金辉
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 供职机构：海南医学院更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于UCP2信号研究丙泊酚对脑缺血/再灌注大鼠小胶质细胞极化的影响
- 2024年
- 目的探讨丙泊酚对脑缺血/再灌注(I/R)大鼠解耦联蛋白(UCP)2信号及小胶质细胞极化的影响。方法60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,丙泊酚低、中、高(5、15、25 mg/kg)剂量组,每组12只。采用Longa线栓法缺血2 h,再灌注24 h建立大鼠I/R模型,脑缺血期间腹腔注射丙泊酚治疗,再灌注24 h后评估大鼠神经功能。处死大鼠,取脑组织,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积;酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠脑脊液中炎性细胞因子含量;免疫组化染色分析大鼠小胶质细胞活化;实时荧光定量PCR检测M1/M2型小胶质细胞标志物mRNA含量;Western印迹测定UCP2、p-核转录因子(NF)-κB、NOD样受体热蛋白结构域样蛋白(NLRP)3含量。结果与假手术组相比,模型组神经功能评分、脑梗死体积、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量、离子钙结合接头分子(iba)1表达、促炎性M1表型小胶质细胞标志物mRNA、p-NF-κB、NLRP3含量均明显增加(P<0.05),但UCP2表达明显减少(P<0.05)。与模型组相比,丙泊酚低、中、高剂量组神经功能评分、脑梗死体积、IL-1β、IL-6、TNF-α含量,iba1表达、促炎性M1表型小胶质细胞标志物mRNA、p-NF-κB、NLRP3含量呈剂量依赖性减少(P<0.05),IL-10含量、抗炎性M2表型小胶质细胞标志物mRNA与UCP2含量呈剂量依赖性增加(P<0.05)。结论丙泊酚可通过调节UCP2表达,抑制小胶质细胞M1表型极化,促进M2表型极化,减少炎性细胞因子的释放与脑梗死体积,改善神经功能损伤。
- 肖志博符少川谢海金辉葛树胜
- 关键词：丙泊酚脑缺血再灌注解耦联蛋白2小胶质细胞
- 右美托咪定预处理激活PI3K/mTOR/ULK1通路发挥抗氧化应激和保护大鼠脑缺血/再灌注损伤的分子机制研究被引量：4
- 2022年
- 目的探索右美托咪定(Dex)预处理在缓解大鼠脑缺血/再灌注(CI/R)损伤中的作用及其分子机制。方法选取48只6~8w龄雄性SD大鼠,每组12只,随机分为假手术(Sham)组,大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组,Dex预处理(MCAO+Dex)组和ULK1抑制剂(SBI-0206965)联合Dex预处理(MCAO+Dex+SBI-0206965)组。TTC染色检测脑梗死体积并计算脑水肿指数;ELISA测定大鼠脑组织活性氧自由基(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blot检测大鼠脑组织自噬标志物LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin、p62的表达及PI3K/mTOR/ULK1通路p-PI3K、p-mTOR及p-ULK1的水平。结果与假手术(Sham)组相比,MCAO组大鼠脑梗死体积百分比、脑水肿指数、ROS和MDA水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值、Beclin的表达显著升高(P<0.01),SOD水平、p62、p-PI3K、p-mTOR及p-ULK1的水平显著下调(P<0.01)。与MCAO组相比,Dex组显著逆转了上述情况(P<0.01)。而SBI-0206965抵消了Dex预处理的保护作用,与Dex组相比,MCAO+Dex+SBI-0206965组大鼠脑梗死体积百分比和脑水肿指数显著升高(P<0.01),氧化应激水平及自噬标志物的表达显著上调(P<0.01),并下调SOD水平及抑制PI3K/mTOR/ULK1通路的活化(P<0.01)。结论Dex预处理是通过激活PI3K/mTOR/ULK1通路发挥抗氧化应激和保护大鼠脑缺血/再灌注损伤的,抑制ULK1的磷酸化,将抵消Dex的保护作用。
