目的:观察Nox2对AngⅡ活化的人肾上腺皮质腺癌细胞(H295R细胞)醛固酮合成的影响。方法:将H295R细胞分为正常对照组、AngⅡ、AngⅡ+gp91ds-tat(Nox2抑制剂)组、AngⅡ+PEG-Cat(H_(2)O_(2)清除剂)组、AngⅡ+Nox2 si RNA组及不同时间的AngⅡ组,采用Q-PCR和western blot检测醛固酮合成酶(CYP11B2)和Nox2基因及蛋白水平;放免法检测细胞上清液醛固酮浓度;应用流式细胞术和酶标仪检测细胞内Nox2来源的ROS和H_(2)O_(2)的含量。结果:10 nmol/L AngⅡ以时间依赖性增加H295R细胞内ROS和H_(2)O_(2)含量、Nox2和CYP11B2表达、醛固酮合成(P<0.05)。与正常对照组相比,gp91ds-tat和PEG-Cat明显降低AngⅡ诱导的细胞内ROS和H_(2)O_(2)含量(P<0.05),而gp91ds-tat组和PEG-Cat组AngⅡ诱导的细胞内ROS和H_(2)O_(2)抑制作用无差别(P>0.05)。10nmol/L AngⅡ处理24 h诱导H295R细胞CYP11B2表达(P<0.05),而gp91ds-tat组、PEG-Cat组和Nox2 si RNA组明显抑制AngⅡ诱导H295R细胞CYP11B2表达(P<0.05)。结论:Nox2来源的ROS在AngⅡ诱导的醛固酮合成过程中起主要调控作用。
