蔡鹏丽
- 作品数:4 被引量:11H指数:1
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程更多>>
- 纤维素酶高产菌株的筛选方法
- 本发明提供了一种筛选纤维素酶高产菌株的方法,其中,该方法包括:将含有菌种的多个样品置于产纤维素酶的产酶培养基中培养3-7天,之后检测产生的酶的活性;选择产生的酶的活性较高的样品的富集培养物涂布在土豆汁固体培养基上培养直至...
- 陈树林蔡鹏丽马延和李寅杨勇
- 文献传递
- 麦角甾醇生物合成相关基因的高表达对细胞甾醇合成的影响
- 根据文献报道的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)甾醇C-22去饱和酶基因(ERG5)的核甘酸序列设计引物,利用酿酒酵母YSF-20的总DNA作为模板进行PCR扩增,获得ERG5基因的编码序列及其...
- 蔡鹏丽
- 关键词:酿酒酵母麦角甾醇生物合成大肠杆菌重组克隆
- 现代生物技术在提高微生物合成生物活性物质(麦角甾醇)中的应用
- 麦角甾醇是真菌细胞内各种膜结构的重要组成成分,与细胞内多种生物活性有关。而作为维生素D的前体,以及合成甾体类药物和抗癌药物的原料,麦角甾醇更是一种具有重大经济价值的生物活性物质。在生产上,麦角甾醇主要来源于酵母菌的发酵,...
- 何秀萍蔡鹏丽孟云霞郭雪娜张博润
- 关键词:麦角甾醇生物活性物质
- 文献传递
- 甾醇C-22去饱和酶高表达对酵母细胞麦角甾醇合成的影响被引量:11
- 2007年
- 通过PCR扩增克隆到酵母菌甾醇C-22去饱和酶基因(ERG5)的编码序列及其终止子序列,以大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体,以磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子为上游调控元件构建了酵母菌表达质粒pYPE5。以铜离子螯合蛋白基因CUP1替换ERG5基因内部序列获得ERG5破坏菌株YSE5,其中麦角甾醇的合成被阻断,而积累了甾醇中间体Ergosta-5,7-dien-3β-ol。表达质粒pYPE5转化破坏菌株后使细胞恢复了合成麦角甾醇的能力。说明表达质粒上的ERG5基因得到了功能性的表达。将表达质粒pYPE5转化酿酒酵母单倍体菌株YS58,通过营养缺陷互补筛选到重组菌株YS58(pYPE5)。对重组菌株、破坏菌株和互补菌株细胞甾醇组分和含量进行测定,发现重组菌株和互补菌株的麦角甾醇和总甾醇含量明显低于对照菌YS58(YEp352)。测定不同培养时间细胞的麦角甾醇含量,发现重组菌株的麦角甾醇含量始终低于对照菌YS58(YEp352)。可见,ERG5在酵母中的高表达导致细胞麦角甾醇含量降低。
- 蔡鹏丽何秀萍刘楠张博润
- 关键词:酿酒酵母麦角甾醇