- 尹顺花金辉肖志博葛树胜吴小精李媛
- 七氟醚后处理联合右美托咪定对心肌缺血/再灌注损伤小鼠的心肌保护作用机制被引量：2
- 2023年
- 目的:探索七氟醚(Sev)后处理(Sev-postC)对右美托咪定(Dex)心肌保护的协同增效作用及其分子机制。方法:将20只31周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为Sham组、缺血/再灌注损伤模型(Model)组、Dex组、Dex+Sev-postC组,每组5只,采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色检测小鼠心肌损伤情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清肌钙蛋白I(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)、脑钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平。体外实验中将H9c2心肌细胞分为Control组、缺氧/复氧损伤模型(H/R)组、Dex组、Dex+Sev+siRNA NT组和Dex+Sev+巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)siRNA组,或Dex+Sev+pcDNA3.1组和Dex+Sev+pcDNA3.1-MIF组,转染MIF siRNA敲低MIF/转染pcDNA3.1-MIF过表达MIF。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测敲低或过表达MIF的效果,CCK-8法测定细胞存活能力;V-异硫氰酸荧光素(annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:小鼠在体实验HE染色与Masson染色结果显示,与Sham组比较,Model组小鼠心肌纤维断裂溶解,梗死处有炎性细胞浸润;心肌纤维化程度明显,胶原蛋白增加;与Model组比较,Dex组和Dex+Sev-postC组心肌损伤明显改善。ELISA检测结果显示,与Sham组比较,Model组血清cTnI、LDH、BNP和CK-MB水平均明显上升(P<0.01);与Model组比较,Dex组、Dex+Sev-postC组血清cTnI、LDH、BNP和CK-MB水平均明显下调(P<0.05或P<0.01);与Dex组比较,Dex+Sev-postC组下调更明显(P<0.05或P<0.01)。体外细胞实验结果显示,Western Blot结果证明在H9c2细胞中成功敲低或过表达MIF。与Control组比较,H/R组细胞存活能力明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与H/R组比较,Dex组和Dex+Sev+MIF siRNA组细胞存活能力明显上升(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);Dex+Sev+siRNA NT组、Dex+Sev+pcDNA3.1组和Dex+Sev+pcDNA3.1-MIF组心肌细胞存活能力明显上升(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01),且与Dex+Sev+siRNA NT组比较,D
- 金辉肖志博葛树胜吴小精尹顺花李媛
- 关键词：七氟醚巨噬细胞迁移抑制因子
- 超声引导下QLB复合气管插管全麻对于老年患者TEP腹股沟疝无张力修补术影响因素分析被引量：14
- 2021年
