谢荣辉 作品数:29 被引量:57 H指数:5 供职机构: 浙江省动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 浙江省公益性技术应用研究计划项目 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
屠宰场消毒效果评价方法探索 被引量:1 2023年 液体消毒剂消毒效果的生物学检测及评价通常需加入已知量的生物指示剂如细菌、真菌和病毒抗原等,并通过测定消毒剂在使用浓度下作用一定时间后的杀灭率来判定其消毒效果。这种方法须在严格的实验室环境控制条件下进行才能获得较理想的结果。而在屠宰场这种开放的环境下,对其进行现场消毒效果测定和评价方法尚未见报导。本文试图通过对屠宰场日常消毒工作中,对特定位点消毒前与消毒后细菌总数的测定,直观分析其消毒效果,在屠宰场消毒效果评价方法学上是一次新的尝试。 倪柏锋 虞一聪 谢荣辉 王雅婷 赵灵燕 徐辉关键词:病毒抗原 日常消毒 杀灭率 生物指示剂 屠宰场 猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR方法的建立和应用 被引量:3 2023年 根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性。结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒核酸,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、日本脑炎病毒、猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪博卡病毒无交叉反应。猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒的最低检测限均为10 copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于3%。用建立的双重荧光定量PCR方法对87份猪组织样品进行检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型的阳性率分别为17.24%和24.14%。上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异、敏感、稳定和快速的优点,可用于猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒鉴别诊断和流行病学调查。 赵灵燕 张璐 安慧婷 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 刘霞 孙仁杰 徐辉 谢荣辉关键词:猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2,3,4型三重荧光定量PCR检测方法的建立和应用 被引量:5 2022年 为建立同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、3型(PCV3)和4型(PCV4)的方法,根据GenBank中的PCV2、PCV3和PCV4基因保守序列设计引物和探针,通过反应体系优化后,建立同时检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性、稳定性、与普通PCR方法的一致性进行评价。结果显示,建立的方法可特异性检测PCV2、PCV3和PCV4,与猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒1型、猪伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应产生。批间与批内重复性试验变异系数系数均小于3%。对83份猪组织样品进行检测,其中PCV2、PCV3和PCV4阳性率分别为68.67%,28.92%,20.48%。结果表明建立的三重荧光定量PCR方法具有敏感度高、特异性强和稳定性好的优点,可用于PCV2,PCV3,PCV4型的流行病学调查和鉴别诊断。 谢荣辉 王雅婷 安慧婷 黄靖 张红丽 刘霞 冯肖肖 陈伟良 董建斐 张璐 徐辉 赵灵燕关键词:猪圆环病毒2型 基于液相芯片技术的7种猪繁殖障碍疾病相关病毒检测用引物探针、试剂盒及其应用 本发明提供了基于液相芯片技术的7种猪繁殖障碍疾病相关病毒检测用引物探针组、试剂盒及其应用,属于病毒检测技术领域。本发明提供的引物探针组,包括猪瘟病毒检测引物探针、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒检测引物探针、猪圆环病毒2型检... 谢荣辉 赵灵燕 徐辉 王雅婷 黄靖 孙冰冰 张红丽 董建斐 刘霞 冯肖肖 张璐 安慧婷 薛银 柴娟 虞一聪文献传递 运猪车辆消毒效果的检测分析 2022年 随机抽取浙江省2家洗消中心,每家洗消中心随机抽检5辆运猪车辆,每个车辆采集检测车轮、挡泥板、车厢内壁、车厢外壁、驾驶室等7个部位,车辆表面消毒前后,用拭子样本测定其细菌总数,测算细菌杀灭率和消毒有效率。结果表明:洗消中心A消毒有效率为23.08%,洗消中心B消毒有效率为65.38%。 章杭建 倪柏锋 虞一聪 谢荣辉 赵灵燕 徐辉关键词:车辆 消毒 猪圆环病毒3型与宿主相互作用机制研究进展 被引量:2 2023年 猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)从2015年发现至今已在全世界多个国家和地区的养猪业被检出,是重要的新发猪病病原体。目前有关PCV3致病机制的研究有限,大部分集中于PCV3的流行病学调查、基因组演化分析和检测方法建立。猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)与宿主之间关系紧密且复杂,二者的相互作用决定宿主细胞的命运和病毒的传播与存活。部分学者通过瞬转表达系统、临床分离和反向遗传学技术从病毒组分或全病毒水平对PCV3与宿主相互作用展开研究。