袁章琴
- 作品数:10 被引量:13H指数:2
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 猪FLJ小干扰RNA表达载体的构建、鉴定法及用途
- 本发明公开了一种猪FLJ有效小干扰RNA表达载体的构建方法,包括以下步骤:1)、根据载体的信息和靶序列设计3对含9个核苷酸的loop环的siRNA引物,9个核苷酸为:TTCAAGAGA;2)、RNAi表达载体的构建:si...
- 汪以真伍婷袁章琴
- 猪新基因FAM134B基因对肌内脂肪沉积及其分子机理研究被引量:2
- 2012年
- 本试验通过猪肌内脂肪前体细胞培养模型的建立,结合RNAi技术和基因超表达技术等研究猪新基因pFAM134B调控肌内脂肪沉积的分子机制。首先通过RNAi技术,构建并筛选获得了FAM134B基因的有效siRNA表达载体fs1,经干扰条件优化。
- 袁章琴汪以真
- 关键词:肌内脂肪前体细胞脂肪分解脂肪细胞分化
- 从动物脂肪组织中提取用于基因芯片杂交总RNA的方法
- 本发明公开了一种从动物脂肪组织中提取用于基因芯片杂交的总RNA的方法,包括以下步骤:1)组织研磨和Trizol裂解;2)氯仿抽提:在裂解组织中加入氯仿进行RNA提取;3)氯仿再次抽提:取步骤2)所得的上清,加入氯仿抽提;...
- 伍婷汪以真袁章琴
- 猪皮下脂肪沉积关键基因筛选与鉴定
- 本研究旨在利用基因芯片技术筛选金华猪和长白猪皮下脂肪组织相对肌肉组织中特异性存在的差异表达基因,并对其进行鉴定,为后续研究猪脂肪在皮下脂肪组织中特异性分配沉积机制提供理论依据。选择90日龄的9头纯种金华猪和9头纯种长白猪...
- 伍婷袁章琴汪以真
- 关键词:皮下脂肪差异表达基因实时荧光定量PCR金华猪长白猪
- 文献传递
- 从动物脂肪组织中提取用于基因芯片杂交总RNA的方法
- 本发明公开了一种从动物脂肪组织中提取用于基因芯片杂交的总RNA的方法,包括以下步骤:1)、组织研磨和Trizol裂解;2)、氯仿抽提:在裂解组织中加入氯仿进行RNA提取;3)、氯仿再次抽提:取步骤2)所得的上清,加入氯仿...
- 伍婷汪以真袁章琴
- 文献传递
- 猪新基因FAM134B基因对肌内脂肪沉积及其分子机理研究
- 本试验通过猪肌内脂肪前体细胞培养模型的建立,结合RNAi技术和基因超表达技术等研究猪新基因pFAM134B调控肌内脂肪沉积的分子机制。首先通过RNAi技术,构建并筛选获得了FAM134B基因的有效siRNA表达载体fs1...
- 袁章琴汪以真
- 文献传递
- 猪FLJ小干扰RNA表达载体的构建、鉴定法及用途
- 本发明公开了一种猪FLJ有效小干扰RNA表达载体的构建方法,包括以下步骤:1)根据载体的信息和靶序列设计3对含9个核苷酸的loop环的siRNA引物,9个核苷酸为:TTCAAGAGA;2)RNAi表达载体的构建:siRN...
- 汪以真伍婷袁章琴
- 文献传递
- 猪新基因FAM134B的克隆及稳定干扰肌内前体脂肪细胞阳性克隆的筛选被引量:4
- 2013年
- 本实验旨在对猪新基因FAM134B基因进行全长克隆,尝试有效沉默FAM134B基因的干扰表达载体的构建和筛选,并筛选出沉默FAM134B基因的稳定阳性细胞。设计合成3对FAM134B基因的特异性发夹siRNA干扰片段,将其克隆入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默FAM134B基因的siRNA表达载体FAM134B-1、FAM134B-2和FAM134B-3,采用LipofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染肌内前体脂肪细胞,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果,并进一步用G418进行了稳定转染siRNA的肌内前体脂肪细胞筛选。结果表明:FAM134B基因的全长克隆成功,其siRNA表达载体构建正确,通过稳定筛选后,干扰效率较高的FAM134B-3表达载体和稳定转染FAM134B-3的细胞为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞,干扰效率达65.0%。本研究成功克隆了新基因FAM134B的全长以及构建了有效沉默FAM134B基因表达的干扰载体,并筛选出了稳定沉默的阳性肌内前体脂肪细胞,为进一步研究FAM134B基因在脂肪沉积中的功能研究奠定了基础。
- 袁章琴任阳汪以真
- 关键词:小干扰RNA质粒转染
- 猪脂肪沉积关键基因的筛选及新基因pFAM134B的功能鉴定
- 脂肪是评价猪肉品质的一个关键指标,其中肌内脂肪含量直接影响猪肉的色泽、风味、嫩度、持水力等肉质指标,而皮下脂肪也直接关系到经济价值与肉用品质,如何在降低皮下脂肪沉积的同时增加肌内脂肪含量成为肉质调控的关键问题。我国地方优...
- 袁章琴
- 关键词:脂肪沉积基因筛选