- 目的:探讨与分析超声引导下腰方肌阻滞(quadratus lumborum block,QLB)复合气管插管全麻对于老年患者腹腔镜下全腹膜外(totally extraperitoneal prosthetic,TEP)腹股沟疝无张力修补术的影响,以促进该方法的临床使用。方法:2014年9月到2020年6月选择在本院诊治的腹股沟疝老年患者180例,根据随机数字表法分为QLB组与对照组各90例。所有患者都给予腹腔镜下全腹膜外腹股沟疝无张力修补术,对照组给予气管插管全麻,QLB组在对照组麻醉的基础上给予超声引导下QLB,记录两组镇痛与麻醉效果。结果:两组的术中出血量、手术时间等对比差异无统计学意义(P>0.05),QLB组的术后住院时间、术后胃肠功能恢复时间、术后下床活动时间显著短于对照组(P<0.05)。与术后12 h对比,两组术后24 h与36 h的疼痛VAS评分均降低(P<0.05),且QLB组术后12 h、24 h与36 h的疼痛VAS评分都显著低于对照组(P<0.05)。QLB组术后7 d的血肿、呼吸抑制、脏器损伤、腹股沟区包块等并发症发生率为8.9%,显著低于对照组的21.1%(P<0.05)。QLB组的瑞芬太尼用量、术后48 h内有效按压自控静脉镇痛泵次数、自控静脉镇痛泵累计用量都显著少于对照组(P<0.05)。结论:超声引导下QLB复合气管插管全麻在老年患者腹腔镜下全腹膜外腹股沟疝无张力修补术中的应用能提高镇痛与麻醉效果,减少术后并发症的发生,有利于促进患者康复。
- 肖琼瑶王世禄李媛张娇金辉
- 关键词：超声引导气管插管全麻
- 右美托咪定联合七氟醚对糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：1
- 2022年
- 目的探讨右美托咪定(Dex)联合七氟醚-后处理(Sev-postC)对糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的保护作用及其分子机制。方法体外实验:分别在低糖(LG)和高糖(HG)条件下培养H9c2心肌细胞,并诱导缺氧/复氧(H/R)损伤模型,给予细胞七氟醚(Sev)或七氟醚联合右美托咪定(Sev+Dex)处理。CCK-8检测心肌细胞存活能力;ELISA检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的水平;Western blot检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达。在体动物实验:分别使用健康小鼠和2型糖尿病小鼠构建MI/RI模型,并给予小鼠Sev-postC或Sev-postC+Dex治疗。Western blot检测小鼠心脏组织中HIF-1α和MIF的表达;HE染色检测小鼠心肌组织损伤情况;ELISA检测小鼠血清LDH和CK-MB的水平,以及心肌组织SOD和MDA的水平。结果细胞实验结果显示,与LG-Control组相比,LG-H/R组细胞存活能力显著降低(P<0.01);与LG-H/R组相比,LG-Sev组细胞存活能力显著升高(P<0.01);与HG-Control组相比,HG-H/R组细胞存活能力显著降低(P<0.01);与HG-H/R组相比,HG-Sev组细胞存活能力无显著变化(P>0.05),HG-Sev+Dex组细胞存活能力则显著升高(P<0.01)。与HG-H/R组相比,HG-Sev组LDH、CK-MB、SOD和MDA水平无显著变化(P>0.05),HG-Sev+Dex组上述4项指标均具有显著变化(P<0.01)。与HG-H/R组相比,HG-Sev组HIF-1α和MIF的表达无显著变化(P>0.05),HG-Sev+Dex组HIF-1α的表达显著降低(P<0.01),MIF的表达显著升高(P<0.01)。小鼠模型研究结果显示,在糖尿病小鼠中,与DM-MI/RI组相比,DM-Sev-postC组小鼠HIF-1α和MIF的表达无显著变化(P>0.05),而DM-Sev-postC+Dex组小鼠HIF-1α表达显著降低(P<0.01),MIF的表达显著升高(P<0.01)。HE染色结果显示,与DM-MI/RI组相比,DM-Sev-postC组小鼠心肌损伤无明显缓解,而DM-Sev-postC+Dex组小鼠心肌损伤缓解十分显著。与DM-MI/RI组相比,仅DM-Sev-postC+Dex组
- 金辉肖志博葛树胜吴小精尹顺花李媛
- 关键词：糖尿病
