王莉
- 作品数:46 被引量:162H指数:6
- 供职机构:吉林大学白求恩医学院病理生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 新型CpG ODN与氢氧化铝联用作为乙肝疫苗佐剂能刺激IgG2a类抗体的产生
- 目的:寻找能增强乙肝疫苗刺激IgG2a类抗体产生、使机体处于Th1样免疫环境的新型乙肝疫苗佐剂.<br> 方法:选用自行设计的A、B、C型CpG ODN,与商品化重组乙肝疫苗(含Al(OH)3佐剂)混合后于...
- 丛中一包木胜万敏王莉李大鹏王丽颖于永利
- 关键词:乙型肝炎疫苗佐剂免疫应答反应动物模型
- 急性心肌梗死合并室间隔穿孔抢救成功1例体会被引量:1
- 2002年
- 王蓉侯小敏王莉
- 关键词:急性心肌梗死室间隔穿孔抢救病例报告
- 一种双抗体夹心ELISA检测热休克融合蛋白方法的建立
- 2005年
- 包木胜高新王莉李大鹏张培因于永利王丽颖
- 关键词:ELISA检测双抗体夹心特异性免疫应答MUC1VNTR表位肽
- 利用小鼠脾细胞上清抗病毒活性建立新型抑制性ODN的体外筛选方法
- 2009年
- 目的:通过检测小鼠脾细胞上清抗病毒活性,建立一种体外筛选小鼠敏感的新型抑制性寡聚脱氧核苷酸(ODN)的方法,为后续小鼠体内实验提供抑制性ODN的体外筛选方法。方法:将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组,收集不同浓度(0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00、16.00及32.00 mg.L-1)的CpG 2216刺激上清及CpG 2216作用小鼠脾细胞不同时间(3、6、12、24、48、72及96 h)的刺激上清,通过VSV病毒保护实验检测的A578评价各组上清的抗病毒活性,确定CpG 2216的最佳作用浓度、作用时间及刺激上清稀释度;再将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216+抑制性ODN(A151)组,同上确定A151的最佳作用浓度;将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216+抑制性ODN(MAT0106)组,应用上述优化的实验条件如各ODN剂量、作用时间等处理细胞后,收集刺激上清,采用VSV病毒保护实验,观察各抑制性ODN的抑制作用,以初步判定此方法的可行性。结果:筛选方法确定为:浓度为5×10^6·mL^-1的小鼠脾细胞铺于96孔圆底细胞培养板,加入CpG 2216至终浓度2 mg·L^-1和/或抑制性ODN至终浓度16 mg·L^-1,孵箱中培养24 h后收集上清,1∶4稀释上清后加入已贴壁的L929细胞板内,共孵育18 h后弃上清,加入VSV病毒液继续培养48 h。弃净上清后结晶紫染色、脱色并检测A578。此种筛选方法可以区别本室自行设计的抑制性ODN之间的抑制活性。结论:成功建立了抑制性ODN抑制小鼠脾细胞抗病毒活性的筛选方法,抑制性ODN的小鼠体外筛选方法的建立,为后续抑制性ODN在小鼠体内的生物学活性观察提供了体外筛选平台。
- 杨光孙然孙陆果万敏王莉吴秀丽胡大利王丽颖于永利
- 关键词:CPGODN小鼠近交BALBC脾细胞抗病毒活性
- AIRE基因在NOD鼠相关组织及T1DM病人PBMC中的表达
- 2006年
- 目的:通过检测AIRE(AutoImmueREgulator)基因在NOD(Nonobesediabetic)鼠相关组织及1型糖尿病(Type1diabetesmellitus,T1DM)病人PBMC中的表达,从分子水平上探讨AIRE在免疫耐受中的作用。方法:运用半定量RTPCR方法检测AIRE在BALB/c鼠(n=5)及NOD鼠(n=5)相关组织及T1DM病人的外周血单个核细胞(PBMC)中的表达情况,用βactin作为内参。结果:在BALB/c及NOD鼠中,Aire主要表达在免疫系统相关组织:胸腺、脾脏及淋巴结,另外在卵巢中也有表达,并且在NOD鼠中Aire含量与BALB/c鼠相比明显减少。部分T1DM病人PBMC上AIRE表达缺失。结论:AIRE基因的表达异常与T1DM的发病具有一定的相关性。
- 于春雷刘阳李一王少敏王莉
- 关键词:自身免疫调节因子NOD鼠外周血单个核细胞
- 释放可控转基因人毛囊间充质干细胞的制备及其在Ⅰ型糖尿病治疗中的应用
- <正>目的:制备释放可控转基因人毛囊间充质干细胞,探究其在糖尿病治疗中的作用,为糖尿病基因治疗提供理论依据。方法:构建释放可控重组人胰岛素基因慢病毒质粒。该质粒含有重组人胰岛素基因及FK506结合蛋白(FKPB12)。在...
