徐智鹏
- 作品数:9 被引量:16H指数:3
- 供职机构:教育部更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:生物学理学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 人转铁蛋白偶联交联聚乙烯亚胺体外靶向转染肿瘤细胞被引量:3
- 2013年
- 为了提高聚乙烯亚胺(Polythylenimine,PEI)类载体对肿瘤细胞的靶向性同时降低其细胞毒性,先用1800DaPEI制备了交联低分子量PEI,然后将人转铁蛋白与之偶联,得到了新型肿瘤靶向性人转铁蛋白偶联交联聚乙烯亚胺基因载体(TCP)。对所得的TCP的理化特性经行了表征,并检测了其细胞毒性。采用TCP介导pGL-3和pEGFP分别对293T、HepG2和Hela细胞系进行体外转染实验。结果表明:TCP是一种低毒高效的基因载体,在肿瘤细胞中的转染效率显著增强,因为其二硫键可在细胞内还原降解,而且通过偶联的转铁蛋白配体与肿瘤细胞表达的转铁蛋白受体间的相互作用,可增强该载体对肿瘤细胞的转染效率和靶向性。
- 朱雄伟苏腾甲张佑红徐智鹏张凯刘玉兰
- 关键词:基因载体肿瘤靶向聚乙烯亚胺
- 粘质沙雷氏菌代谢产物灵菌红素的鉴定被引量:5
- 2012年
- 从柠檬酸厂糖化车间酸性土壤中筛选得到一株产红色素的粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)ZSG,菌株发酵液经酸性甲醇萃取、浓缩、硅胶柱层析、薄层色谱和柱色谱等分离纯化后,得到灵菌红素纯品,并采用紫外可见吸收光谱、红外光谱、液质联用分析对其结构进行了表征。
- 朱雄伟徐智鹏张楠苏腾甲陈杏洲邢彦君李卫朋
- 关键词:粘质沙雷氏菌灵菌红素紫外可见吸收光谱红外光谱液质联用
- 杆状病毒在气升式反应器中感染策略优化
- 2012年
- 为了得到杆状病毒感染悬浮昆虫细胞最佳条件,利用正交实验探讨了气升式反应器中感染复数(MOI)、感染时间(TOI)、细胞初始浓度(ICD)及体系中的溶氧值(DO)的相互作用关系以及对包涵体病毒(OV)和非包涵体病毒(BV)产量的影响.结果表明:最佳感染条件为MOI为0.1,TOI为细胞处于对数生长期晚期,ICD为2×105cell·mL-1,DO为10%,最大BV病毒滴度为7.943×106TCID50·mL-1,最大OV病毒滴度为1.68×106OVs·mL-1.
- 张佑红杨文危威徐智鹏苏腾甲
- 关键词:杆状病毒昆虫细胞
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒Gp64蛋白的优化表达被引量:1
- 2014年
- 研究培养基成份、pH值、接种量、诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒Gp64蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达水平的影响.SDS-PAGE电泳分析结果表明:在37℃的LB培养基中培养3h,用终浓度为0.3mmoL/L的IPTG于30℃诱导5h时表达水平最高.苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒Gp64重组蛋白在大肠杆菌中的优化表达为深度解析其在病毒感染过程中的功能奠定了基础.
- 徐智鹏张佑红张楠翟莉莉黄双成陈杏洲
- 关键词:苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒大肠杆菌
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒Gp64蛋白在酵母细胞中的表达
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)是多角体杆状病毒科的典型代表,能感染30多种鳞翅目昆虫,该病毒的基因组是由大小为134kb的环状单一双链DNA分子组成。感染宿主后的核型多角体病毒有两种表型:一种为包涵体病毒(O...
- 徐智鹏
- 关键词:银纹夜蛾核型多角体病毒抗体检测
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒Gp64基因的原核表达被引量:1
- 2015年
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒囊膜蛋白Gp64是杆状病毒感染宿主细胞的重要功能蛋白之一.通过Oligo6.0设计一对特异性引物,用于扩增Gp64基因的部分DNA片段,对聚合酶链式反应扩增得到的DNA片段进行纯化,并对纯化后的双酶切DNA片段与经同尾酶双酶切后的原核表达载体p ET28a进行连接;对捕获有重组质粒p ET28a-Gp64的大肠杆菌BL21(DE3)细胞进行异丙基硫代半乳糖苷诱导,通过SDS-PAGE对诱导产物进行电泳分析,结果表明扩增的目的片段获得了表达;采用电透析的方法纯化了该蛋白,为进一步制备抗Gp64蛋白抗体做准备.
- 张佑红熊瑶周锋徐智鹏谌颉陈杏洲
- 关键词:苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒纯化
- 自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体的纯化与检测被引量:1
- 2013年
- 为了提纯并鉴定自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体,探讨其在部分组织中的免疫定位.首先合成带谷胱甘肽转移酶标签的自噬基因融合蛋白,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,然后用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测抗体浓度,最后用免疫亲和纯化方法提纯抗血清中的多克隆抗体,酶联免疫吸附法检测抗体效价,蛋白印迹检测抗体特异性及在组织中的表达情况.结果表明:制备得到自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其质量浓度为每10μL含5μg,用酶联免疫吸附法显示此抗体效价及特异性较高,蛋白印迹显示蛋白大小为55kD左右.
- 朱雄伟张佑红徐智鹏苏腾甲熊瑶翟莉莉
- 关键词:多克隆抗体酶联免疫吸附法蛋白印迹聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 三种杀菌剂杀灭硫酸盐还原菌的研究被引量:1
- 2012年
- 从工厂循环冷却水水池中采集水样,利用最大可能计数法(MPN法)研究三种杀菌剂HL-501(二氧化氯)、HL-502(氯锭)、HL-507(活性溴)的不同浓度、不同杀菌时间对工业循环冷却水中的硫酸盐还原菌(Sulfate-Reducing Bacteria,SRB)的杀菌效果的影响,并对它们的杀菌情况进行对比。结果表明:与其他两种杀菌剂相比,HL-507是最有效的杀菌剂;当杀菌剂浓度为40 mg/L、杀菌1 h时,HL-507对SRB具有很好的杀菌效果。
- 朱雄伟苏腾甲李卫朋徐智鹏邢彦君
- 关键词:硫酸盐还原菌杀菌剂二氧化氯
- 一种果胶酶生产菌株的分离及其产酶条件优化被引量:3
- 2012年
- 为了从自然界中寻找一种果胶酶生产菌株,在果胶平板上经过筛选、复筛,分离出产果胶酶生产菌株,并将分离得到的菌株在摇瓶发酵培养、测定其酶活力,其发酵培养基的初始pH、最适温度、最适接种量及发酵周期进行初步研究.结果表明:经过筛选得到的产果胶酶菌株在发酵培养基的初始pH为7.0、培养温度为33℃、接种量为30%、发酵周期为56 h时,此菌株产酶的酶活力最高,优化后的条件大大提高了菌株的产酶能力.
- 苏腾甲朱雄伟张佑红刘芬刘婷婷徐智鹏李卫朋
- 关键词:纯化发酵产酶条件优化酶活力