- 皮肤温度变化对截瘫患者下肢神经阻滞效果的评估价值被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨皮肤温度(皮温)变化对感觉缺失区域神经阻滞效果的评估价值。方法:选择择期行下肢肌痉挛松解手术的截瘫患者58例,在手术侧行超声引导下单侧股神经+坐骨神经阻滞,股神经周围注射2.5 mg/L罗哌卡因15 mL,坐骨神经周围注射5.0 mg/L罗哌卡因10 mL。随机在两侧下肢股神经支配的股内侧肌区域、隐神经支配的小腿内侧区域、坐骨神经支配的股二头肌区域、小腿腓肠肌区域皮肤上各取一个测量点,记录注药前、注药后5 min的皮温。阻滞侧和非阻滞侧皮温变化值(T_阻和T_非)为注药前后皮温的差值,校准的阻滞侧皮温变化值(T_校)=T_阻-T_非。结果:两侧各有232个测量点,T_阻=-(1.8±0.5)℃,T_非=-(0.5±0.3)℃,T_校=-(1.2±0.6)℃。其中阻滞侧202个点神经阻滞效果佳,30个点神经阻滞效果差。T_校与神经阻滞效果呈较强的负相关关系(r_S=-0.758,95%CI=-0.790^-0.572)。以T_校对神经阻滞效果绘制ROC,则曲线下面积为0.912(95%CI=0.806~0.973),诊断临界值为-1.2℃,此时的诊断敏感度达83.3%,特异度达81.7%。结论:皮温变化是评估皮肤感觉缺失情况下神经阻滞效果的有价值指标。
- 王世禄谢海马乃全周期陈立符少川顾颖红金辉肖志博
- 关键词：股神经阻滞坐骨神经阻滞皮肤温度截瘫
- 益母草碱基由CaMKⅡ/Cx36信号对七氟醚诱导幼鼠突触可塑性的改善作用
- 2022年
- 目的探讨益母草碱对七氟醚麻醉幼鼠海马神经元突触可塑性和认知功能损伤的影响及其可能的机制。方法60只7 d龄幼鼠,随机分为对照组,七氟醚组,益母草碱-低、中、高剂量组,每组12只。非对照组幼鼠以3%七氟醚麻醉6 h后,取益母草碱组幼鼠分别给予2.5、5、10 mg/kg益母草碱溶液。连续治疗28 d,采用Morris水迷宫评价各组幼鼠学习记忆能力;采用高尔基染色测定海马神经元树突棘状态;采用电生理测试评估海马区长时程电位增强;采用Western blotting测定各组幼鼠海马中CaMKⅡ、Cx36蛋白表达。结果与对照组相比,七氟醚组幼鼠逃避潜伏期明显增加,穿越平台次数与第Ⅰ象限停留时间明显减少(P<0.05);与此同时,海马神经元树突棘长度与密度降低,长时程电位水平降低,p-CaMKⅡ、Cx36蛋白表达明显减少(P<0.05)。与七氟醚组相比,益母草碱-H组水迷宫逃避潜伏期明显下降,穿越平台次数与第Ⅰ象限停留时间明显增加(P<0.05);此外,益母草碱-H组树突棘长度和密度明显增加,长时程电位水平明显上调,p-CaMKⅡ、Cx36蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论益母草碱能通过上调CaMKⅡ/Cx36表达和增加树突棘长度与密度,逆转七氟醚诱导幼鼠突触可塑性降低,提高幼鼠学习记忆能力。
- 肖志博金辉谢海符少川葛树胜
- 关键词：益母草碱七氟醚幼鼠突触可塑性
- 丙泊酚基于SIRT1/Foxo1信号缓解脑缺血再灌注造成血脑屏障损伤被引量：9
- 2022年
- 目的:探究丙泊酚是否通过激活SIRT1/Foxo1信号通路对脑缺血再灌注损伤诱导血脑屏障破坏发挥保护作用。方法:48只大鼠随机分为假手术组(Sham组),脑缺血再灌注组(I/R组),脑缺血再灌注+丙泊酚组(I/R+Propofol组),脑缺血再灌注+丙泊酚+SIRT1抑制剂EX527组(I/R+Propofol+EX527组),每组各12只。通过大鼠脑缺血120min,再灌注24h建立脑缺血再灌注模型。EX527(5mg/kg)于手术前通过蛛网膜下腔注射。丙泊酚(10mg/kg)于脑缺血过程中,尾静脉注射。再灌注24h后评估神经功能、检测脑梗死体积、血脑屏障通透性、炎性细胞因子含量、紧密连接蛋白和SIRT1/Foxo1信号相关蛋白表达情况,并比较各组间的差异。结果:与Sham组相比,I/R组神经功能障碍评分升高,脑梗死体积增加,脑组织中伊文思蓝透过率增加。与I/R组相比,I/R+Propofol组神经功能障碍评分降低,脑梗死体积减少,伊文思蓝透过率降低,脑脊液中IL-1β、IL-6含量明显减少,缺血区基底层组织中SIRT1表达增加,Ac-Foxo1、NLRP3表达减少,紧密连接蛋白Claudin-1,Occludin与ZO-1表达增加(均P<0.05)。而I/R+Propofol+EX527组上述丙泊酚脑保护作用均减弱(P<0.05)。结论:丙泊酚对脑缺血再灌注过程中血脑屏障的完整性具有保护作用,其机制可能是其能激活SIRT1/Foxo1信号通路,抑制炎症反应,增加紧密连接蛋白表达。
- 肖志博谢海金辉王健陈锐
- 关键词：丙泊酚脑缺血再灌注血脑屏障SIRT1FOXO1