- 吴春玲刘菲琳赵桂芳兰少伟白婷婷蒋义旭王莉寇俊娜郝德顺刘晋宇
- 文献传递
- 一种C型CpGODN对柯萨奇病毒感染小鼠的作用初探被引量:3
- 2009年
- 目的:研究自行设计的C型CpGODN(D-SL01)对柯萨奇病毒感染的潜在治疗作用。方法:用柯萨奇病毒体外感染人HeLa细胞的体外模型观察CpGODN刺激的人PBMC培养上清的抗病毒作用;利用柯萨奇病毒感染小鼠模型观察腹腔内给予CpGODN对小鼠体重及心肌病变的影响。结果:D-SL01刺激的人PBMC培养上清不仅能抵抗VSV感染VeroE6细胞,也能明显抵抗柯萨奇病毒对HeLa细胞的感染,其作用强度与A-型CpGODN2216相似。然而,当腹腔内连续给药6d后,D-SL01使柯萨奇病毒感染小鼠的质量下降及心肌病变程度与对照组小鼠相比加重。结论:研究结果提示:体内应用CpGODN的机制特别是用于病毒感染性疾病时,应该充分注意给药时机、途径及剂量。
- 杨亮孙晚晴王莉吴秀丽万敏于永利王丽颖
- 关键词:CPGODN柯萨奇病毒心肌炎
- 释放可控转基因人毛囊间充质干细胞的制备及其在Ⅰ型糖尿病治疗中的应用
- 目的:制备释放可控转基因人毛囊间充质干细胞,探究其在糖尿病治疗中的作用,为糖尿病基因治疗提供理论依据。方法:构建释放可控重组人胰岛素基因慢病毒质粒。该质粒含有重组人胰岛素基因及FK506结合蛋白(FKPB12)。在体外该...
- 吴春玲刘菲琳赵桂芳兰少伟白婷婷蒋义旭王莉寇俊娜郝德顺刘晋宇
- HSP65-PSA融合蛋白的体内外抗肿瘤活性研究被引量:1
- 2008年
- 目的:研究热休克蛋白65(HSP65)-前列腺特异性抗原融合蛋白在体外对人树突状细胞的活化作用以及在小鼠体内抑制PSA阳性肿瘤细胞生长的作用。方法:利用Westernblot方法对融合蛋白HSP65-PSA的特异性进行鉴定;利用共聚焦显微镜、流式细胞术(FCM)检测和斑点杂交的方法对PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞进行鉴定;用HSP65-PSA融合蛋白刺激来自于人外周血的未成熟树突状细胞,观察融合蛋白对树突状细胞的体外活化作用;用PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞种植C57BL/6小鼠,继而用HSP65-PSA融合蛋白来免疫小鼠以观察融合蛋白对PSA阳性B16肿瘤细胞生长的体内抑制作用。结果:Westernblot检测显示融合蛋白HSP65-PSA具有PSA蛋白特异性。共聚焦显微镜、FCM检测和斑点杂交结果均显示PcDNA3-GFP-PSA转染的B16细胞转染情况良好。体外细胞实验显示,将HSP65-PSA融合蛋白作用于人外周血树突状细胞后可以明显促进树突状细胞表面分子CD86的表达,其上调率为52.93%。动物体内实验显示,HSP65-PSA融合蛋白可以明显抑制PSA阳性B16肿瘤细胞在小鼠体内的生长。10μg蛋白免疫组的肿瘤体积(4.91±5.21)与对照组(10.56±6.10)相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HSP65-PSA融合蛋白可以在体外活化树突状细胞,在小鼠体内抑制PSA阳性B16肿瘤细胞的生长。HSP65-PSA融合蛋白可能具有应用于PSA阳性肿瘤的免疫治疗作用。
- 董博翰吴秀丽尹晓光王莉卫红飞孙陆果于永利王丽颖
- 关键词:免疫治疗肿瘤生长抑制
- 重组杆状病毒Bacmid-HER2胞外段基因的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:克隆人表皮生长因子受体2胞外段基因(HER2-ECD)的cDNA,构建重组杆状病毒Bacmid-HER2-ECD。方法:从Her2高表达的人乳腺癌细胞系SK-BR-3中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HER2ECD基因cDNA。利用T/A克隆连接法,首先构建pMD18-T-HER2-ECD重组质粒,并对基因进行测序。然后通过酶切连接构建供体质粒pFastBac-HER2-ECD。将供体质粒转化入DH10Bac菌与空Bacmid发生转座,得到重组Bacmid-HER2ECD。对重组Bacmid进行PCR法和点杂交鉴定。结果:pMD18-T-HER2ECD内插入片段序列与实际序列一致;pFastBac-HER2ECD经酶切鉴定与预期结果一致。重组Bacmid-HER2ECD通过PCR法能得到目的大小片段,并且能够与特异性探针发生结合。结论:成功地完成了HER2ECD基因的克隆和重组Bac-mid-HER2ECD的构建。
- 陈亚静魏映辉吴秀丽王莉王丽颖于永利
- 关键词:基因克隆昆虫杆状病毒表达系统