本文系统阐述宿主细胞对PCV3感染的应答机制、PCV3-宿主蛋白的相互作用,以及PCV3生命周期的研究结果,将有助于进一步了解PCV3及其致病机制。 孙仁杰 单颖 单颖 王雅婷 谢荣辉 谢荣辉 张传亮 赵灵燕 李肖梁浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析 被引量:5 2019年 为了解2014-2016年浙江地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF 5基因变异情况,试验通过RT-PCR方法对从浙江省各地区采集的PRRSV阳性病料进行ORF 5基因扩增,应用DNAStar和Mega 5.1软件对所测序列进行同源性和遗传变异分析。结果显示,54株2014-2016年浙江分离株ORF5序列之间核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.1%~100%和80.6%~100%,与经典株VR2332核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.8%~90.4%和81.6%~90.0%,与高致病PRRSV毒株JXA1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.5%~99.5%和83.1%~99.0%。系统进化分析表明,54个毒株均为美洲型毒株,属于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ3个不同的基因亚型,其中基因亚型Ⅲ和Ⅳ毒株是浙江省近年来新出现的毒株。氨基酸序列分析结果显示,54个毒株在GP5蛋白的信号肽区域、非中和抗体表位的氨基酸序列变异较大,而在中和表位氨基酸序列变异较小。本研究结果表明,浙江地区PRRSV流行出现了新形势,多种基因亚型共同存在,其中以基因亚型Ⅰ毒株为主。 王雅婷 柴娟 张红丽 刘霞 虞一聪 倪柏锋 赵灵燕 徐辉 谢荣辉关键词:ORF 浙江省兽医实验室的生物安全管理现状与建议 被引量:4 2017年 兽医实验室生物安全不仅事关重大动物疫病防控,也关系到实验室工作人员、公众健康及公共卫生安全。实验室生物安全管理作为实验室基础设施建设中的一个重要环节,必须提高实验室生物安全管理水平和人员生物安全防护意识,杜绝生物安全事故、实验室内部感染事故的发生。 吴贇竑 孙冰冰 柴娟 谢荣辉关键词:生物安全管理 兽医实验室 病原微生物 公共卫生安全 重大动物疫病 生物安全实验室 2022年浙江省PRRSV流行毒株ORF5基因序列遗传进化分析 被引量:2 2023年 为了解2022年浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)流行毒株的基因型及变异情况,采用RT-PCR方法,对浙江省不同地区收集的37份PRRSV阳性病料组织进行ORF5基因扩增,应用DNAstar和Mega7软件进行同源性和遗传变异分析。结果显示:37份阳性样品的ORF5基因核苷酸和编码氨基酸之间的同源性分别为82.1%~100%和81.1%~100%;阳性样品的ORF5基因与高致病性PRRSV毒株JXA1、经典PRRSV毒株VR2332、国内早期PRRSV毒株CH1-a、NADC30类毒株、NADC34类毒株和新型PRRSV毒株QYYZ的核苷酸同源性分别为84.1%~98.7%、83.9%~99.7%、85.2%~95.0%、85.3%~94.0%、86.4%~96.2%和82.8%~85.1%,编码氨基酸同源性分别为83.6%~99.5%、82.6%~99.0%、84.1%~93.5%、83.1%~94.5%、85.6%~95.5%和81.1%~86.6%。37份阳性样品的感染毒株均为美洲型,分属于1、5、8等3个谱系,其中谱系1(NADC30类和NADC34类)占比最高(23/37),有6份阳性样品的感染毒株具有强毒株特性。与参考毒株相比,37份阳性样品的GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽、2个高变区、B细胞抗原位点和2个T细胞抗原位点附近;与疫苗株相比,中和抗原表位存在氨基酸突变。结果表明:浙江省存在多个谱系美洲型PRRSV毒株流行,其中谱系1为优势流行毒株,部分毒株具有高致病性;不同毒株间存在一定的基因变异,与疫苗株相比流行毒株也出现了变异。因此,需要继续加强PRRSV监测,及时掌握PRRSV流行毒株的遗传变异状况,以便为PRRS防控提供参考。 姚春雷 王雅婷 安慧婷 张传亮 赵灵燕 徐辉 谢荣辉关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 浙江省猪圆环病毒2型流行株遗传变异分析 2023年 为了解浙江省猪圆环病毒2型(PCV2)基因型和遗传变异情况,本试验对2021年采自浙江省不同地区的27份PCV2阳性病料进行PCV2全基因组扩增、克隆和测序,并将其全基因组、ORF 2基因核苷酸序列及其推导的Cap蛋白氨基酸序列与不同国家和地区的流行株进行遗传变异分析。结果显示,27株PCV2流行株之间全基因组和ORF 2基因核苷酸序列同源性分别为91.0%~99.9%和81.7%~99.9%,与不同国家和地区的PCV2参考株之间全基因组和ORF 2基因核苷酸序列同源性为90.7%~99.9%和81.8%~100%。遗传进化树分析显示,27株PCV2流行株分别处于4个分支,其中8株为PCV2a基因型,6株为PCV2b基因型,12株为PCV2d基因型,1株为PCV2e基因型。27株PCV2流行株Cap蛋白的糖基化位点和核定位信号区氨基酸序列呈高度保守,B细胞抗原表位和T细胞抗原表位存在多个氨基酸突变。结果表明,浙江省多种基因型PCV2共存,以PCV2d基因型流行为主。本试验结果对于了解浙江省PCV2流行毒株的基因型和变异状况具有重要的意义。 张璐 安慧婷 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 孙仁杰 刘霞 赵灵燕 徐辉 谢荣辉关键词:猪圆环病毒2型 基因型 遗传变异分析