胡川
- 作品数：5 被引量：29H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 美洲大蠊主要变应原的纯化与免疫学鉴定
- 蟑螂变应原是一种主要昆虫过敏原(变应原)。在我国南方,美洲大蠊为蟑螂优势种群。自Bernton等于1964年首次报道了蟑螂是引起Ⅰ型变态反应的一种重要昆虫变应原后,国内外学者对蟑螂和变态反应性疾病(如外源性哮喘等)的关系...
- 胡川刘志刚邢苗高波
- 文献传递
- 美洲大蠊特异性抗原的蛋白印迹分析被引量：4
- 2006年
- 目的探讨美洲大蠊不同时期抗原成份分析以及特异性抗原组分鉴定。方法本文通过采用Coca's提取液提取得到美洲大蠊粗浸液抗原,通过饱和(NH4)2SO4沉淀以及十二烷基磺酸钠聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PASE),对其抗原成份进行分析,并选用对蟑螂过敏性疾病患者阳性血清进行免疫印迹试验(Western-blotting)。结果美洲大蠊成虫、若虫、幼虫、虫卵生活史不同时期及不同部位抗原各有不同数量的蛋白条带,但生活史各阶段均出现6条蛋白主带,分别为:92、78、66、56、52和40kD,免疫印迹显示其92、78、49和26kD为美洲大蠊成虫特异性变应原,其中78kD是主要变应原。结论美洲大蠊78kD蛋白为主要变应原,92、49和26kD为次要变应原,本研究为蟑螂变应原诊断试剂和疫苗的研制奠定了基础。
- 韩国庆刘志刚阴伟雄胡川白羽林立丰
- 关键词：美洲大蠊抗原SDS-PAGE
- 美洲大蠊主要变应原蛋白的质谱鉴定与分析被引量：7
- 2005年
- 为了建立美洲大蠊 Periplaneta americana变应原蛋白的质谱鉴定方法, 我们将美洲大蠊粗浸液通过 DEAE-52 离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离步骤得到纯化的74 kD蛋白, 对纯化前后的该74 kD蛋白分别进行SDS-PAGE及凝胶内胰酶酶切, 再经液相色谱-电喷雾-串联质谱 (HPLC-ESI-MS-MS) 在线联机分析, 所得质谱数据进入网站 (http: www.matrixscience. com) 进行Mascot检索比对。通过对两者质谱鉴定结果的比较来评估美洲大蠊天然主要变应原蛋白的纯化效果。结果表明, 纯化蛋白经HPLC-ESI-MS-MS鉴定是美洲大蠊主要变应原蛋白; 离子交换层析等纯化步骤可以去除同一分子量的杂蛋白 (如卵黄原蛋白), 从而获得较好的鉴定结果。我们首次成功地运用质谱建立起变应原蛋白的新鉴定方法。
- 胡川刘志刚李金生韩庆国林立丰阴伟雄
- 关键词：美洲大蠊液相色谱电喷雾串联质谱变应原
- 美洲大蠊主要变应原的纯化与免疫学鉴定被引量：7
- 2005年
- 为利用蛋白纯化技术获得较高纯度美洲大蠊天然主要变应原,以进一步提高临床诊断的特异性和免疫治疗疗效。美洲大蠊全虫粗浸液通过DE-52离子交换层析、HiprepSephacrylS-200凝胶过滤层析等分离步骤得到了纯度为90%的目的蛋白,回收率为26%,经WesternBlotting分析74kDa的蛋白质具有免疫原性,为变应原疫苗的纯化和标准化奠定了基础。
- 胡川刘志刚林立丰阴伟雄李金生
- 关键词：美洲大蠊变应原层析纯化美洲大蠊纯化技术免疫学凝胶过滤层析
- 刀额新对虾变应原的分离、鉴定与纯化被引量：11
- 2006年
- 目的通过对我国常见的刀额新对虾变应原蛋白进行分离、鉴定与纯化,以提供虾特异性变应原用于食物变态反应疾病的诊断和治疗。方法通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离刀额新对虾的蛋白质组分并测定其分子量,收集过敏病人血清,采用免疫印迹(Western-blotting)法鉴定其变应原成分,通过离子交换层析对刀额新对虾变应原进行初步纯化,通过疏水层析和凝胶过滤层析进一步对变应原纯化。结果刀额新对虾有17条蛋白带,其中主要条带有10条,68和36 kD为可与虾过敏性病人血清IgE结合的特异性变应原;通过各种层析方法纯化出刀额新对虾68 kD变应原,纯度为96%。结论对刀额新对虾变应原进行分离、鉴定和纯化,得到高纯度的68 kD刀额新对虾变应原,为临床虾变态反应疾病的诊断和治疗奠定基础。
- 喻海琼刘志刚张帆胡川
- 关键词：刀额新对虾变应原疏水层析凝胶过滤层析
