达上调,而PR1a、PR5、PR8和PR16表达下调.另外,对这些PR基因的上游启动子区进行分析,发现存在与胁迫响应相关的调控元件,其中脱落酸反应元件(ABRE)、TC-rich repeats和HSE的出现频率较高.这些蛋白质表达数据进一步佐证了PR蛋白在逆境胁迫反应中发挥着重要且不尽相同的作用. 高庆华 曾祥然 贾霖 牛东东 李雪姣 关明俐 贾盟 兰金苹 窦世娟 李莉云 刘丽娟 刘国振关键词:水稻 免疫印迹 逆境胁迫 启动子 一种多功能病原生物染色装置 本实用新型涉及病原生物标本制作技术领域,具体为一种多功能病原生物染色装置,包括装置主体,所述装置主体包括底座、立柱和酒精灯主体,所述底座的顶端一侧固定连接有立柱,且底座的顶端设置有酒精灯主体,所述立柱的外部套设有套环,且... 武彩霞 兰金苹 杨翠军 王静 谢晓娟 王荷璐 刘进军 杨柳文献传递 转基因水稻中GUS蛋白质的检测及其表达特征 被引量:10 2014年 【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入大肠杆菌表达菌BL21中,IPTG诱导获得重组表达的GUS蛋白质,用HIS-tag beads纯化后作为免疫原免疫小鼠制备GUS蛋白质特异的抗体,通过免疫印迹分析筛选高特异性的单克隆抗体,用Broadford法对重组的GUS蛋白质进行定量,对不同浓度的GUS蛋白质进行免疫印迹分析,绘制检测GUS蛋白质的标准曲线,通过与标准曲线的比较对水稻叶片中GUS蛋白质进行定量分析。提取不同时期、不同部位的水稻总蛋白质,包括苗期的地上部、地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶枕、叶片上部、叶片中部和叶片下部,孕穗期的茎、穗轴、叶鞘、叶枕、叶片、幼穗(长度分别为1、2、10和20 cm),开花期的茎、穗轴、叶鞘、叶片、穗子,成熟期的茎、叶片、授粉后不同时期的种子(分别为授粉后10、20、30和40 d)、乳熟期的胚、胚乳和颖壳、成熟种子的全种子、胚、胚乳和颖壳以及不同时期的叶片和根部材料等。SDS-PAGE分离后用抗体检测其GUS蛋白质的丰度。【结果】筛选获得了高特异性的抗GUS单克隆抗体(编号为#27),用该抗体检测转基因水稻中及重组的GUS蛋白质均呈现特异条带,没有可见的背景信号,用本研究建立的免疫印迹方法对重组GUS蛋白质的检测下限约为4 ng,可检出转基因水稻单粒大米2.5%样品中(约0.6 mg)的GUS蛋白质。在不同时期的转基因水稻叶片中GUS蛋白质的表达丰度基本稳定,而在水稻根部的GUS丰度随生长急剧减少,5叶期根中的表达量不到3叶期的三分之一,到6叶期检测不到GUS蛋白质。在水稻苗期叶片中,GUS蛋白质约占鲜重的0.02‰。另外,除分蘖期以后的根部之 牛东东 郝育杰 荣瑞娟 韦汉福 兰金苹 史佳楠 魏健 李雪姣 杨烁 奚文辉 武鹏程 刘丽娟 吴琳 刘斯奇 尹长城 刘国振关键词:水稻 转基因植物 免疫印迹 一种防止脱针造成大量失血的治疗贴 本实用新型公开了一种防止脱针造成大量失血的治疗贴,包括治疗贴本体,治疗贴本体为无纺布,在无纺布接触出血部位的表面边缘粘贴双面胶,另一表面覆盖一层固体过氧化氢涂层区,在固体过氧化氢涂层区表面设置一层铁粉混合物区,铁粉混合物... 兰金苹 王雨诺 梁珈宁 刘帅 刘雁超 李佳蔓 徐雅男