杨凯
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：福州大学化学化工学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金教育部重点实验室基金更多>>
- 相关领域：理学化学工程生物学医药卫生更多>>
- 手性药物前体R(-)-扁桃酸的生物不对称合成被引量：4
- 2007年
- 目的研究生物不对称催化苯乙酮酸合成手性药物前体R(-)-扁桃酸。方法通过对本实验室保存的12株酵母菌进行初筛,获得对底物苯乙酮酸具有较高催化活性的菌株S.c.1,S.c.3和S.c.10。进一步对其进行紫外与微波诱变,得到R(-)-扁桃酸高产菌株S.c.10.2.8。结果在转化培养中,初始底物浓度为20mmol.L-1,pH6.6,温度34℃,R(-)-扁桃酸得率85%,对映体过量值(e.e)>99%。结论生物转化法在生产手性药物前体R(-)-扁桃酸中前景广泛。
- 郭黛苹许小平杨凯李忠琴裴保俊
- 关键词：手性生物转化
- 高效液相色谱法测定手性生物转化中肾上腺素与肾上腺酮被引量：2
- 2007年
- 应用离子对反相离子对高效液相色谱法测定了手性生物转化中肾上腺素和肾上腺酮的含量,将活化的菌株接种至液体培养基中,培养24 h后加入肾上腺酮(910 mg.L-1),在pH 5.5振荡培养并定时取样,取发酵液离心10 min(转速10 000 r.min-1),取上层清液经0.2μm滤膜过滤后供HPLC测定。用色谱柱(ODS C18)作固定相,流动相由甲醇及25 mmol.L-1乙酸-乙酸钠缓冲液按15比85体积比混合后组成。此缓冲液中含4 mmol.L-1庚烷磺酸钠,流速为1 mL.min-1,测定时采用紫外检测,波长为233 nm。肾上腺素及肾上腺酮分别在质量浓度为28～1 800 mg.L-1及36～1 350 mg.L-1范围内与相应的峰面积之间呈线性关系,信噪比S/N为3时,两者的检出限分别为1.4,2.8 mg.L-1,回收率试验所得结果在99.3%～100.3%之间。
- 李忠琴郭黛苹杨凯王武许小平
- 关键词：高效液相色谱法肾上腺素
- 反相离子对高效液相色谱法检测肾上腺素与肾上腺酮被引量：2
- 2006年
- 采用反相离子对高效液相色谱法测定肾上腺素与肾上腺酮．流动相为甲醇：25mmol／L醋酸钠-醋酸缓冲液（15：85，V／V），庚烷磺酸钠（5mmol／L）为离子对试剂，流速1．0mL／min，检测波长233nm，柱温25℃．在肾上腺素与肾上腺酮浓度分别为36-1800mg／L，36～1350mg／L范围内，其质量浓度与峰面积呈现良好的线性关系（r=0．9998，0.9995）．当信噪比（S／N）为3时，二者的最低检测浓度分别为1．4和2．8mg／L．该法灵敏度高，可用于肾上腺素与肾上腺酮的定量分析．
- 郭黛苹李忠琴杨凯许小平
- 关键词：反相高效液相色谱离子对试剂肾上腺素
- 生物催化肾上腺酮不对称合成R-肾上腺素被引量：1
- 2007年
- 研究了生物不对称还原肾上腺酮生成单一对映体R-肾上腺素.以肾上腺酮为前体,从土壤中筛选到一株对肾上腺酮具有较高立体选择性催化的菌株S289,以其为出发菌株,依次进行紫外和亚硝酸诱变,得到R-肾上腺素高转化菌株UN-78.确定了最佳转化条件,在初始底物浓度为10 mmol/L、摇床转速180 r/m in、温度30℃和pH 6.5,R-肾上腺素得率达56.2%,对映体过量值e达到99.8%.
- 杨凯郭黛苹李忠琴许小平
- 关键词：手性药物菌种选育生物转化
- 产R-肾上腺素脱氢酶菌种筛选与产酶条件研究
- 2007年
- 以肾上腺酮为底物,在1 300余份土壤中筛选到一株不对称还原肾上腺酮生成R-肾上腺素的菌株S289,产物得率为23.3%,对映体过量值e.e.高达99%,并对其产酶条件进行了研究,使其酶活和比酶活分别提高了168%和230%.
- 杨凯郭黛苹李忠琴陈倍陈必钦许小平
- 关键词：生物转化
- (R)-肾上腺素高产菌株发酵培养基的优化被引量：1
- 2009年
- 为了充分发挥出突变株的高转化活性及其优良特性,采用响应面试验设计方法优化(R)-肾上腺素高产菌株Kocuria rhizophila(K.rhizophila).H5401的发酵培养基。用Plackett-Burman设计法研究初始发酵培养基中各成分对(R)-肾上腺素产率的影响,筛选出有显著效应的3个因素:甘油、蛋白胨和NH_4H_2PO_4。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。通过Box-Behnken中心组合实验和响应面分析方法确定出3个主要影响因素的最佳浓度。实验结果经过回归分析拟合出1个2次方程,用其预报的最优培养基做摇瓶发酵试验,(R)-肾上腺素产率达61.07%,比优化前提高了24.89%,表明响应面试验设计优化方法有效提高了(R)-肾上腺素的产量,降低了生产成本,为后续放大实验提供依据。
- 陈必钦杨凯陈倍阮文兵许小平
- 关键词：发酵培养基响应面分析法
- (R)-(–)-扁桃酸的不对称生物合成被引量：3
- 2007年
- 研究了生物不对称催化苯乙酮酸合成(R)-(–)-扁桃酸的方法。通过对38株菌进行初筛,获得对底物苯乙酮酸具有较高转化活性的出发菌株假丝酵母Ca.3。进一步紫外与微波诱变,得到具有高转化率与高对映体选择性的突变菌株Ca.3.37.48。在转化培养中,选择初始底物浓度30mmol/L、pH7.0、温度32℃的条件,(R)-(–)-扁桃酸得率86.5%,对映体过量值为99.5%。
- 郭黛苹许小平杨凯李忠琴
- 关键词：生物转化假丝酵母
- 手性药物前体R(-)-扁桃酸的生物不对称合成被引量：3
- 2006年
- 目的研究生物不对称催化苯乙酮酸合成手性药物前体R(-)-扁桃酸。方法通过对该实验室保存的12株酵母菌进行初筛,获得对底物苯乙酮酸具有较高催化活性的菌株S.c.1,S.c.3和S.c.10。进一步对其进行紫外与微波诱变,得到R(-)-扁桃酸高产菌株S.c.10.2.8。结果在转化培养中,初始底物浓度为20mmol/L,pH6.6,温度34℃,R(-)-扁桃酸得率85%,对映体过量值e.e>99%。结论生物转化法在生产手性药物前体R(-)-扁桃酸中前景广泛。
- 郭黛苹李忠琴杨凯杨元营许小平
- 关键词：手性生物转化