- Dex基于CREB/PGC-1α信号通路调控星形胶质细胞线粒体功能在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用
- 2023年
- 目的 探究右美托咪定(Dex)基于CREB/PGC-1 α信号通路调控星形胶质细胞线粒体功能在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 采用改良的Zen-land法制作大鼠脑缺血再灌注损伤(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,分别在造模后评估假手术(Sham)组、脑缺血再灌注模型(MCAO)组,脑缺血再灌注加药(MCAO+Dex)组大鼠神经功能损伤,脑梗死面积,实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白印迹检测环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)的mRNA及蛋白表达;透射电子显微镜检测线粒体形态,免疫荧光法检测星形胶质细胞活性氧物质(ROS)及细胞凋亡。制备氧糖剥夺/复氧(OGD/R)星形胶质细胞模型,分为对照组(Control)、溶剂组(OGD/R-Dex0)、低剂量组(OGD/R-Dex-L)、高剂量组(OGD/R-Dex-H),qPCR检测CREB、PGC-lα的mRNA水平,免疫荧光和WB检测CREB、PGC-1α的蛋白表达。在OGD/R星形胶质细胞模型Dex处理的基础上过表达CREB或PGC-1 α,分为过表达对照组(OE-NC)、过表达CREB组(OE-CREB)、过表达PGC-1 α组(OE-PGC-1 α),流式细胞术检测细胞凋亡,探针法检测线粒体ROS水平。结果Dex预处理改善MCAO大鼠神经功能评分,减少脑梗死面积,抑制CREB、PGC-1 α表达,改善线粒体形态,抑制细胞凋亡和星形胶质细胞ROS水平。Dex可抑制OGD/R星形胶质细胞中CREB、PGC-1α的mRNA及蛋白表达水平及线粒体ROS水平。过表达CREB和PGC-1α逆转由Dex诱发的星形胶质细胞ROS水平和细胞凋亡抑制。结论 Dex可下调CREB和PGC-1 α表达,进而抑制星形胶质细胞ROS水平和细胞凋亡,从而在大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥保护功能。
- 葛树胜李媛金辉谢海
- 关键词：脑缺血再灌注星形胶质细胞线粒体功能
- 利多卡因基于TASK-3通道诱导老龄小鼠认知功能障碍研究
- 2023年
- 目的探究TASK-3通道在利多卡因(Lidoc)诱导老龄小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法野生型(WT)小鼠与TASK-3敲除(TASK-3^(-/-))小鼠各20只,随机分为WT组,WT+Lidoc组,TASK-3^(-/-)组,TASK-3^(-/-)+Lidoc组。取WT+Lidoc组,TASK-3^(-/-)+Lidoc组小鼠每天皮下注射40mg·kg^(-1) Lidoc麻醉,6h后分别开展水迷宫实验或者跳台实验,共7d。取小鼠脑组织分别开展免疫组化染色、苏木精-伊红染色、TUNEL染色、树突棘染色、电生理测试。结果与WT组相比,WT+Lidoc组小鼠水迷宫中逃避潜伏期明显增加,首次到达平台时间增加,穿越平台次数与平台象限停留时间明显减少,跳台潜伏期与跳台错误次数明显增加。然而,与TASK-3^(-/-)组相比,TASK-3^(-/-)+Lidoc组小鼠水迷宫实验与跳台时间指标没有明显改变。此外,与WT组相比,WT+Lidoc组小鼠脑组织中Caspase-3表达明显增加,神经元状态明显损伤,TUNEL阳性细胞数明显增加。与此同时,Lidoc造成小鼠海马神经元树突棘密度明显减少,fEPSP斜率明显减少。然而,与TASK-3^(-/-)组相比,TASK-3^(-/-)+Lidoc组小鼠Caspase-3表达并没有明显改变,神经元状态正常且TUNEL阳性细胞数没有变化。与此同时,小鼠神经元树突棘状态和fEPSP斜率没有影响。结论Lidoc诱导老龄小鼠POCD可能是激活TASK-3通道造成Caspase-3表达增加实现。
- 葛树胜李媛金辉谢海
- 关键词：利多卡因术后认知功能障碍半胱氨酸蛋白酶-3
